黃利權(quán),李 慧,何士根,毛紅瑞
(1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疫病病原與免疫控制重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,浙江杭州 310029;2.杭州韻來動(dòng)物醫(yī)院,浙江杭州 310015;3.寧波愛使寵物醫(yī)院,浙江寧波 315041;4.義烏鴻瑞寵物醫(yī)院,浙江義烏 322000)
弓形蟲病是一種人獸共患疾病,其病原是龔地弓形蟲,簡(jiǎn)稱弓形蟲。人的感染率很高,特別是對(duì)于免疫系統(tǒng)抑制或者免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟的人群。弓形蟲作為一種機(jī)會(huì)感染因子,可導(dǎo)致艾滋病患者、器官移植及惡性腫瘤患者等免疫功能損傷或抑制者死亡。懷孕動(dòng)物可出現(xiàn)流產(chǎn),豬感染弓形蟲會(huì)引起大批死亡,給養(yǎng)殖業(yè)帶來直接經(jīng)濟(jì)損失。
貓是弓形蟲的終宿主,在貓小腸上皮細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行類似于球蟲發(fā)育的裂殖體增殖和配子生殖,最后形成卵囊,隨貓糞排出體外,卵囊在外界環(huán)境中,經(jīng)過孢子增殖發(fā)育為含有兩個(gè)孢子囊的感染性卵囊。貓也可以作為弓形蟲的中間宿主。在中間宿主體內(nèi),弓形蟲可在全身各組織臟器的有核細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無性繁殖。而犬和豬是目前弓形蟲病危害最為嚴(yán)重的動(dòng)物,不但感染率高,且發(fā)病率和死亡率均較過去有明顯的增加。
為了了解弓形蟲病在浙江地區(qū)動(dòng)物中的感染情況,我們對(duì)動(dòng)物醫(yī)院門診的犬、貓和豬進(jìn)行了診斷調(diào)查,為防控弓形蟲病提供數(shù)據(jù)資料。
1.1 被檢犬、貓 分別來自杭州福來達(dá)動(dòng)物醫(yī)院、杭州韻來動(dòng)物醫(yī)院、寧波愛使寵物醫(yī)院、義烏鴻瑞寵物醫(yī)院等9家寵物醫(yī)院的門診犬貓。根據(jù)犬、貓的臨床狀況分為三類。
1.1.1 健康檢查 動(dòng)物主人從自身的健康考慮,主動(dòng)要求進(jìn)行弓形蟲檢測(cè),但無任何臨床異常變化。
1.1.2 隨機(jī)檢查 因其他疾病來動(dòng)物醫(yī)院就診,在征得主人同意的情況下進(jìn)行的隨機(jī)檢查。
1.1.3 發(fā)熱動(dòng)物檢查 臨床上表現(xiàn)體溫升高,并伴有呼吸道癥狀,懷疑有弓形蟲病感染所進(jìn)行的檢查。
1.2 被檢豬均來自于杭州福來達(dá)動(dòng)物醫(yī)院門診豬。均有“豬高熱病”,臨床表現(xiàn):體溫升高至40.5℃以上,皮膚有不同程度紅色出血斑或塊,呼吸道癥狀明顯,并有臨床死亡現(xiàn)象。
1.3 弓形蟲抗原、抗體檢測(cè)試劑 上海快靈生物科技有限公司生產(chǎn)的膠體金檢測(cè)試紙卡。
1.4 弓形蟲抗原、抗體檢測(cè) 分別采集犬、貓和豬的血液,經(jīng)離心分離血清,待檢。
2.1 臨床發(fā)熱病犬、貓和豬的弓形蟲檢出率 臨床上出現(xiàn)體溫升高,并伴有呼吸道癥狀的“病”犬、貓和豬,分別進(jìn)行血清弓形蟲抗原、抗體檢測(cè),以確診弓形蟲病,結(jié)果見表1。

表1 臨床發(fā)“病”犬、貓、豬弓形蟲檢出率
臨床體溫升高的發(fā)熱犬、貓和豬的弓形蟲抗原陽性率分別為41.40%、34.92%和38.10%;抗體陽性率為36.72%、14.29%和25.85%。抗原陽性率均高于抗體陽性率,可見部分發(fā)病動(dòng)物屬于初次感染,在感染發(fā)病時(shí),體內(nèi)抗體水平還未達(dá)到檢出水平或未達(dá)到保護(hù)。
2.2 臨床健康或無發(fā)熱癥狀犬、貓弓形蟲感染率對(duì)健康檢查和隨機(jī)抽血檢查的犬、貓,進(jìn)行血清弓形蟲抗原、抗體檢測(cè),結(jié)果見表2。
由表2可見,臨床健康犬貓的弓形蟲感染率明顯低于發(fā)熱犬貓,犬抗體陽性率高于抗原陽性率,說明部分被檢犬曾經(jīng)感染過弓形蟲,由于自身抵抗力好,臨床上未見發(fā)病,經(jīng)過一定時(shí)期已出現(xiàn)抗體反應(yīng)。
2.3 不同生活環(huán)境犬、貓弓形蟲的感染率和發(fā)病率
通過對(duì)室內(nèi)關(guān)養(yǎng)、城郊結(jié)合部放養(yǎng)為主和流浪3種不同生活環(huán)境條件,總數(shù)為557只犬,341只貓歸類分析,弓形蟲的陽性率和發(fā)病率見表3、表4。

表2 臨床健康犬、貓弓形蟲檢出率

表3 不同生活環(huán)境犬弓形蟲的感染率和發(fā)病率

表4 不同生活環(huán)境貓弓形蟲的感染率和發(fā)病率
從表3、表4可見,無論是抗原、抗體陽性率,還是臨床發(fā)病率,其生活環(huán)境條件是弓形蟲病感染和發(fā)病的主要影響因素。室內(nèi)關(guān)養(yǎng)犬貓的檢出率明顯低于放養(yǎng)犬貓和流浪犬貓,以流浪犬貓的情況最為復(fù)雜。
2.4 年齡與弓形蟲病感染率的關(guān)系 429只臨床健康犬和278只臨床健康貓分別按不同年齡段進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,其抗原和抗體檢測(cè)陽性率見表5。

表5 不同年齡段犬貓抗原、抗體陽性率
從表5可知,無論是犬還是貓,抗原、抗體陽性率均6~12月齡段最高;此外犬無年齡規(guī)律,但貓隨年齡的增大,陽性率增加。總體而言,貓的陽性率高于犬,說明貓隱性感染的概率高于犬。
2.5 年齡與弓形蟲發(fā)病率的關(guān)系 對(duì)表1中臨床發(fā)熱的犬貓,按不同年齡段進(jìn)行分析,結(jié)果見表6。

表6 不同年齡段犬貓弓形蟲病臨床發(fā)病率
犬以青年犬發(fā)病率最高,貓以幼貓發(fā)病率最高。以后隨年齡的增長(zhǎng),發(fā)病率下降,老齡貓幾乎不發(fā)病。
3.1 關(guān)于弓形蟲的感染率 弓形蟲呈世界性分布,特別集中于溫暖、潮濕和低海拔區(qū)域,估計(jì)全世界有1/3的人感染此病原體[1]。通過本次對(duì)寵物醫(yī)院門診的犬、貓和豬的感染調(diào)查,浙江地區(qū)同樣存在較為嚴(yán)重的弓形蟲流行情況。犬貓健康帶蟲率分別為5.13%和24.82%,在臨床發(fā)熱動(dòng)物中臨床檢出率更高,分別犬 41.40%、貓 34.92%、豬38.10%。這與文獻(xiàn)報(bào)道浙江地區(qū)氣候溫暖、潮濕和低海拔區(qū)域有很大關(guān)系。
3.2 關(guān)于不同生活環(huán)境犬、貓弓形蟲的感染率和發(fā)病率 犬貓弓形蟲的感染率和發(fā)病率與生活環(huán)境有極大關(guān)系。室內(nèi)關(guān)養(yǎng)犬貓由于很難接觸到弓形蟲卵囊,因此感染的可能性最小。放養(yǎng)犬貓或流浪犬貓,經(jīng)常在外玩耍,容易接觸到感染貓糞便中的卵囊,故感染率高、發(fā)病率高。同時(shí)有主犬貓,由于主人的關(guān)注,經(jīng)常會(huì)給予一定量的藥物(磺胺類藥物)防治其他疾病,這對(duì)降低弓形蟲的感染和發(fā)病有一定的作用。表3和表4比較發(fā)現(xiàn),貓的臨床發(fā)病率明顯低于犬,可能由于貓作為完全宿主,對(duì)弓形蟲臨床發(fā)病有一定的抵抗力有關(guān)。
3.3 關(guān)于不同年齡段的弓形蟲感染率 本次檢測(cè)中一歲以內(nèi)的犬貓其抗原、抗體陽性和發(fā)病率均高于成年犬貓,通過比較發(fā)現(xiàn)主要以流浪犬貓為主。因?yàn)榱骼巳埖哪挲g,特別是犬主要為一歲左右,一歲以上的犬在農(nóng)村較少存在。排除流浪犬貓,其抗體陽性率基本隨著年齡的增長(zhǎng)而增加。而臨床發(fā)病率相反,以幼齡或青年犬貓為主要發(fā)病對(duì)象。此外,在臨床發(fā)熱動(dòng)物中存在抗原水平高于抗體水平的現(xiàn)象,作者認(rèn)為主要由于初次感染發(fā)病(如表5多見于1歲齡以內(nèi)的幼犬貓)其抗體水平尚未達(dá)到檢出或保護(hù)水平所致。龔國(guó)華等報(bào)道弓形蟲感染后IgG抗體在血液中出現(xiàn)的時(shí)間較晚,一般在一周之后,并持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),健康帶蟲者可長(zhǎng)時(shí)期存在IgG抗體[2]。這充分說明了幼齡犬為什么抗體陽性率低于抗原,而隨年齡增長(zhǎng),抗體陽性率增加的原因。
3.4 關(guān)于豬弓形蟲病 近幾年豬高熱病在全國(guó)各地廣泛流行,弓形蟲作為豬高熱病病原之一,常見有報(bào)道。臨床上常見體溫升高、呼吸困難、皮膚局部出血點(diǎn)或出血斑。本次檢測(cè)的樣本均為臨床上有"高熱病"癥狀的病豬或病死豬,因此弓形蟲抗原、抗體陽性率分別高達(dá)38.10%、25.85%,其中抗原陽性率高于抗體陽性率,說明在豬場(chǎng)弓形蟲感染的嚴(yán)重性,許多豬還未產(chǎn)生抗體,就開始發(fā)病,甚至死亡。但低于黃兵等人關(guān)于家畜家禽普遍感染弓形蟲,豬的陽性率可高達(dá)66.39%的報(bào)道[3]。通過調(diào)查還發(fā)現(xiàn),弓形蟲流行豬場(chǎng)多與流浪貓的出入(有的場(chǎng)本身養(yǎng)貓)有關(guān)。另外,據(jù)報(bào)道還與母豬隱性感染有關(guān),如老母豬呈隱性感染,雖本身不顯癥狀,但可通過胎盤傳給胎兒引起流產(chǎn)、死胎或產(chǎn)下弱仔;若未發(fā)生胎盤感染,產(chǎn)下的健康仔豬吃母乳后,亦會(huì)感染發(fā)病。5日齡乳豬即可發(fā)病。育肥豬及后備種公、母豬多在3~6月齡感染發(fā)病,其中以3月齡多發(fā)。
3.5 關(guān)于臨床健康犬、貓與臨床發(fā)熱犬、貓陽性率差異 本次調(diào)查通過隨機(jī)方法,對(duì)臨床健康動(dòng)物和發(fā)病動(dòng)物進(jìn)行了抗體、抗原檢測(cè),結(jié)果發(fā)病動(dòng)物的陽性率高于臨床健康動(dòng)物的陽性率,說明許多臨床發(fā)熱動(dòng)物中,有相當(dāng)部分的病例是由于弓形蟲引起的臨床發(fā)病,因此陽性率高于臨床健康動(dòng)物。
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