日本七鰓鰻Arg-Gly-Asp毒素蛋白Lj-RGD3野生型與RGD全缺失突變體Lj-112的抗血管新生作用

王繼紅，張亞前，呂莉，劉欣，李慶偉

1 遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，大連 116029

2 遼寧省生物技術(shù)與分子藥物研發(fā)重點實驗室，大連 116029

3 大連醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，大連 116044

七 鰓 鰻 Lampetra japonica 屬 圓 口 綱Cyclostomata、七鰓鰻目、七鰓鰻科、七鰓鰻屬，是迄今發(fā)現(xiàn)的最古老的無頜脊椎動物[1]。其為海洋洄游性魚類，成體在海洋中用吸盤附在其他魚體上吸食血肉而營半寄生生活。由于日本七鰓鰻可使被其所吸附的魚血流不止，所以可以斷定七鰓鰻口腔腺分泌物中具有抗凝血成分，其基因為獨有的特化基因。鑒于此，本課題組從前期研究工作中發(fā)現(xiàn)了一條存在于七鰓鰻口腔腺的含有 3個 RGD (Arg-Gly-Asp)模體的毒素蛋白Lj-RGD3[2]。

RGD毒素蛋白為一類含 RGD (Arg-Gly-Asp)模體的來源于吸血或有毒生物唾液腺的分泌蛋白，其可憑借蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)上特有的RGD分子序列而成為細(xì)胞外基質(zhì)與細(xì)胞整合素間結(jié)合的強效競爭性拮抗劑，進而通過封閉整合素細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而起到抑制血小板聚集、抑制血管新生和抗腫瘤細(xì)胞增殖等作用。迄今為止已發(fā)現(xiàn)有4個不同物種來源的RGD毒素蛋白家族，這4大家族分別來源于蛇毒、吸血動物水蛭、蜱類及七鰓鰻唾液腺分泌物[2-9]。來源于七鰓鰻口腔腺的 Lj-RGD3蛋白是本課題組發(fā)現(xiàn)的世界上第 4大類 RGD毒素蛋白(GenBank Accession No. ACS71748.1)。前期實驗證明，rLj-RGD3具有抗血管新生、抗腫瘤增殖及抗血小板聚集的功能，且這些功能皆以細(xì)胞表面表達(dá)的整合素為靶點，這說明Lj-RGD3是一種典型的RGD毒素蛋白[2,10]。

一級結(jié)構(gòu)的分析與比對結(jié)果表明，Lj-RGD3除具有RGD毒素蛋白的RGD模體特征外，其在一級結(jié)構(gòu)上與富含組氨酸糖蛋白 (Histidine-rich glycoprotein，HRG) 有同源性。……