白酒中甲醇含量的便攜式儀器快速檢測法

陳 嬋，張建良，陳秋菊

（廣東達元綠洲食品安全科技股份有限公司，廣東廣州 510530）

甲醇又稱工業酒精，是一種劇毒物質，可經呼吸道、胃腸道和皮膚吸收而引起中毒[1]。假酒和劣質酒中含有高濃度的甲醇，飲用這類酒，輕度會導致雙目失明，嚴重可致死，甲醇是白酒的有害成分是重要衛生指標之一[2-3]。由于白酒的原料及釀造過程會引入或產生一定量的甲醇。例如原料中含有果膠、木質素等物質，在水解、發酵等生產過程中會產生甲醇[3]。但是由于甲醇和乙醇的沸點接近很難分離，甲醇還具有無色無味且高度揮發等特點，可與水和乙醇混溶，一般目測無法辨識，需要一定的試驗方法 測定。

目前國家規定的白酒中甲醇測定的標準方法有化學顯色法和氣相色譜法，化學顯色法（包括變色酸法和乙酰丙酮法）具有操作簡單、成本低等優點[4-5]。本文在化學顯色法的基礎上，結合便攜式食品安全綜合分析儀對顯色體系進行上機測試，儀器所測的濃度值就是白酒樣品中甲醇的含量。可在大批量檢測時，快速、簡單、準確地測定白酒中甲醇的含量。

1 材料與方法

1.1 試劑

高錳酸鉀、磷酸、無水草酸（H2C2O4）、乙酰丙酮（C5H8O2）、乙酸銨（C2H7O2N）、冰乙酸（C2H4O2）、50%乙醇（體積分數）、甲醇標準溶液（1 g/L）

1.2 儀器設備

酒精度數計、水浴鍋、移液槍、便攜式食品安全綜合分析儀。

1.3 實驗方法

取2 mL處理后的待測酒樣，加入0.4 mL KMnO4-H3PO4試劑（有效期3個月），混勻后靜置反應10 min；繼續加入0.4 mL草酸試劑，放入沸水浴至褪色后取出；向上述反應管中加入1.5 mL乙酰丙酮試劑（有效期一個月），繼續沸水浴2 min后取出，冷卻，倒入比色皿中，上機。用便攜式食品安全綜合分析儀進行測試，儀器所測的濃度值就是白酒樣品中甲醇的含量（g/100 mL）。

1.4 標準曲線繪制

①準確稱取0.1 g甲醇，加用1%色譜級乙醇溶液稀釋，并定容至100 mL。配制成10 g/100 mL白酒中甲醇的標準儲備溶液，密封后存于冰箱冷藏備用。

②分別吸取標準儲備液0 μL、60 μL、120 μL、200 μL、400 μL、800 μL，用1%色譜級乙醇溶液稀釋并定容至20 mL，現配現用。

③取上述②中系列標準溶液各2 mL，分別加入0.4 mL的KMnO4-H3PO4試劑（有效期3個月），混勻后靜置反應10 min；繼續加入0.4 mL草酸試劑，放入沸水浴至褪色后取出；向上述反應管中加入1.5 mL乙酰丙酮試劑（有效期一個月），繼續沸水浴2 min后取出，冷卻，倒入比色皿中，用便攜式食品安全綜合分析儀進行吸光度的測定。重復3組實驗后，取吸光度的變化平均值為橫坐標，標液濃度為縱坐標，繪制標準工作曲線。

2 結果與分析

2.1 白酒中稀釋倍數的確定

為避免酒精度數對檢測結果的影響，需要對酒樣進行稀釋。經過對比實驗，最終確定稀釋倍數如下表1所示。測試前，先用酒精度數計測試待測液的酒精度數后，取200 μL待測酒樣，按照不同的酒精度數，對照表1中的純水量，加入純水混勻后待測。

表1 不同度數的白酒稀釋倍數比例表

2.2 標準曲線

取2 mL的1%乙醇體系的甲醇標準系列工作溶液，進行顯色反應后，冷卻，倒入比色皿中，用便攜式食品安全綜合分析儀進行吸光度的測定。以吸光度為橫坐標，標液濃度為縱坐標，繪制標準工作曲線，見圖1。在0.03～0.4 g/100 mL的甲醇濃度范圍內，相應濃度與吸光度呈現良好的線性關系。甲醇標準品的線性回歸方程為：y=0.684 5x-0.003 2，線性相關系數為0.999 7。

圖1 白酒中甲醇的標準曲線圖

2.3 方法檢出限

考慮到便攜式食品安全綜合分析儀進行吸光度檢測時，儀器本身存在吸光度最低的檢出限為0.2 g/100 mL，扣除空白對照的影響，計算得出的檢出限為0.03 g/100 mL。

2.4 陰陽性樣品驗證

《食品安全國家標準 蒸餾酒及配制酒》（GB 2757—2012）中規定，以糧谷類為原料的白酒甲醇的含量不能超過0.06 g/100 mL；以薯干等代用品為原料的白酒甲醇的含量不能超過0.2 g/100 mL（均以酒精度數100%）[6]。用4個濃度分別為0.05 g/100 mL、0.07 g/100 mL、0.19 g/100 mL、 0.21 g/100 mL的質控樣驗證限量點的陰陽性檢出情況，每個樣品分別做5次平行實驗，檢測結果如下表2所示。實驗結果顯示，該方法檢測質控樣的陰陽實驗結果與質控樣一致，具有良好的符合率。

表2 實驗結果對比（單位：mg/kg）

表2 陰陽性檢出結果

3 結論

本文對白酒中甲醇含量的檢測方法進行優化，提供一種新的檢測方法。該方法測試過程操作簡單，結合便攜式食品安全綜合分析儀進行檢測，儀器所測的濃度值就是白酒樣品中甲醇的含量。該方法檢測質控樣的陰陽實驗結果與質控樣一致，具有良好的符合率。因此該方法可以滿足大批量檢測白酒中甲醇含量時快速、簡單、準確的需求。