半夏瀉心湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型胃腸激素的影響

王 營(yíng) 李曉軍 (三河市東杉醫(yī)院,河北 三河 065200)

半夏瀉心湯是張仲景《傷寒論》中治療誤下傷中,以致少陽(yáng)熱邪乘虛內(nèi)陷,郁結(jié)心下,形成寒熱互結(jié),虛實(shí)夾雜,陰陽(yáng)失調(diào),升降失常心下痞滿,或嘔或利的主方。該方具有辛開(kāi)苦降、調(diào)和寒熱之功,可治療脾胃同病,氣機(jī)阻滯的痞滿。潰瘍性結(jié)腸炎(UC)又稱慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎(CUC),為一種原發(fā)性器官特異的自身免疫性疾病,其病因尚未完全明確,目前認(rèn)為主要與免疫異常有關(guān)。參與的多種炎癥細(xì)胞及免疫細(xì)胞釋放抗體、細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)等,引起組織破壞及炎性病變。可能與自身免疫、感染、遺傳因素及精神因素有一定關(guān)系〔1〕。國(guó)內(nèi)外主要采用免疫抑制劑柳氮磺胺吡啶進(jìn)行治療,對(duì)急性或慢性病急性發(fā)作的活動(dòng)性UC患者,采用皮質(zhì)類(lèi)固醇治療,也有用硫唑嘌呤維持的。但上述藥物治療時(shí)間長(zhǎng),不良反應(yīng)較多,且易復(fù)發(fā)。本研究采用拆方與全方對(duì)比的分析方法,對(duì)UC大鼠模型胃腸激素 P物質(zhì)(SP)、舒血管腸肽(VIP)含量檢測(cè),觀察比較療效。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠 60只,200～220 g,雌雄各半,由本校動(dòng)物室提供。

1.2 藥品及試劑 黃芩、黃連、人參、半夏、干姜、甘草、大棗,購(gòu)自承德市醫(yī)藥公司;醋酸,由天津市凱通化學(xué)試劑有限公司提供;鹽酸,由天津市凱通化學(xué)試劑有限公司提供;SP、VIP分析藥盒,購(gòu)自北京航天醫(yī)學(xué)工程研究所。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 SD大鼠隨機(jī)分 6組,即正常組、模型組、辛開(kāi)組(半夏,干姜)、苦降組(黃芩,黃連)、甘調(diào)組(人參,甘草,大棗)、辛開(kāi)苦降組(全方組),每組 10只。正常組不作任何處理,每天以 10ml/kg生理鹽水灌胃,其他 5組實(shí)驗(yàn)前禁食 24 h,不禁水,將直徑 3 mm聚乙烯導(dǎo)管經(jīng)肛門(mén)插入至結(jié)腸內(nèi),深度 5～6 cm,隨后注入 8%醋酸 1.5 ml,保留 15 s,注入生理鹽水 3 ml,消除醋酸的作用〔1〕。2d后模型組每天以 10ml/kg生理鹽水灌胃外,其他 4組分別用相應(yīng)的中藥水煎劑 10 ml/kg灌胃,連續(xù)3 w后將各組動(dòng)物斷頭處死,每只大鼠取 5 g左右的大腸并稱重,放入預(yù)冷的試管,加入適量的0.1mol/L HCl立即沸水中煮沸 10 min以滅活蛋白酶,用玻璃勻漿器勻漿,16 000r/min離心20 min,取上清,貯于 -20℃冰箱備測(cè)。按 SP、VIP分析藥盒說(shuō)明書(shū)操作程序測(cè)定結(jié)果,最后按組織勻漿實(shí)際稀釋倍數(shù)計(jì)算出每克濕重組織中 SP、VIP含量,作統(tǒng)計(jì)分析〔2〕。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS12統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

模型組 SP、VIP含量明顯增高,與正常組比較有差異性(P＜0.05);合方組與拆方組含量較模型組明顯降低(P＜0.05);辛開(kāi)組與苦降組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);而合方組與各組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表 1。

表1 大鼠UC腸管SP和VIP含量比較(±s,n=10,ng/g)

表1 大鼠UC腸管SP和VIP含量比較(±s,n=10,ng/g)

與模型組比較:1)P＜0.05;與辛開(kāi)苦降組比較:2)P＜0.05

組別 SP VIP正常組 23.79±0.791)2) 834.04±47.591)2)模型組 37.69±2.572) 1 617.65±170.602)辛開(kāi)組 29.47±2.021)2) 1 421.28±152.201)2)苦降組 30.43±1.671)2) 1 466.85±134.501)2)甘調(diào)組 33.21±2.611)2) 1 515.87±167.732)辛開(kāi)苦降組 26.61±2.331) 1 269.38±113.241)2)

3 討 論

祖國(guó)醫(yī)學(xué)將 UC歸屬于“泄瀉”、“腸風(fēng)”、“臟毒”、“便血”等范疇〔2〕。眾多醫(yī)家多從中醫(yī)理論就半夏瀉心湯君藥為半夏給予了闡釋,但缺乏客觀的藥效學(xué)依據(jù)。有研究結(jié)果顯示:半夏對(duì)正常大鼠胃蛋白酶活性具有抑制作用,隨劑量的增加抑制作用增強(qiáng);雖然黨參干姜對(duì)胃分泌也具有抑制作用,但結(jié)合其他研究(半夏瀉心湯對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的影響的實(shí)驗(yàn)研究顯示半夏對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)具有雙向調(diào)節(jié)作用),以及以往對(duì)半夏瀉心湯全方藥效學(xué)的研究〔3,4〕,認(rèn)為半夏與半夏瀉心湯對(duì)小鼠胃分泌的影響方面具有一定的一致性,即半夏的藥效學(xué)作用與半夏瀉心湯所主病癥具有相似性,提示半夏可能為半夏瀉心湯之君藥。

胃腸激素不但存在于胃腸,有的還同時(shí)存在于神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),對(duì)神經(jīng)及免疫有重要的調(diào)節(jié)作用。它們的增多或減少,可以引起胃腸道、免疫、神經(jīng)功能失調(diào)而發(fā)病。胃腸激素中SP和VIP對(duì) UC的發(fā)病起重要作用,SP刺激腸蠕動(dòng),VIP刺激腸液分泌,它們對(duì)胃腸黏膜和平滑肌具有廣泛的調(diào)節(jié)作用,是胃腸運(yùn)動(dòng)和腸分泌的重要調(diào)節(jié)肽,其含量增多,腸平滑肌興奮增高,收縮加強(qiáng),平滑肌痙攣,腸蠕動(dòng)加快,腸分泌增多而導(dǎo)致腹痛、腹瀉。組織缺血、缺氧,毛細(xì)血管通透性增加而形成腸黏膜病理改變而出現(xiàn)膿血黏液便、里急后重。SP和 VIP在消化道作為胃腸激素,在神經(jīng)系統(tǒng)作為神經(jīng)遞質(zhì),在免疫系統(tǒng)能與免疫細(xì)胞相應(yīng)受體結(jié)合產(chǎn)生免疫效應(yīng)。同一物質(zhì)在 3個(gè)系統(tǒng)被利用,其含量改變,導(dǎo)致神經(jīng)-胃腸激素-免疫功能失調(diào)可能是 UC發(fā)病的重要因素。研究表明,UC神經(jīng)內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)存在微妙的改變:腸道神經(jīng)肽表達(dá)、分布及調(diào)節(jié)異常,外周細(xì)胞對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)性也異常。先前認(rèn)識(shí)到,SP、神經(jīng)激肽-1受體上調(diào)與UC乙狀結(jié)腸中噬酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)相一致。近來(lái)發(fā)現(xiàn)〔5〕,固有層中細(xì)胞神經(jīng)生長(zhǎng)因子NGF及受體 P75增多,而腸神經(jīng)結(jié)構(gòu)中腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 BDNF銳減,這種不平衡可能引起患者局部組織炎癥過(guò)度代謝紊亂。尿皮質(zhì)醇Ⅱ(UcnⅡ)能作用于結(jié)腸上皮細(xì)胞的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素受體 2(CRHR2)促進(jìn)炎癥反應(yīng)〔6〕,而在 IBD腸道中 UcnⅡ、CRHR2 mRNA水平升高。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)〔7〕,UC腎上腺素能介導(dǎo)的 IL-10通路障礙:女性UC患者外周血細(xì)胞對(duì) β腎上腺素的反應(yīng)性減弱,導(dǎo)致調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子 IL-10生成減少。

除腸道正常菌群在誘導(dǎo)UC中可能起作用外,不能忽視自身抗原和病原菌超抗原在誘導(dǎo)UC發(fā)生中的特殊作用。在抗原的誘導(dǎo)下,免疫功能調(diào)節(jié)的異常是引起 UC病理學(xué)改變的重要因素。神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)間的相互調(diào)節(jié)作用反面的深入研究可能會(huì)更有助于弄清UC的病因病機(jī)。

本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明辛開(kāi)苦降合法之半夏瀉心湯,能夠降低UC大鼠模型胃腸激素 SP及 VIP的分泌,從而緩解腸平滑肌興奮,收縮減弱,平滑肌痙攣減輕,腸蠕動(dòng)減慢,腸分泌減少,減輕腹痛、腹瀉的臨床癥狀,從而達(dá)到緩解和治愈潰瘍性結(jié)腸炎的目的。

1 楊冬華 .消化系疾病治療學(xué)〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:284.

2 黃志欣,勞紹賢,崔琦珍,等.潰結(jié)靈顆粒治療活動(dòng)期潰瘍性結(jié)腸炎的臨床與實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化雜志,2003;3(11):141.

3 溫武兵,張桂珍,葉向榮 .半夏瀉心湯調(diào)和胃腸作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中國(guó)醫(yī)藥學(xué)報(bào),2000;15(2):66.

4 麻春杰.半夏瀉心湯對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠胃運(yùn)動(dòng)的影響〔J〕.實(shí)用中醫(yī)藥雜志,1996;4(1):31.

5 Johansson M,Norrgrd O,Collins JE,et al.Study of expression patterns and levels of neurotrophins and neurotrophin receptors in ulcerative colitis〔J〕.Inflamm Bowel Dis,2007;13(4):398-409.

6 Moss AC,Anton P,Savidge T,et al.UrocortinⅡmediates pro-inflammatory effects in human colonocytes via corticotropin-releasing hormone receptor 2〔J〕.Gut,2007;56(9):1210-7.

7 Langhorst J,Cobelens PM,Kavelaars A,et al.Stress-related peripheral neuroendocrine-immune interactions in women with ulcerative colitis〔J〕.Psychoneuroendocrinology,2007;32(8-10):1086-96.