非小細(xì)胞肺癌組織中VEGF、PEDF的表達(dá)變化及意義

鄭 民,梁岳培,王 洋

(桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院,廣西桂林 541001)

近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn),許多人類實(shí)體瘤細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)呈高表達(dá)、色素上皮衍生因子(PEDF)呈低表達(dá),提示二者在調(diào)節(jié)腫瘤血管生成過(guò)程中可能起到拮抗作用[1]。我們選取 2007年 1月 ～2008年 10月首次接受治療的 50例原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌患者的癌組織,采用免疫組化法檢測(cè)其中的VEGF、PEDF以及微血管密度(MVD)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 首次治療的非小細(xì)胞肺癌患者50例,男27例,女 23例;平均年齡60歲。其中腺癌29例,鱗癌21例。術(shù)后病理分期(2004年WHO肺癌分期標(biāo)準(zhǔn))：Ⅰ期 13例,Ⅱ期 14例,Ⅲ期 23例。術(shù)中留取肺癌組織備檢。

1.2 VEGF、PEDF、MVD檢測(cè)方法 肺癌組織石蠟切片脫蠟、水化后,根據(jù)每一種抗體的要求,對(duì)組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)。采用免疫組化法檢測(cè)PEDF、VEGF,采用CD31標(biāo)記免疫組化法檢測(cè)MVD;每批染色均設(shè)陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明操作。PEDF以胞質(zhì)和(或)胞膜呈棕黃色染色為陽(yáng)性, VEGF以胞質(zhì)呈棕黃色染色為陽(yáng)性。每張切片在陽(yáng)性染色較高區(qū)隨機(jī)選定10個(gè)視野(×400),計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比。按著色強(qiáng)度計(jì)分：無(wú)著色為 0分,淺黃色為 1分,棕黃色為 2分。按著色細(xì)胞百分比計(jì)分：著色細(xì)胞 ＜10%為 0分、10%～40%為 1分、40%～70%為 2分、＞70%為 3分。將著色強(qiáng)度計(jì)分與著色細(xì)胞百分比計(jì)分相乘,0為陰性(-)、1～3為弱陽(yáng)性(+)、≥4為強(qiáng)陽(yáng)性(++);+、++均判為陽(yáng)性。采用CD31標(biāo)記免疫組化法檢測(cè)MVD,取4個(gè)視野計(jì)數(shù)后的平均值作為此病例腫瘤組織中的MVD值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。VEGF與 EGFR的陽(yáng)性率比較用 χ2檢驗(yàn),用Spearman等級(jí)相關(guān)分析法分析VEGF與PEDF的相關(guān)性。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在非小細(xì)胞肺癌組織中VEGF和PEDF的陽(yáng)性表達(dá)率率分別為64%、44%。PEDF陰性組的MVD值為21.38±11.06,與PEDF陽(yáng)性組的8.98±3.78相比,P＜0.05;VEGF陽(yáng)性組的MVD值為20.95± 10.74,與VEGF陰性組的 8.50±3.51性比,P＜0.05。PEDF、VEGF表達(dá)與肺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系見(jiàn)表1。表1顯示,VEGF和PEDF的表達(dá)與肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分化程度、臨床分期有關(guān)(P均＜0.05)。肺癌組織中VEGF和PEDF的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),r= -0.599,P＜0.01。

表1 PEDF、VEGF表達(dá)情況與肺癌組織的臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

腫瘤血管的形成是實(shí)體瘤生長(zhǎng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),也是惡性腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。血管形成是血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)刺激因子和抑制因子之間相互平衡的結(jié)果。腫瘤在其生長(zhǎng)、演進(jìn)過(guò)程中分泌促血管生成的相關(guān)因子,將平衡打破,誘導(dǎo)血管新生[2]。

VEGF是一種糖基化的多種功能細(xì)胞因子,選擇性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上的兩種Ⅲ型酪氨酸激酶受體(VEGFR-1和VEGFR-2)。VEGF及其受體通過(guò)旁分泌途徑聯(lián)合調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞分化、血管形成。有研究[3]在分析雙向分化腫瘤的VEGF表達(dá)與血管生成擬態(tài)(VM)的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn),VEGF可使腫瘤血管通透性升高,造成大量血漿蛋白外滲,提供了促進(jìn)血管生成擬態(tài)形成和新生血管的暫時(shí)性基質(zhì)。此外, VEGF能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞中具有抗凋亡作用的Bcl-2的表達(dá),從而抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡[4]。本研究結(jié)果顯示,在非小細(xì)胞肺癌組織中VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率為64%,其陽(yáng)性表達(dá)率與與肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、臨床分期、分化程度有關(guān)。

PEDF是近年來(lái)研究較多的與腫瘤相關(guān)的內(nèi)源性血管抑制因子,可抑制腫瘤新生血管生成。有資料[5]顯示,腫瘤分化程度越高,PEDF表達(dá)越強(qiáng)。研究[6]表明,PEDF通過(guò)作用于Fas/FasL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑抑制血管新生。此外,血管緊張素Ⅱ能夠提高VEGF的表達(dá),而這一過(guò)程能被PEDF阻止。VEGF與PEDF在腫瘤的增殖轉(zhuǎn)移過(guò)程中互相調(diào)控,共同調(diào)節(jié)著腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移。

本研究表明,VEGF、PEDF在肺癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),MVD值PEDF陰性組高于陽(yáng)性組、VEGF陽(yáng)性組則高于陰性組,說(shuō)明在細(xì)胞分化、腫瘤分期及轉(zhuǎn)移中,PEDF可能通過(guò)抑制MVD起到抑癌作用,二者在調(diào)節(jié)腫瘤血管生成過(guò)程中可能起到拮抗作用。因此,對(duì)VEGF的靶向治療和加入外源性PEDF有可能對(duì)抑制腫瘤血管生成和延長(zhǎng)患者生存期發(fā)揮作用。

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