薄層液基細胞學與高危型人乳頭瘤病毒DNA檢測及陰道鏡聯合檢查在宮頸病變中的臨床應用

承莉

薄層液基細胞學與高危型人乳頭瘤病毒DNA檢測及陰道鏡聯合檢查在宮頸病變中的臨床應用

承莉

目的 探討宮頸病變的篩查方法及其臨床價值。方法 對540例TCT異常患者行HC-II（Hybird Capture-II）高危型HPV-DNA檢測，其中120例細胞學結果為ASC的患者因高危型HPV-DNA檢測結果陰性未進行陰道鏡檢查，余均行陰道鏡檢查及多點活檢組織病理學檢查。結果 液基細胞學與HPVDNA檢測結果比較，ASCUS、LSIL、HISL陽性率分別為36%、53.3%、61.3%，P＜0.05；HPV-DNA檢測結果與病理結果比較,炎癥、CINI、CINII-III陽性率分別為67.2%、68.2%、91.9%，P＜0.05，有顯著性差異。結論 TCT是宮頸病變篩查中是首選方法，聯合高危型HPV-DNA檢測及陰道鏡檢查則能提高宮頸病變的檢出率。

薄層液基細胞學；高危型人乳頭瘤病毒；陰道鏡；宮頸上皮內瘤變

目前，宮頸癌在女性中的發病率僅次于乳腺癌，位居第二。統計顯示，我國每年新發病例13.5萬，約占世界的1/4。宮頸癌與人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染有明確關系［1］。宮頸上皮內瘤變是與宮頸浸潤癌密切相關的一組癌前病變，它反映宮頸癌發生發展中的連續過程[2]。因此，早期發現和治療子宮頸的早期病變，是預防子宮頸癌發生的關鍵。本研究采用液基細胞學方法在普通婦科門診進行宮頸癌篩查3679例，對540例細胞學結果異常患者行高危型HPV-DNA檢測，并進行陰道鏡下宮頸多點活檢，通過組織病理學比較，評價液基細胞學檢查聯合高危型HPV-DNA檢測及陰道鏡檢查對宮頸病變的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年12月～2011年2月我院婦科門診就診行宮頸細胞學篩查患者3679例，年齡25～70歲，結果異常者540例，且均行HC-II（Hybird Capture-II）高危型HPV-DNA檢測，其中120例細胞學結果為ASC的患者因高危型HPV-DNA檢測結果陰性未進行陰道鏡檢查,余均行陰道鏡檢查及多點活檢組織病理學檢查。

1.2 方法

1.2.1 標本的采集 采集前輕輕用無菌干棉簽擦除宮頸表面粘液，保持適當壓力將液基細胞刷插入宮頸管內約1cm，使細胞刷呈扇形，順時針或逆時針旋轉3圈，收集宮頸外口及宮頸管的脫落細胞，洗入裝有Autocyte prep保存液小瓶中，保存液中的標本經Thinprep2000系統程序化處理(將標本中的黏液、血液和炎細胞與上皮細胞分離,經高精密度濾器過濾后轉移到靜電處理過的載玻片上),制成直徑為2cm的薄層細胞涂片,95%酒精固定,巴氏染色,根據TBS分級做出描述性診斷報告。

1.2.2 細胞學診斷方法 采用2001年TBS分類法［3］：（1）正常范圍（WNL）。（2）鱗狀上皮細胞異常：①不典型鱗狀細胞（ASC）,分兩類意義未明的不典型鱗狀細胞（ASC-US）和不能排除高度上皮內病變的不典型細胞（ASC-H）;②鱗狀上皮內低度病變（LSIL）;③鱗狀上皮內高度病變（HSIL）;④鱗狀細胞癌（SCC）;⑤不典型腺細胞（AGC）。（3）腺細胞異常：①不典型腺細胞（AGC）；②宮頸管原位癌（AIS）；③腺癌。

1.2.3 宮頸活檢組織病理組織學檢查 對420例患者行陰道鏡指引下多點活檢送病理。按TBS方案統一組織學和細胞學診斷術語，低度上皮內病變（LSIL）宮頸上皮內瘤變I級（CINⅠ）和宮頸人乳頭瘤病毒感染，高度上皮內病變（HSIL）含CINⅡ及其以上病變（CINⅢ）。

1.2.4 陰道鏡檢查 用棉球輕輕擦去宮頸分泌物，調焦距，用3%～5%醋酸棉球浸濕宮頸表面60s后取出，等待1～2min，觀察宮頸的上皮變化：(1)病變的區域性分布；(2)上皮的顏色和渾濁度；(3)表面構型；(4)血管結構。其中醋白上皮、點狀血管和鑲嵌三個特征是CIN最常見的異常陰道鏡所見。然后用3%復方碘溶液涂布宮頸表面，在碘不著色區活檢，如陰道鏡不滿意，加行頸管搔刮。

1.2.5 HPV-DNA檢測取宮頸管分泌物用美國Digene公司生產的第二代基因雜交捕獲信號放檢測系統（Hybird Capture,HC-II）檢測。

1.2.6 統計學處理x2檢驗。

2 結果

2.1 液基細胞學檢查結果 液基細胞學宮頸癌篩查標本例，WNL 3139例（85.32%），ASC 375例（10.19%），LSIL 90例（2.45%），HSIL 75例（1.33%）。

2.2 液基細胞學與病理結果 ASC中CINI6.27%（16/255），CINII-III7.45%（19/255）；LSIL中CINI25.56%（23/90），CINII-III27.78%（25/90）；HSIL中CINI33.33%（25/75），CINII-III 56%（42/75）（見表1）。

2.3 HPV-DNA檢測結果 540例細胞學異常的患者均行HPV-DNA檢測，其中120例細胞學結果為ASC的患者因高危型HPV-DNA檢測結果陰性未進行陰道鏡檢查；余均行陰道鏡下活檢組織病理學檢查，隨病變級別升高HPV陽性率呈遞增趨勢，陽性率有顯著差異性,HSIL、LSIL組與ASC組比較HPV-DNA陽性率差異有顯著性，P＜0.05。HSIL組與LSIL組比較HPVDNA陽性率無差異，(x2:1.068,P＞0.05)（見表2）。如表1所示在ASCUS且HPV陽性中有1例為扁平濕疣，220例為炎癥；75例HSIL中宮頸活檢結果有3例為炎癥伴鱗狀上皮化生見挖空細胞，高危型HPV-DNA均為陽性。在CINII-III中，僅有1例為高危型HPV-DNA陰性，其宮頸細胞學結果為LSIL。SCC組3例，且全部病例HPV陽性，本組陽性率100%，但由于樣本量過少，現不與其他組進行比較。

表1 液基細胞學檢查結果與病理結果比較

表2 液基細胞學與HPV-DNA檢測結果

表3 HPV-DNA檢測結果與病理結果比較

3 討論

CIN約10年發展為原位癌，原位癌發展為浸潤癌約需3～10a，而CIN發展為浸潤癌可能需10～15a，因此早期篩查、早期診斷、早期治療，將其阻斷在癌前病變階段，在宮頸癌的防治工作中占有非常重要的地位[4]。

液基薄層技術采用液體存儲宮頸細胞，自動化制片，制成細胞單層、背景清晰的薄片，避免了常規刮片中因黏液、血液及炎性細胞的遮蓋導致的漏診［5］，提高了細胞學的準確性，1996年美國FDA批準用于臨床。美國癌癥學會(ACS)2004年版宮頸癌普查最新指南指出[6]:建議經陰道性交大約3年后應開始宮頸癌的普查,30歲之前的應每年做1次常規的宮頸細胞學檢查,或者每兩年做1次液基細胞學檢查,對那些連續3次細胞學檢查結果正常或陰性的女性,到30歲以后可每2～3年普查1次,70歲以上的婦女,如果有連續3年以上細胞學檢查結果正常或陰性,同時在70歲以前的10年里沒有異常或陽性細胞學檢查結果,可以選擇停止宮頸癌的普查。ACS強調這些檢查結果必須有高效的技術保障為前提,使檢查結果準確無誤,目前高效的TCT技術在發達國家已經廣泛使用,目前液基細胞學是宮頸病變的主要篩查手段。

陰道鏡檢查是CIN和早期宮頸癌的重要輔助診斷方法之一。能迅速有效的鑒別宮頸有無病變；準確定位，顯著提高了活檢的命中率[6]。對于細胞學異常的，應該進行陰道鏡檢查，特別是對于HSIL和可疑早期浸潤癌應給予優先檢查。我國由于受病理技術力量及采樣等因素影響，故宮頸細胞學有一定的漏診及誤診率。對高危型HPV-DNA陽性者應加強警惕，聯合陰道鏡可提高細胞異常的檢出率，并有助于對疾病的了解及預后。

持續的高危型HPV感染是宮頸癌發生的高危因素。靈敏的HPV核酸檢測對于腫瘤進展的評估是非常有價值的。細胞涂片為ASC-US女性中，如果HPV核酸檢測為陰性，腫瘤進展的危險性則非常低。故本次研究中我院對細胞涂片為ASC-US，HPV核酸檢測為陰性的女性，未行陰道鏡檢查，而是轉為3～6個月復查宮頸細胞學密切隨訪。對于較高年齡的女性，如HPV核酸檢測為陽性，也應轉至陰道鏡檢查。陰道鏡不滿意者，需行活檢及頸管搔刮。據相關文獻報道，在美國，已同時使用液基細胞學和HPV檢測作為宮頸癌的篩查，對于這雙向檢測均為陰性的個體進展為高級別的宮頸癌前病變以及宮頸癌的可能性幾乎為零[7]。因此液基細胞學聯合高危型HPV-DNA檢測及陰道鏡檢查則更能提高宮頸病變的檢出率。

[1] Saranath D,Khan Z,Tandle A,et al.HPV16/18 prevalence incervicallesions/cancersand p53 genotypes in cervical cancer patients from India[J].Gynecol Oncol,2002,86（2）:157-162.

[2] 豐有吉，沈鏗.婦產科學[M].北京：人民衛生出版社，2005：308.

[3] Dine S,Dine D,Robert K,et al.The 2001 bethesda system terminology for reporting results of cervical cytology[J].JAMA,2002,287:2114-2119.

[4] 彭蘭芝.宮頸上皮內瘤變的命名分類病理及轉歸[J].中國實用婦科與產科雜志，2003，19（8）：454-456.

[5] The 1998 Bethesda Systerm for Reporting Cervical/vaginal Cytological Diagnosis.National Cancer Institute Workshop.JA-MA,1989,262（7）:931-935.

[6] 連利娟.林巧稚婦科腫瘤學[M].3版.北京：人民衛生出版社，2001：258.

[7] 廖秦平，劉朝暉，張岱，等.中國宮頸感染性疾病診治策略[M].北京：人民軍醫出版社，2009：27-28.

Objective The clinical value of cytology high-risk human papillomavirus (HR-HPV) testing and colposcope in diagnosis of precancerous diseases. Methods 540 women with abnormal cervical smear were screened by using HPV DNA testing hybrid capture II(HC-II),Among those cases 120 women with high-risk human papillomavirus (HR-HPV) testing negatively cervical smear ASC,were not

Colposcopy.Simultaneously the rest cases were received by colposcopy and colposcope directed biopsy. Results Among 420 cases the positive rates of HR-HPV as ASCUS,LSIL and HSIL were 36%,53.3%,61.3%respectively (P＜0.05). the positive rates of HR-HPV as infl ammation ,CINI and CINII-III were 67.2%,68.2%,91.9% (P＜0.05) ,which have signifi cant deviation.Conclusion Cytology is the preferred method for screening cervical precancerous diseases. Cytology combined with HR-HPV testing and colposcopy can increase the detectable rate of cervical cancer.

Autocyte pap smear fl uid - based system; High-risk human pappilomavirus; Colposcope; Cervical intraepithelial neoplasia

10.3969/j.issn.1009-4393.2011.26.020

213001 蘇州大學附屬常州腫瘤醫院（承莉）