中草藥接骨膏促進骨折愈合作用的實驗研究

中圖分類號：R2文獻標識碼：A 文章編號：1008-925X（2010）12-0177-01

摘要：目的探討民族醫藥中草藥接骨膏對家兔脛腓骨骨折愈合的影響。方法選用健康雄性家兔（隨機分為對照組、接骨膏實驗組、骨折挫傷散治療組），均采用無菌手術造成機械性脛腓骨骨折動物模型，通過X線、病理組織學、及血清鈣（Ca）、磷（P）、血清堿性磷酸酶(AKP)檢測，觀察中草藥接骨膏促進骨折愈合的作用。結果接骨膏實驗組及骨折挫傷散治療組與對照組比較：骨痂生長明顯加快、且新生骨出現早、范圍大，AKP活性增強(P<0.05)，且能影響血清Ca，P含量及Ca，P乘積的變化。結論中草藥接骨膏對骨折后骨修復和提高骨折愈合有明顯促進作用。

關鍵詞：中草藥 接骨膏 骨折 愈合 研究

中草藥接骨膏是根據長江三峽地區民間接骨中醫鄭賢群先生驗方篩選整理而成，主治跌打損傷、閉合性骨折、筋骨疼痛。該制劑在我院應用已有十多年，臨床觀察發現具有明顯地活血化淤、消腫止痛、縮短骨折愈合時間的作用，目前已成為我院骨傷科治療骨折的常用藥。本實驗旨在通過觀察中草藥接骨膏對兔骨折模型愈合過程的影響，進一步驗證其促進骨折愈合的效果，并探討其對促進骨折愈合的作用機理。

一、材料與方法

1、藥品試劑及器材

中草藥接骨膏由獨正桿(又名光葡萄、野葡萄、山葡萄，屬葡萄屬科蛇葡萄之變種光葉蛇葡萄)、刺老苞(又名刺苞頭、鳥不踏、紅刺苞頭，屬五甲科植物槐木)、刺五加(又名五加皮、刺加皮)組成。以上3味藥均分別取根皮曬干，搗碎或切成小塊，按獨正桿∶刺五加∶刺老苞=2∶1∶1的比例混合加水煎煮，采用膏滋法置備成煎膏劑（每毫升含生藥1g），成品為棕色稠膏，味甜微苦；骨折挫傷散，中成藥，由中國佳木斯制藥廠生產(批號001206)；生化分析儀OLYMPUSAU400，日本；切片機LeicaJungBiocut2035德國；AXIOSKOP2PLUS光學顯微鏡，德國ZEISS公司。

2、動物及分組大耳白色家兔72只，全部雄性，體重（1.8±0.5）kg，湖北民族學院動物實驗中心提供。對家兔隨機分為3組，即模型對照組（以下簡稱對照組）、接骨膏實驗組（以下簡稱實驗組）、骨折挫傷散治療組（以下簡稱治療組），每組24只。

3、動物模型制備及檢測方法3組實驗動物均在戊巴比妥鈉的麻醉下，按無菌操作術切開家兔右后腿，作脛腓骨中段橫形骨折，再用克氏針內固定，縫合傷口。術后進行3?d（給予慶大霉素4萬單位肌肉注射，1次/d）抗感染治療，以防感染。造模成功后次日起灌胃給藥進行實驗研究。實驗組采用接骨膏煎膏劑按3.0g/kg·bw劑量灌胃給藥，1次/d，相當于正常成人劑量5倍；治療組采用骨折挫傷散按3.0g/kg·bw劑量用蒸餾水調成混懸液灌胃治療，1次/d，相當于正常人劑量5倍；對照組采用等容積（5?ml）的生理鹽水灌胃。在實驗研究過程中的第7，15，30天，每組隨機抽取家兔8只，先行X線觀察骨痂陰影的形成和血清學檢測，再用空氣栓塞法處死，作病理組織學檢查觀察骨折處組織愈合程度。X線拍片判斷采用5分制標準：（0分）未發現骨痂陰影；（1分）可見到骨痂陰影，骨折線比較模糊；（2分）有明顯骨痂生長，骨折線顯著模糊；（3分）有豐富骨痂生長，骨折線接近消失；（4分）骨折線消失，完全連接，接近骨化。血清學檢測：抽取各組中家兔空腹血5ml，用生化分析儀直接測定血清堿性磷酸酶(AKP)、血鈣（Ca）、血磷（P）的含量；病理組織學檢查：動物按計劃處死后，切取包括骨質缺損兩端的大體標本，經脫鈣后常規處理標本，行石蠟切片，用HE、Masson、PTAH3種染色，觀察骨缺損處血腫、細胞、膠原和新生骨情況。

4、數據分析

實驗數據采用SPSS FOR WINDOWS?11.5軟件進行t檢驗統計處理。

二、結果

1、X線拍片觀察與對照組比較，實驗組和治療組骨缺損處骨痂陰影均出現早，?骨痂生長速度快，骨痂陰影密度高(P<0.05)。結果見表1。表1接骨膏對家兔骨折愈合的影響(略)

2、對血清堿性磷酸酶(AKP)的影響造模后實驗觀察第7天，實驗組和治療組血AKP活性與對照組比較無明顯差異；造模后第15，30天，實驗組和治療組血AKP活性升高與對照組比較差異顯著(P<0.05或P<0.01)，且實驗組和治療組之間無差異性。結果見表2。表2接骨膏對血清堿性磷酸酶(AKP)的影響(略)。

3、對血鈣(Ca)、磷(P)的影響造模后實驗觀察第7天，實驗組和治療組血Ca含量的降低、血P含量的升高及Ca，P乘積等指標均有明顯變化，但與對照組比較無統計學意義；造模后15，30?d，實驗組和治療組血Ca含量仍處于較低水平，但血P含量明顯的升高和Ca，P乘積值的增大與對照組比較差異顯著(P<0.05)。結果見表3。表3接骨膏對血鈣(Ca)、磷(P)的影響（略）。

4病理組織學檢查

切片檢查發現實驗組和治療組動物兩骨端生長新骨的時間較早，軟骨區范圍大，軟骨內成骨過程較快；對照組兩骨端出現新骨的時間較晚，軟骨區范圍較大，軟骨內成骨過程較長，因而骨痂生長緩慢，直到第30天兩端骨痂均不能連接，中間仍存在著大片纖維組織區。

三、討論

骨折愈合過程是一個復雜的組織學、生物學、神經內分泌學及骨生物力學的動態過程。臨床上，各種原因所致的骨折延遲愈合和骨折不愈合是常見病。中草藥接骨膏主要用于閉合性骨折早中期的治療，方中藥物功用：?獨正桿祛風活絡、止痛止血、散熱解毒、強筋健骨；刺老苞活血止痛、散淤消腫；?刺五加祛風除濕、接骨續筋。此方配伍符合骨折治療淤去、新生、骨合的傳統理論。本實驗我們采用了X線觀察，了解對骨痂形成的影響；病理組織學檢查，了解對骨折周圍血腫、骨痂形成、軟骨生成的影響；血清學檢測了解用藥后血清鈣、磷、AKP酶的變化。

實驗X線檢查結果，實驗組和治療組與對照組比較，骨缺損處骨痂陰影均出現早，?骨痂生長速度快，骨痂陰影密度高，骨折修復明顯增快。病理學組織檢查，用藥組兩骨端生長新骨的時間較早，軟骨區范圍大，?軟骨內成骨過程較快，新生骨出現早、范圍大。血清學檢查顯示，用藥組血清中的堿性磷酸酶含量豐富，血鈣、血磷及鈣磷乘積值的增高等指標均發生明顯變化。現代醫學證實，AKP酶主要由成骨細胞產生，它是成骨細胞分化的早期指標，是骨形成所必需的酶，其活性間接反映骨重建活躍性的改變和成骨細胞活動性的強弱，是一項觀察骨折愈合的重要指標。而血中鈣磷含量的高低又直接影響骨的鈣化與溶解。它們相互影響相互制約并受1，25-(OH)2D3、甲狀旁腺素及降鈣素的調節和控制。血中鈣磷相互作用，其乘積在一個水平，超過一定限度，則沉淀為骨鹽。因此，鈣磷乘積升高有利于鈣鹽的沉積。

本實驗研究進一步表明，中草藥接骨膏能增加AKP活性，促進成骨細胞活動，并且降低血鈣，升高血磷，使鈣磷乘積高峰提前出現，促進鈣鹽沉積，有利于骨折愈合。由此可見，中草藥接骨膏能夠縮短骨愈合過程和提高骨折愈合質量，為臨床應用提供了可靠的理論依據。