正交試驗(yàn)法優(yōu)選止痛散中總揮發(fā)油提取工藝的研究

劉鏡聯(lián) 劉佳舉 林鳳梅 蔣永和 覃文紅

廣東省廣州市東升醫(yī)院，廣東 廣州 510140

止痛散是廣州市東升醫(yī)院經(jīng)廣東省食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的醫(yī)院制劑 (批準(zhǔn)文號(hào):粵Z20070660)，它由乳香、沒藥、沉香、木香、黃連、胡黃連等多味中藥加工而成，是我院名老中醫(yī)經(jīng)多年治療驗(yàn)證，反復(fù)運(yùn)用而得;具有活血化瘀、行氣止痛之功效，臨床上外用于氣滯血瘀所致之痛證。本文采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選止痛散中揮發(fā)油的最佳提取工藝，為規(guī)范制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與儀器

乳香、沒藥、沉香等藥均購(gòu)于廣東省藥材公司中藥飲片廠;蒸餾水(自制);PTHW型電熱套，鞏義市英峽予華儀器廠;FA2004型電子分析天平，上海恒平科學(xué)儀器有限公司;揮發(fā)油提取器(上海玻璃儀器廠)。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 參考有關(guān)文獻(xiàn)［1，2］和大量預(yù)實(shí)驗(yàn)，以總揮發(fā)油得率和為考察指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)方法對(duì)提取工藝參數(shù)影響較大的3個(gè)因素:加水量 (A)、浸泡時(shí)間(B)、蒸餾時(shí)間劑用量 (C)3個(gè)因素進(jìn)行考察。用L9(34)正交表安排試驗(yàn)。因素水平見表1。

表1 正交試驗(yàn)因素水平

2.2 樣品的制備 稱取9份干燥的處方藥材粗粉 (20目)，每份100.00g，置圓底燒瓶中，加水，照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄XD揮發(fā)油測(cè)定甲法［3］。按照正交設(shè)計(jì)表用L9(34)各工藝參數(shù)提取揮發(fā)油，測(cè)得總揮發(fā)油得率，見表2。

表2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果

2.3 方差分析 將正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表3。

以揮發(fā)油總量為考察指標(biāo)，由表2中極差R值大小顯示，RC＞RB＞R A，各因素作用主次依次為C、B、A;由表3中方差分析結(jié)果表明B(浸泡時(shí)間)及C(蒸餾時(shí)間)兩因素的影響具有顯著性意義，以B3C3為最佳，A(加水體積)因素影響無顯著性意義，故選擇A2B3C3為最佳工藝，即藥材加水5倍量、浸泡2小時(shí)、蒸餾5小時(shí)。

2.4 驗(yàn)證試驗(yàn) 為了進(jìn)一步驗(yàn)證正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出的最佳提取組A2B3C3方案的可行性，按照2.2重新做了3組平行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表4，測(cè)得平均總揮發(fā)油率為0.63。結(jié)果表明，提取工藝穩(wěn)定可行。

表3 正交試驗(yàn)方差分析結(jié)果

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

考慮到本方劑中多味藥均含揮發(fā)油成分，作者曾對(duì)方中具芳香性的單味藥分類單獨(dú)提取與合并提取的揮發(fā)油比較，發(fā)現(xiàn)兩者的得油率相近，且化學(xué)成分均未發(fā)生變化，由此綜合考慮提取總揮發(fā)油。本試驗(yàn)最佳提取工藝是藥材加水5倍量、浸泡2小時(shí)、蒸餾5小時(shí);由驗(yàn)證性試驗(yàn)測(cè)得平均總揮發(fā)油率高達(dá)0.63%，RSD%為0.01;因此該提取工藝可行、效率高。

［1］沈紅，狄留慶，徐俊福，等.乳香、沒藥提取工藝可行性研究［J］.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，19(5):292－293.

［2］李麗，周軍，張瑩，等.多指標(biāo)綜合評(píng)分法優(yōu)化痛風(fēng)寧顆粒提取工藝［J］.中成藥，2007，29(2):281－283.

［3］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典 (一部) ［S］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:附錄63.