范 穎 李 楠 孫云峰 林庶茹
1遼寧中醫藥大學方劑學科,沈陽 110000;2遼寧中醫藥大學中醫分子生物學實驗室
黃芪有效部位對糖尿病模型大鼠肝和骨骼肌組織脂聯素水平、AdipoR1、AMPK mRNA及蛋白表達的影響
范 穎1李 楠1孫云峰2林庶茹2
1遼寧中醫藥大學方劑學科,沈陽 110000;2遼寧中醫藥大學中醫分子生物學實驗室
目的:通過糖尿病模型大鼠肝、骨骼肌組織中脂聯素、脂聯素受體1(AdipoR1)、腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)mRNA及蛋白表達的變化,探討黃芪有效部位調節糖尿病大鼠脂代謝的作用機理。方法:將168只SD大鼠根據血糖和體重隨機分為:正常組、模型組、中藥對照組、西藥對照組、黃芪組、黃芪黃酮組(黃酮組)、黃芪多糖組(多糖組)、黃芪皂苷組(皂苷組)、黃芪黃酮多糖組(酮糖組)、黃芪黃酮皂苷組(酮苷組)、黃芪多糖皂苷組(糖苷組)、黃芪黃酮多糖皂苷組(酮糖苷組)。一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ,52mg/kg)復制糖尿病模型,并給予黃芪及其有效部位進行干預,給藥劑量相當于黃芪生藥量6.3g/kg,連續30天。血糖儀檢測隨機血糖;生化分析儀檢測血清膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂
蛋白膽固醇(HDL-C);ELISA檢測肝、骨骼肌組織的脂聯素水平;實時定量PCR分析肝、骨骼肌AdipoR1和AMPK mRNA水平;Western Blotting分析肝、骨骼肌AdipoR1和AMPK的蛋白水平。結果:糖尿病模型大鼠血糖、血脂顯著升高,肝和骨骼肌組織中脂聯素水平顯著降低,AdipoR1、AMPK mRNA及蛋白表達水平下降(P<0.05)。與模型組比較,黃芪組、黃酮組、酮苷組、酮糖苷組血糖、血脂降低(P<0.05);黃芪組、酮苷組、酮糖苷組的肝和骨骼肌組織中脂聯素水平升高(P<0.05),并顯著高于其它給藥組(P<0.05);黃芪組、黃酮組、酮糖組的肝和骨骼肌組織中AdipoR1 mRNA及蛋白表達水平上升(P<0.05);黃芪組、黃酮組、酮糖苷組的肝和骨骼肌組織中AMPK mRNA及蛋白表達水平上升(P<0.05)。結論:黃芪黃酮是黃芪干預糖尿病模型大鼠血糖、血脂的主要有效部位,其作用機制可能與脂聯素結合受體激活AMPK信號轉導通路有關。