肝達(dá)康顆粒提取工藝的研究

柳成剛，王曉麗

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

肝達(dá)康顆粒由柴胡、白芍、枳實(shí)、黃芪、生牡蠣、雄膽粉、甘草7位中藥組成，具有疏肝益氣，解毒散結(jié)之功效。原方為湯劑，為方便臨床應(yīng)用，保證制劑的質(zhì)量和療效的穩(wěn)定性，擬將其制成顆粒劑。本研究以芍藥苷、浸膏得率為考察指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，對(duì)白芍、黃芪、生牡蠣、甘草四味藥材及柴胡、枳實(shí)提油后殘?jiān)奶崛」に嚄l件進(jìn)行優(yōu)化。

1 儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜儀;十萬(wàn)分之一分析天平;芍藥苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所);甲醇為色譜純，其他試劑為分析純，水為重蒸餾水;所用藥材均購(gòu)于世一堂中藥飲片有限公司(經(jīng)檢驗(yàn)，均符合2010版《中華人民共和國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)［1］)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2．1 芍藥苷含量測(cè)定［2－3］

2．1．1 色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6mm×250mm，5μm);流動(dòng)相:水 －甲醇 －冰醋酸(65∶35∶0.5);流速:1.0 mL/min;柱溫:30℃;檢測(cè)波長(zhǎng):230nm。

在上述色譜條件下，芍藥苷和樣品中其他組分可

基金項(xiàng)目:黑龍江省中醫(yī)藥管理局項(xiàng)目(ZHY10－Z47);黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)科研基金資助(200909)

作者簡(jiǎn)介:柳成剛(1977－)，男，博士，講師，主要研究方向:六經(jīng)辨證在肝膽疾病中的臨床應(yīng)用。

收稿日期:2010－12－08

修回日期:2011－01－20

達(dá)到基線分離，芍藥苷與其相鄰色譜峰的分離度大于1.5，且陰性對(duì)照液無(wú)干擾，按芍藥苷峰計(jì)算，理論塔板數(shù)不少于2 000。

2．1．2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品5.10mg，以甲醇定容至50mL量瓶中，制成0.102mg/mL的溶液作為對(duì)照品溶液，過(guò)0.45um微孔濾膜，取續(xù)濾液，即得。

2．1．3 樣品含量測(cè)定 精密稱取浸膏干粉約1g，精密稱定，置50mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲處理30min，取出，放冷，加甲醇定容至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2．2 浸膏收得率測(cè)定 精密吸取9份樣品的供試液20mL，蒸干至恒重，精密稱重，分別計(jì)算其浸膏收得率。

2．3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用正交試驗(yàn)法，以浸膏得率、芍藥苷含量為評(píng)價(jià)指標(biāo);選擇加水倍量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)為考察因素，采用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行試驗(yàn)。因素水平安排見(jiàn)表1。

表1 正交試驗(yàn)因素水平表

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果表

按肝達(dá)康中各藥材的比例，稱取總量為50g處方共9份，其中柴胡、枳實(shí)先用揮發(fā)油提取器提取4h，得揮發(fā)油，另器保存。殘?jiān)偌尤肫渌?除雄膽粉外)藥材，合并浸泡1h，按正交試驗(yàn)表方案進(jìn)行煎煮，濾過(guò)，再濃縮，減壓干燥，干膏稱重，得干浸膏重量，研細(xì)過(guò)60目篩，得浸膏粉共9份。分別測(cè)定浸膏中的含水量和芍藥苷的含量，并計(jì)算浸膏得率和芍藥苷提取量。權(quán)重系數(shù)分別為0.4、0.6，進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。結(jié)果見(jiàn)表2，方差分析見(jiàn)表3。

表3 提取工藝方差分析表

2．4 工藝條件的確定 從方差分析結(jié)果可知，加水量、提取時(shí)間對(duì)提取效果具有顯著性影響，而提取次數(shù)對(duì)結(jié)果的影響并不顯著。因此，從節(jié)約能源的角度考慮，提取次數(shù)定為2次，則A2B2C1為最佳組合，即10倍量水提取2次，每次1小時(shí)最好。

2．5 驗(yàn)證試驗(yàn)

按最佳工藝A2B2C1進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)3次，驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果表明，RSD小于2%，重復(fù)性好。

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

3．1 根據(jù)上述試驗(yàn)，肝達(dá)康顆粒劑的最佳提取方案可確定為加藥材量的10倍量水，煎煮2次，每次煎煮1h。此外，還考慮了生產(chǎn)條件，盡可能做到省時(shí)節(jié)能，且通過(guò)驗(yàn)證試驗(yàn)證明，文中選定的最佳工藝條件具有較高的提取效率。

3．2 顆粒以其生產(chǎn)自動(dòng)化、生產(chǎn)條件恒定、人為因素影響小等優(yōu)勢(shì)，廣泛應(yīng)用于臨床［4］。肝達(dá)康顆粒是白芍等藥材經(jīng)水提、濃縮、干燥、制粒等工序制成的顆粒。筆者優(yōu)化其提取工藝，并以高效液相色譜(HPLC)法對(duì)配方中芍藥苷的含量進(jìn)行測(cè)定，方法簡(jiǎn)便可行，重現(xiàn)性好，可以作為控制產(chǎn)品質(zhì)量的方法。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì)編．中華人民共和國(guó)藥典［S］．北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:96．

［2］王晟，張麗艷，吳濤．HPLC法測(cè)定胃寶顆粒中芍藥苷的含量［J］．中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2010，38(2):113 －114．

［3］周洪偉，許文博，王玉蓉，等．赤芍總苷提取與大孔樹(shù)脂純化工藝研究［J］．中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2011，39(1):48 －51．

［4］姚煥英，趙寧俠，史恒軍，等．配方顆粒劑臨床利弊點(diǎn)滴談［J］．現(xiàn)代中醫(yī)藥，2006，26(1):61．