淺談新鮮冰凍血漿融化后不同放置時(shí)間的臨床應(yīng)用意義

桂峰

淺談新鮮冰凍血漿融化后不同放置時(shí)間的臨床應(yīng)用意義

桂峰

目的探討新鮮冰凍血漿融化后24 h內(nèi)凝血因子的變化，為指導(dǎo)臨床治療提供理論依據(jù)。方法 采用SYSMEX CA-1500型自動(dòng)血凝分析儀，對(duì)20份血漿樣品分別于融化后0、6、12、24 h測(cè)定凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、纖維蛋白(FIB)、凝血酶時(shí)間(TT)、凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ(FⅦ、FⅧ、FⅨ)活性水平。結(jié)果新鮮血漿融化后24 h之內(nèi)無(wú)明顯改變的有PT、FIB、TT(P＞0.5);其他指標(biāo)在不同時(shí)間段各有明顯的改變，同時(shí)顯示FⅧ半衰期為12～24 h。結(jié)論新鮮冰凍血漿融化后放置會(huì)有凝血因子活性衰減，為保證輸血質(zhì)量，應(yīng)盡可能融化后立即輸注。

新鮮冰凍血漿;凝血因子

新鮮冰凍血漿(Fresh frozen plasma，F(xiàn)FP)是自血液采集后6～8 h之內(nèi)經(jīng)分離置-50℃中速凍成塊，然后在-30℃中保存1年，其幾乎含有全部凝血因子，包括不穩(wěn)定因子FⅤ和FⅧ.FFP是目前臨床常用的一種血液成分，在治療和預(yù)防出凝血疾病及大劑量輸血所致的凝血功能障礙方面起非常重要的作用。然而，凝血因子的不穩(wěn)定性及臨床時(shí)常出現(xiàn)FFP融化后不能及時(shí)應(yīng)用而影響治療的效果。為了準(zhǔn)確了解冰凍血漿的治療時(shí)效性，筆者對(duì)新鮮冰凍血漿融化后放置不同時(shí)間血漿凝血因子的活性水平進(jìn)行了測(cè)定，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 20份新鮮冰凍血漿來(lái)自信陽(yáng)市中心血站，經(jīng)ACD-B抗凝全血分離制備而成，操作嚴(yán)格按照《中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程》進(jìn)行制備。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑 采用SYSMEX CA-1500型全自動(dòng)血凝分析儀。試劑均為DADE BEHRING公司生產(chǎn)，有標(biāo)準(zhǔn)血漿(Lot.No 502578)，凝血酶原時(shí)間(PT)試劑(Lot.No 505627B)，活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)試劑(Lot.No 527158)，F(xiàn)IB 試劑(Lot.No 537511)，凝血酶時(shí)間(TT)試劑(Lot.No 515465)，Coagulation Factors Ⅶ(Lot.No 500780)，F(xiàn)Ⅷ(Lot.No 503872B)，F(xiàn)Ⅸ(Lot.No 500881B)，Dade Thrombin Reageednt試劑(Lot.No 500560B)。

1.3 取樣方法 隨機(jī)分批抽取新鮮冰凍血漿(FFP)20例份，37℃水浴融化。融化后立即在超凈工作室內(nèi)嚴(yán)格按無(wú)菌技術(shù)要求抽取血漿2 ml于試管內(nèi)，隨即進(jìn)行凝血因子測(cè)定為0時(shí)值，然后把血漿放入4℃冰箱，在6、12、24 h分別進(jìn)行測(cè)定。

1.4 凝血因子測(cè)定方法 嚴(yán)格按照SYSMEX CA-1500型全自動(dòng)血凝分析儀操作說(shuō)明和試劑要求，采用凝結(jié)光學(xué)檢測(cè)法原理，對(duì)不同的檢測(cè)項(xiàng)目利用不同稀釋度標(biāo)準(zhǔn)血漿原理，對(duì)不同的檢測(cè)項(xiàng)目利用不同稀釋度標(biāo)準(zhǔn)血漿凝結(jié)時(shí)間與相應(yīng)的凝血因子活性率取對(duì)數(shù)后標(biāo)繪于對(duì)數(shù)圖上，繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后測(cè)定受檢者血漿凝結(jié)時(shí)間與相應(yīng)因子活性率，所獲數(shù)據(jù)按內(nèi)插法帶入回歸方程，計(jì)算受檢者血漿中凝血因子活性Ⅷ(FⅧ)、FⅨ等的活性。

2 結(jié)果

新鮮冰凍血漿融化后24 h內(nèi)凝血因子變化見(jiàn)。

表1 新鮮冰凍血漿融化后24 h內(nèi)凝血因子的變化(±s)

表1 新鮮冰凍血漿融化后24 h內(nèi)凝血因子的變化(±s)

注：*與6 h比較P＜0.05，#與12 h比較P＜0.05，△與24 h比較P＜0.05;INR：PT換算為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)比率

時(shí)間 PT/s INR APTT/s TT/s FIB/(g/L) FⅦ/% FⅧ/% FⅨ/%0 h 12.11±0.51 1.017±0.08△ 31.26±2.53#△ 18.63±1.34△ 1.945±0.489 97.10±32.88*#△148.32±47.44*#△103.30±13.85#6 h 12.36±0.64 1.059±0.11 32.10±2.92 18.21±0.94 2.005±0.309 81.28±28.37 115.87±33.23 103.44±16.08 12 h 12.71±0.51 1.079±0.74 33.13±3.26 15.89±0.94 1.958±0.329 79.62±26.49 87.26±30.15 87.96±13.63 24 h 12.72±0.62 1.116±0.10 34.42±3.48 17.53±0.93 2.110±2.445 61.45±20.37 84.80±22.67 108.44±15.52

表2 部分凝血因子24 h衰減率情況(%)

3 討論

本資料凝血因子檢測(cè)指標(biāo)有PT試驗(yàn)，是用于快速、敏感檢測(cè)外源性凝血途徑(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅰ)凝血功能紊亂的篩選，INR是PT用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值來(lái)表示;APTT試驗(yàn)，是用于內(nèi)源性凝血因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)活性異常的篩選;TT試驗(yàn)，是用于快速評(píng)定止血和血栓形成的有效方法，可以定量監(jiān)測(cè)功能性纖維蛋白原水平。

本資料顯示：新鮮冰凍血漿中不穩(wěn)定的凝血因子(如FⅧ)因其在體外半衰期較短，多為8～12 h，而易使其活性喪失，加之血液離體后血漿凝血因子接觸異物表面不同程度被激活，凝血酶和FⅩa也能在此繼續(xù)裂解FⅧa，使之失活［1］。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：新鮮凍凍血漿融化后，F(xiàn)Ⅷ：C隨時(shí)間的改變而有明顯的降低，由即時(shí)的(148.32±47.44)%下降到24 h測(cè)定值(84.8±22.67)%;在12 h時(shí)，其活性為(87.26±30.15)%，衰減了41.17%，與24 h衰減42.82%基本保持恒定，這與文獻(xiàn)［2］報(bào)道的FⅧ：C在4℃保持12 h、24 h的FⅧ：C水平，與抽血即刻比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)的結(jié)論不同，而與文獻(xiàn)［3］測(cè)定的新鮮冰凍血漿4℃保存12 h FⅧ：C衰減48.78%和24 h衰減66.77%的趨勢(shì)基本一致，從而證明FⅧ的半衰期為12～24 h。

本資料同時(shí)顯示：觀察的凝血指標(biāo)中，F(xiàn)FP在融化后，6 h有明顯改變的有FⅦ、FⅧ(P＜0.05)，12 h有明顯變化的有APTT、TT、FⅦ、FⅧ和 FⅨ(P ＜0.05)，而 24 h有變化的有INT、APTT、FⅦ、FⅧ(P ＜0.05)，6～24 h沒(méi)有顯著變化的有PT、FIB(P＞0.05)。APTT的延長(zhǎng)與內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的改變有關(guān)，其衰減可能與FⅧ降低有關(guān);而PT時(shí)間延長(zhǎng)與外源性凝血系統(tǒng)的改變有關(guān)，6～24 h沒(méi)有明顯改變，證明外源性凝血因子比較穩(wěn)定或改變小而沒(méi)有影響到其改變。纖維蛋白原因其比較穩(wěn)定測(cè)定結(jié)果無(wú)明顯改變。

由表2可知，F(xiàn)FP在融化后，F(xiàn)Ⅶ活性在6 h衰減16.3%，12 h衰減18.0%，24 h衰減36.7%;而FⅨ在12 h有一過(guò)性的降低，24 h又恢復(fù)到原水平，其原因有待進(jìn)一步探討。從結(jié)果可知，F(xiàn)FP融化后，不僅有FⅧ活性的衰減，同時(shí)還有FⅦ活性的衰減。提示我們FFP在融化后要立即輸注，以保證凝血因子的足夠療效。

我院成分輸血率已達(dá)100%，了解和掌握成分血液的制備過(guò)程和血液成分含量，對(duì)指導(dǎo)臨床用血，計(jì)算血漿用量有一定的現(xiàn)實(shí)意義。由于冰凍血漿中幾乎包含了所有的凝血因子，因而是其他血液制品不能代替的。為了保證有效成分的含量，在新鮮冰凍血漿從制備到臨床應(yīng)用整個(gè)環(huán)節(jié)中，都應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)控，盡量縮短在室溫的停留時(shí)間，以減少不穩(wěn)定因子的失活，確保臨床用血的安全有效。

［1］ 李靜旗，張麗，宮本蘭.冷鏈對(duì)新鮮冰凍血漿FⅧ活性的影響.臨床輸血與檢驗(yàn)，2003，5(3)：193.

［2］ 胡麗華，曹奎杰，陳漢華，等.庫(kù)存全血凝血因子Ⅷ改變的研究.臨床血液學(xué)雜志，2000，13(1)：21-22.

［3］ 張遠(yuǎn)鵬，羅紅林，王麗.凝血因子Ⅷ在FFP過(guò)程中受時(shí)間和溫度的影響.鎮(zhèn)江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2001，11(1)：82.

The clinical significance of different place time after fresh frozen plasma warmed

GUI Feng.Department of Blood Transfusion，People's Hospital Gushi County Henan 465200，China

ObjectiveTo explore the changes of coagulation factor of warmed fresh Frozen plasma within 24 h，which provides theory basis for clinical transfusion.MethodsWe warmed 20 samples of FFP and detected PT，APTT，F(xiàn)IB，TT，F(xiàn)Ⅶ，F(xiàn)Ⅷ，F(xiàn)Ⅸ at 0、6、12、24 h respectively by SYSMEX CA-1500.ResultsPT，TT and FIB didn’t change obviously within 24 h after warmed(P ＞0.5)，but other indexes changed obviously at different time.It indicated that the half life of FⅧ was 12 ～ 24 h.ConclusionCoagulation factor activity should decrease after FFP is warmed.It has better be transfused immediately after warmed in order to assure quality of transfusion.

Fresh frozen plasma;Coagulation factors;Significance

465200 河南省固始縣人民醫(yī)院供血庫(kù)