廣西地區人群地中海貧血基因分型*

王 梁，左楊瑾，林 麗 ，陳秋莉，陳碧艷，陳發欽 ，何 升△

(1.廣西出生缺陷防治基礎研究重點實驗室/廣西生殖健康與出生缺陷防治重點實驗室，南寧 530000；2.右江民族醫學院，廣西百色 533000)

地中海貧血是一種常染色體隱性遺傳病，是由于珠蛋白合成抑制形成的慢性溶血性貧血[1]，也是全球分布最廣，累計人數最多的一種遺傳病，在中國好發于廣東、廣西、海南等沿海地區[2-5]，其中廣西地區攜帶率高達25%，是最高的一個地區[6]，因此，研究廣西地區地中海貧血基因的構成比及分布情況，對其防控和治療有著重要的意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取廣西壯族自治區婦幼保健院2018年8月至2020年8月26 803例樣本，年齡0～81歲，其中男13 039例，女13 764例，均來自廣西各市縣。

1.2 方法

1.2.1常規篩查

所有樣本采用BC-6900血細胞分析儀和法國SEBIA公司Sebia Capillarys 2Flex Piercing血紅蛋白電泳進行分析，血常規MCV<82 fL或MCH<27 pg，血紅蛋白電泳Hb A2<2.5或Hb A2>3.5或Hb F>4，或者出現異常條帶的患者為疑似地中海貧血患者，共26 803例進一步進行基因檢測。

1.2.2DNA提取

采用廈門至善DNA提取試劑盒，嚴格按照說明書操作。

1.2.3基因檢測

采用深圳亞能生物技術有限公司生產的地中海貧血診斷試劑盒，用Gap-PCR方法檢測α珠蛋白基因常見的4種缺失：--SEA(東南亞缺失型)、-α3.7(右缺失型)、-α4.2(左缺失型)、--THAI(泰國缺失型)。PCR-KDB檢測β珠蛋白基因常見17種突變位點和α珠蛋白基因3種位點突變：-αCS點突變、-αQS點突變和-αWS點突變。

1.3 統計學處理

本研究數據資料采用SPSS22.0統計學軟件包進行統計學處理。對各類地中海貧血基因異常檢出率等計數資料，采用百分比(%)表示。

2 結 果

在 26 803例疑似地中海貧血的樣本中，共檢測出12 682例地中海貧血基因攜帶者12 682例，陽性率為47.32%。其中α地中海貧血基因8 636例，檢出率為32.22%。β地中海貧血基因 3 306例，檢出率為12.33%。αβ復合地中海貧血基因740例，檢出率為2.76%。在檢出的8 636例α地中海貧血基因中，包括24種基因型，其中檢出率最高為--SEA(46.86%)，其次為-α3.7/αα(18.56%)、αCSα/αα(9.25%)和-α4.2/αα(8.28%)，見表1。在檢出的3 306例β地中海貧血基因中，包括28種基因型，檢出率較高的基因型為β41/42/βN(44.92%)、β17/βN(26.32%)和βIVS- Ⅱ-654/βN(7.77%)，見表2。在檢出的740例αβ復合型地中海貧血中，包含81種基因型，其中以--SEA復合β41-42/βN(17.30%)、--SEA復合β17/βN(10.41%)及-α3.7/αα復合β41-42/βN(10.00%)最為常見，見表3。

表1 α地中海貧血基因描述、例數及構成比(n=8 636)

表2 β地中海貧血基因描述、例數及構成比(n=3 306)

續表2 β地中海貧血基因描述、例數及構成比(n=3 306)

表3 α復合β地中海貧血基因描述、例數及構成比(n=740)

續表3 α復合β地中海貧血基因描述、例數及構成比(n=740)

3 討 論

地中海貧血可分為α、β、γ、 δ、β地中海貧血等類型。臨床表現可分為靜止型、輕型、中間型、重型[7]。其中靜止型和輕型為攜帶者，對患者的生活無影響。中間型則需要輸血治療或不需要輸血治療。重型地中海貧血，如α地中海貧血胎兒出生后嚴重缺氧而死亡，甚至胎兒死于腹中，β 地中海貧血出生時無臨床癥狀，通常3～6個月開始發病且需要長期輸血，如不輸血，患兒通常在5歲前死亡[8]，對家庭的精神和經濟產生巨大的負擔。因此降低重型地中海貧血的出生率是防控的重點。本研究通過對廣西壯族自治區婦幼保健院樣本采用血細胞五分類和血紅蛋白電泳分析指標篩查出地中海貧血可疑人群26 803例，然后進一步采用Gap-PCR和 PCR-RDB技術診斷α、β地中海貧血基因，從而了解本地區地中海貧血基因構成比。

據既往研究顯示，廣西α和β地中海貧血基因攜帶率分別為14.95%、6.78%[9]。在本研究的26 803例樣本中，地中海貧血基因攜帶率為47.32%，其中α地中海貧血基因為32.22%，β地中海貧血為12.33%，αβ復合為2.76%。本研究針對已篩查可疑陽性的患者作為研究對象，所以檢出率高于以往報道的廣西地中海貧血的基因攜帶率。在已確診的8 636例α地中海貧血基因攜帶者，按基因構成比排序，--SEA(46.86%)，-α3.7/αα(18.56%),αCSα/αα(9.25%)和-α4.2/αα(8.28%)最為常見，與已報道的廣西其他地區結果一致[10-12]，與湖南、福建、廣東地區報道略有區別[4,13-14]。在已確診的3 306例β地中海貧血基因攜帶者中以β41/42/βN(44.92%)最為常見，其后依次為β17/βN(26.32%)和βIVS-Ⅱ-654/βN(7.77%)。這與桂林和南寧地區[12，15]一致。與湖南、廣東、云南地區略有不同[4，14，16]。此外，本研究還檢出740例α復合β地中海貧血攜帶者，其中以--SEA復合β41-42/βN(17.30%)最為常見，與廣西以往報道相同[12，15]，與湖南、云南不同[13，16]。所以廣西地中海貧血分布與地域有關系。

值得注意的是，本研究依然檢出了386例HbH病及21例β的純合子及雙重雜合子，臨床表現可有輕度到重度的貧血。αβ復合檢出率也處于較高水平，αβ復合地中海貧血不同于單純的α和β地中海貧血，其與正常人婚配有高概率遺傳給下一代。在臨床工作中，由于αβ復合地中海貧血的機制較為復雜，且β地中海貧血的臨床表型會覆蓋α地中海貧血，因此在血液學分析中篩查出β地中海貧血的同時也要考慮是否進行α地中海貧血檢測，這樣可以有效防止復合型的地中海貧血漏診。

目前針對地中海貧血的治療方法非常有限，高風險地區針對育齡夫婦進行地中海貧血知識的宣傳及產前篩查和診斷，或者建立地中海貧血管理平臺對高危人群進行跟蹤隨訪對地中海貧血的防控有著重要的意義。相較于以往廣西地中海貧血的研究，本研究通過大量的數據分析其基因型構成比，更能反映出廣西地區人群地中海貧血的遺傳背景，為本地區的遺傳咨詢、產前診斷及早期的觀察和治療提供有力的科學依據。