復合非淀粉多糖酶制劑對肉雞生長性能及腸道酶活性的影響

程志斌 蘇子峰 張紅兵 魏 云 王記林 廖啟順

肉雞玉米-豆粕型日糧在我國飼料工業中的應用十分廣泛，但隨著近幾年來，玉米、豆粕等常規飼料原料價格的日益高漲（李曉珍等,2010），在實際生產中更多使用玉米-豆粕型日糧中添加麥麩、次粉、雜粕等非常規飼料原料，以降低飼料配方成本。這些非常規植物飼料原料中含有相對比例較高的非淀粉多糖（non-starch polysaccharides,NSP），如果在肉雞日糧中大量添加，將抑制腸道消化酶活性，從而降低肉雞生長性能（李成良等,2009）。為了消除NSP抗營養因子的影響，單一NSP酶制劑的研究和使用效果得到了廣泛認可（Adeol等，2004；Senkoylu等,2004;李路勝等,2010;王鵬宇等,2010）。隨著飼料和養殖企業使用的非常規飼料原料日益多樣化及添加比例不斷提高，將單一NSP酶制劑組合使用的復合NSP酶制劑更具優勢，是未來酶制劑產品的主要發展趨勢之一（馮定遠等，2010）。然而，當前市售商業復合NSP酶制劑產品繁雜，使用效果差異較大（蘇軍等，2006；王允超等，2010；張青青等，2010）。為了探討NSP酶制劑在肉雞上使用效果差異的作用機理，為廣大養殖戶和飼料企業選用復合NSP酶制劑產品提供科學依據，本試驗重點研究復合NSP酶制劑對肉雞腸道消化酶的影響。

1 材料與方法

1.1 復合NSP酶制劑

當前市售復合NSP酶制劑產品的酶種類和酶活性差異較大，一般產品的建議添加量可以分為“低、中、高”3個劑量，以滿足不同客戶實際使用的需求。本試驗遵循實際生產情況，選擇了添加0.15、0.5、1 kg/t全價日糧的3個商業NSP酶制劑產品進行試驗。為了充分說明試驗結果，我們實測了3個產品中各種NSP酶的活性（見表1）。

表1 NSP酶制劑產品的酶活性實測值（U/g）

1.2 試驗動物與試驗設計

將200只21日齡羅斯（ROSS）肉雞分成5個處理組：處理1組（正對照組）、處理2組（負對照組），處理3～5組在負對照組日糧基礎上各添加一種復合NSP酶制劑商業產品，NSP酶制劑添加量與試驗分組設計見表2。正對照組和負對照組日糧營養水平一致，負對照組選用了一定比例的非常規飼料原料。每個處理組40只肉雞，公母各半。試驗在云南農業大學試驗雞場進行，試驗周期21 d，至肉雞42日齡，統計生長性能后，每個處理組挑選10只（重復數10）屠宰，測定腸道消化酶活性。

表2 試驗處理組與酶制劑添加量及酶活性計算值

1.3 試驗日糧

參考農業部標準《雞飼養標準（2004）》并結合云南省養殖實際情況配制基礎日糧(見表3)。處理1組(正對照)基礎日糧設計為玉米-豆粕型常規日糧；處理2組(負對照)在玉米-豆粕型日糧基礎上使用了非常規飼料原料麥麩、次粉、DDGS，占全價日糧的比例9%；處理3～5組在處理2組基礎上分別添加3個復合NSP酶制劑商業產品（加入預混料中）。所有試驗日糧低溫（65℃）加工成顆粒飼料。

1.4 飼養管理

自然光照輔以人工照明，光照時間22 h，乳頭式飲水，自由采食，專人負責飼養試驗并記錄。

1.5 測定指標

肉雞生長性能指標統計平均日增重、平均日采食量及飼料轉化效率（料肉比）。肉雞至42日齡，每個處理組隨機抽取10只健康雞處死。分別取十二指腸、空腸及其內容物測定主要消化酶的酶活性。樣品前處理參考黃曉亮等（2009）制備。蛋白酶活性測定采用福林-酚試劑法，定義為38℃每1 min水解酪蛋白產生1 μg酪氨酸的酶量為1個酶活力單位（U）。淀粉酶活性采用碘淀粉比色法，定義為38℃每1 min水解釋放1 μmol還原性碳水化合物（以一水麥芽糖計算）所需的酶量為1個酶活力單位。脂肪酶活性采用滴定法，定義38℃每1 min脂肪酶水解脂肪并中和1 μmol氫氧化鈉的酶量為1個酶活力單位（繆輝南等,1983）。

表3 基礎日糧組成及營養水平

1.6 統計分析

數據采用SAS統計軟件進行單因素方差分析和鄧肯氏多重比較，P≤0.05差異顯著。

2 結果

2.1 復合NSP酶制劑對肉雞生長性能的影響(見表4)

由表4可知，處理1組（正對照組）肉雞的末體重顯著高于（P≤0.05）處理2組（負對照組）。處理3～5組肉雞日糧均添加了一種復合NSP酶制劑，其中處理3組肉雞的料肉比顯著優于（P≤0.05）處理1、2和5組；末體重指標，處理3和4組間無顯著差異（P>0.05），但顯著高于處理2和5組。

2.2 復合NSP酶制劑對肉雞十二指腸消化酶活性的影響(見表5)

由表5結果顯示，處理2組肉雞十二指腸及其內容物的淀粉酶和蛋白酶活性顯著低于（P≤0.05）處理1組。處理3組肉雞十二指腸淀粉酶以及十二指腸內容物蛋白酶性顯著高于處理1組和處理2組。總體而言，處理4組和5組之間肉雞的十二指腸淀粉酶和蛋白酶活性差異不顯著（P>0.05），但顯著低于處理3組。此外，所有處理組之間，十二指腸的脂肪酶活性差異不顯著。

2.3 復合NSP酶制劑對肉雞空腸消化酶活性的影響(見表 6）

由表6結果顯示，除脂肪酶外，處理2組肉雞空腸及其內容物的淀粉酶和蛋白酶活性均顯著低于（P≤0.05）處理1組。處理3組肉雞空腸內容物的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性顯著大于其它4個處理組（P＜0.05）。處理組4肉雞空腸蛋白酶活性與處理3組相比差異不顯著（P＞0.05），但顯著高于處理5組。此外，所有處理組之間，空腸的脂肪酶活性差異不顯著。

表4 復合NSP酶制劑對肉雞生長性能的影響

表5 復合NSP酶制劑對肉雞十二指腸消化酶活性的影響

表6 復合NSP酶制劑對肉雞空腸消化酶活性的影響

3 討論

本試驗從肉雞腸道消化酶的角度探討復合NSP酶制劑對肉雞生長性能的影響，因此試驗日糧配方設計重點考慮以下幾點：其一，日糧營養水平參考農業部標準《雞飼養標準（2004）》，并結合云南省昆明市（高原地區）實際養殖情況配制，所有處理組營養水平一致；其二，處理1組設計為常規玉米-豆粕型日糧的正對照組，處理2組設計為在玉米-豆粕型日糧基礎上添加一定比例的非常規飼料原料的負對照組，這有利于觀察在處理2組基礎上添加3種劑量復合NSP酶制劑的作用效果；其三，非常規飼料原料選用了麥麩、次粉、DDGS，理由是這3種通常使用的非常規飼料原料具有相對較高含量的木聚糖、葡聚糖、纖維素等NSP抗營養因子（蘇軍等，2006；汪勇,2008）。

大量研究顯示，單一NSP酶制劑主要包括：木聚糖酶、葡聚糖酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶等（Adeol等，2004；Senkoylu 等，2004；蘇軍等，2006；馮定遠等，2010；王允超等，2010；張青青等，2010）。木聚糖酶主要作用主碳鏈，專一降解由木糖連接而成的β-1，4糖苷鍵（Adeol等，2004）；葡聚糖酶專一降解葡聚糖鏈內的 β-1，3糖苷鍵（Senkoylu等，2004）；纖維素酶可以分為內切和外切纖維素酶2種，將纖維素分解為纖維二糖和纖維糊精（王敏輝，2009）；甘露聚糖酶降解由甘露糖連接而成的β-1，4糖苷鍵（汪勇，2008）。果膠酶（Pectic enzyme）較復雜，通常認為可以分為3種，包括果膠酯酶（Peetinestersase）、果膠酶（Pectinase）、原果膠酶（Protopeetinase），果膠酶主要水解果膠中以α-1,4糖苷鍵結合的半乳糖醛（許毅等，2004；王寶維等,2009）。當前，隨著飼料和養殖企業使用的非常規飼料原料日益多樣及比例提高，畜禽日糧添加復合NSP酶制劑已經成為共識。

本試驗按照市售復合NSP酶制劑產品一般建議添加劑量，選擇了 0.15、0.5、1 kg/t的“低、中、高”劑量的3個商業產品進行試驗。由于在全價配合飼料中NSP酶活性無規范的標準方法測定，為了充分說明本試驗結果，我們實測了試驗選擇的復合NSP酶制劑產品的酶種類和酶活性（見表1），并計算各個NSP酶活性在肉雞試驗全價日糧中的理論值（見表2）。總體而言，處理4組肉雞日糧中NSP酶制劑缺果膠酶和甘露聚糖酶；處理5組缺甘露聚糖酶；而處理3組肉雞日糧中復合NSP酶制劑的酶種類齊全，且理論計算添入試驗日糧的單一NSP酶活性高于處理4、5組（見表2）。以上結果充分證明，當前市售商品復合NSP酶制劑的酶種類和酶活性存在很大差異，顯然這直接影響針對非常規飼料原料底物NSP抗營養因子的降解效果，是實際生產中不同商品復合NSP酶制劑使用效果差異的重要原因之一。結合酶活性的試驗測定結果，本文進一步討論復合NSP酶制劑對肉雞生長性能及腸道消化酶活性的影響。

處理1組(正對照)采食正常日糧肉雞的末體重顯著高于（P≤0.05）添加了占總量9%麥麩、次粉、DDGS等非常規飼料原料的處理2組(負對照)的肉雞。這一結果證明，由于NSP的抗營養作用，高比例的非常規飼料原料降低了肉雞生長性能。進一步而言，也證明本試驗的正、負對照組模型設計合理。在負對照組日糧基礎上添加復合NSP酶制劑的處理3～5組，其中處理3組肉雞的料肉比顯著優于（P≤0.05）處理1、2和5組；末體重指標，處理3和4組間無顯著差異（P＞0.05），但顯著大于處理2和5組。這與我們測定的處理3組日糧添加復合NSP酶制劑產品的酶種類全、酶活性高于處理組4和5組結果一致（見表2）。以上分析提示：在日糧營養水平設置相同的條件下（見表3），酶種類全、酶活性高的復合NSP酶制劑可能通過改善肉雞對飼料的消化率，來提高肉雞生長性能。因此，本試驗進一步分析復合NSP酶制劑對肉雞小腸消化酶活性的影響。

表5和6結果顯示，由于日糧添加高比例的非常規飼料原料（麥麩、次粉、DDGS）含有相對較高的NSP，造成處理2組(負對照)肉雞十二指腸、空腸及其內容物的淀粉酶和蛋白酶活性顯著低于處理1組(正對照)，這說明日糧飼料中高含量的NSP對肉雞腸道消化酶有抑制作用，不利于肉雞對飼料營養物質的消化吸收，雖然日糧營養水平一致，但消化率降低，造成肉雞生長性能下降。本試驗結果與Choct等（1995）報道一致。處理3組肉雞十二指腸及空腸淀粉酶和蛋白酶活性顯著大于負對照組，與正對照組相近。這充分證明，添加復合NSP酶制劑不僅針對性降解日糧中NSP，降低抗營養作用，且具有促進肉雞消化道酶分泌、提高飼料消化率的作用。此外，處理3組肉雞十二指腸和空腸內容物中的蛋白酶活性顯著大于處理4和5組，證明NSP酶制劑促進肉雞消化酶分泌的作用具有劑量效應。總體而言，由于當前非常規飼料原料添加比例較高，因此酶種類全、酶活性高的復合NSP酶制劑對降低飼料NSP抗營養作用，提高小腸消化酶活性，改善肉雞生長性能，具有更佳的作用效果。

4 小結

本試驗證明，酶類齊全、酶活性高的復合NSP酶制劑產品通過提高肉雞小腸消化酶活性，具有更好促進肉雞生長性能的效果。因此建議用戶選用復合NSP酶制劑，不能單純按產品建議添加量使用，有條件最好實測產品中的酶種類和酶活性。

[1]李曉珍,蘇子峰,姚俊,等.2010年上半年云南省飼料工業形勢與飼料企業應對方式[J].飼料博覽,2010(11):61-62.

[2]李成良,張海燕.非淀粉多糖酶對肉雞生產性能、養分利用率及盲腸微生物的影響[J].飼料工業,2009,30(6):11-14.

[3]Adeol O,Bedford M R.Exogenous dietary xylanase ameliorates viscosity-induced anti-nutritional effects in wheat-based diets or white Pekin ducks(Anas platyrhinchos domesticus)[J].Br.J.Nutri.,2004,92:87-94.

[4]Senkoylu N,Akyurek H,Samli H E.Implications of β-glucanase and pentosanase enzymes in low-energy low-protein barley and wheat based broiler diets[J].Czech.J.Anim.Sci.,2004,49(3):108-114.

[5]李路勝,周響艷.甘露聚糖酶對肉雞腸道微生物和免疫機能的影響[J].飼料工業,2010,31(6):15-18.

[6]王鵬宇,龔月生,張磊,等.木聚糖酶對肉雞生產性能和腸道內源酶活性的影響[J].中國家禽,2010,32(9):11-14.

[7]馮定遠,左建軍.飼料酶制劑的分類和化代及其理論基礎[C]//論文集.蔡輝益主編.中國林牧漁業經濟學會飼料經濟專業委員會第七屆學術交流大會,2010:103-108.

[8]蘇軍,陳代文.非淀粉多糖酶制劑在動物營養中的研究進展[J].家畜生態學報,2006,27(1):79-83.

[9]王允超,于愛梅,范志恒,等.小麥日糧噴涂復合酶對肉雞AME及回腸食糜黏度的影響[J].飼料工業,2010,31(2):21-23.

[10]張青青,楊在賓,楊維,等.玉米-豆粕型日糧中添加耐高溫復合酶制劑對肉雞養分利用率的影響 [J].飼料工業,2010,31(4):43-48.

[11]黃曉亮,劉艷芬,廖建財,等.谷氨酰胺對肉雞腸道發育及小腸消化酶活性的影響[J].中國飼料,2009(14):38-41.

[12]吉爾鮑特著.繆輝南,陳石根譯.酶法分析手冊[M].上海：上海科學技術出版社,1983.

[13]汪勇.非淀粉多糖酶制劑的研究進展[J].飼料工業,2008,28(8):13-16.

[14]王敏輝.飼用纖維素酶的研究進展[J].飼料博覽,2009(11):27-30.

[15]許毅,周巖民,王恬,等.果膠酶在飼料中的應用 [J].中國飼料,2004(1):12-14.

[16]王寶維,荊麗珍,張倩,等.果膠酶對鵝纖維及鈣、磷消化率的影響[J].吉林農業大學學報,2009,31(6):738-740、775.

[17]Choct M,Hughes R J,Wang J,et al.Feed enzymes eliminate the anti-nutritive effect by NSP and modify fermentation in broilers[J].Proc.Aust.Poult.Sci.Symp.,1995,7:121-125.