狐源須毛癬菌對不同動物毛發破壞作用的觀察

史振國,金藝鵬,郭 英,喬志軍,林德貴

(中國農業大學動物醫學院,北京海淀 100193)

須毛癬菌可以引起多種動物的皮膚真菌病,主要表現為瘙癢、脫毛或者斷毛,患部出現大量皮屑,部分出現紅腫或者繼發感染,在皮毛動物的規模化養殖中,已經漸漸引起人們的重視,須毛癬菌病在導致皮毛動物產品淘汰、降級的同時,還引起其他動物,包括人的皮膚病,研究須毛癬菌對不同動物毛發的破壞作用,具有重要的公共衛生意義。

1 試驗材料

受試菌株來自山東濰坊一養殖小區的臨床分離株。毛發采用兒童和幼齡動物的毛發,3 d之內未使用過洗發劑,高壓滅菌備用。

礦物質培養基:每1 000m L蒸餾水中含0.5 g MgSO4;0.1 g KH2PO4;0.01 g FeSO4×H2O;0.005 g ZnSO4×7H 2O,高壓滅菌,分裝 50 m L每份,備用[1]。

2 試驗方法

2.1 須毛癬菌的活化 取臨床分離菌株,置沙氏培養基中,27℃培養活化7 d,備用。

2.2 須毛癬菌菌懸液的制備 取活化好的須毛癬菌,挑取菌落置于生理鹽水中,震蕩制成菌懸液,用血細胞計數板調節濃度,使小分生孢子濃度為105CFU/m L。

2.3 接種與觀察 將已經高壓好的毛發剪成1 cm左右,取100m g,置于50m L礦物質培養基中,然后接種5m L已配制好的菌懸液。27℃培養4周,每天觀察須毛癬菌在培養基中的生長速度,每周取1次毛發,用光學顯微鏡和掃描電鏡觀察毛發被破壞的程度。

3 試驗結果

3.1 菌落生長速度的觀察 第6天在含有狐貍毛發的礦物質培養基中出現了可見的菌落,可見少量的菌絲緊緊圍繞毛發生長,第8天在含有貓的毛發的礦物質培養基中出現了可見的菌落,第11天時含有犬毛發的礦物質培養基中出現了可見菌落,一直到第28天,含有人的毛發的礦物質培養基中一直未見明顯菌落,菌落的特點眼觀未見明顯差異,但是含有狐貍毛發的礦物質培養基中須毛癬菌的生長明顯占優勢,其次是貓和犬,而含有人的毛發的礦物質培養基中須毛癬菌的生長最差。

3.2 掃描電鏡和光學顯微鏡對毛發破環程度的觀察 光學顯微鏡觀察結果顯示,從第1周開始,4種不同來源的動物毛發周圍,均可見到須毛癬菌沿毛發生長(圖1),但是菌絲密度不一,狐貍毛發周圍菌絲密度最大,其次是貓和犬,人的毛發周圍菌絲的密度最小,提示狐貍毛發最適合須毛癬菌的生長,與肉眼觀察菌落生長的結果相符。嚴重時可以見到毛發周圍呈毛刷狀(圖2),但是對不同來源的動物毛發破壞的嚴重程度,在光學顯微鏡下無明顯差異。

4次掃描電鏡觀察結果顯示,須毛癬菌對4種不同來源的毛發破壞有明顯差異,其中人的毛發對須毛癬菌的抵抗力最強,第4周末只有輕微的破壞,可見毛小皮輕微翹起(圖3);而狐貍毛發對須毛癬菌的抵抗力最弱,第四周末時觀察發現,毛發已經嚴重侵蝕,出現凹陷性缺損和穿孔(圖4);而犬和貓的毛發的抵抗力則介于兩者之間,第4周末可見須毛癬菌的菌絲侵入其毛發,毛小皮脫落嚴重,排列疏松,但尚未破環毛發髓質,未造成毛發的穿孔(圖5)。電鏡觀察須毛癬菌對4種不同來源的毛發的破壞程度的比較見表1。

4 討論

在目前皮毛動物的規模化養殖中,由須毛癬菌引起的皮毛動物的皮膚病已經越來越受到人們的重視,須毛癬菌不僅可以造成皮毛動物產品的淘汰和降級,而且可以引起人的皮膚癬病[6-10]。多數學者認為,須毛癬菌在體外可以破壞動物的毛發,但是國內尚未見有用掃描電鏡觀察須毛癬菌對不同動物的毛發的破壞作用。本試驗選用不含任何碳源和氮源的礦物質培養基,加入不同動物的毛發培養須毛癬菌,用光學顯微鏡和掃描電鏡觀察不同須毛癬菌的生長和對毛發的破壞作用,從而推斷不同動物對須毛癬菌的易感性的差異。

表1 須毛癬菌對4種不同來源的毛發的破壞程度

須毛癬菌是一種嗜角質真菌,通過機械的破壞作用和分泌角蛋白酶(包括絲氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶[2])將動物的角蛋白分解為短的多肽和氨基酸,來獲取碳源和氮源,從而滿足自身生長繁殖的需要[3]。動物體的毛發、指甲、表皮都是由角蛋白組成,而角蛋白的一個重要的特性是含有較大量的含硫氨基酸,從而形成較多的二硫鍵,使角蛋白的可以抵抗一些機械的破壞和一些酶的分解[4]。有報道稱二硫鍵可以在須毛癬菌合成花生四烯酸類物質時分解,二硫鍵含量的多少決定了角蛋白對須毛癬菌的抵抗力[5]。由本試驗的觀察結果得知,人的毛發對須毛癬菌的抵抗力最強,提示組成人的毛發的角蛋白二硫鍵含量最高,而且在相同條件下,在含有人的毛發的礦物質培養基中,須毛癬菌的長勢最差,提示須毛癬菌很難分解人的毛發作為碳源和氮源來滿足自身的生長,所以在此推測,人對須毛癬菌的易感性最差,而狐貍最易感,犬和貓的易感性介于兩者之間。

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