問荊提取物對植物生長發育的影響

摘要：首次嘗試用丙酮、氯仿溶劑對問荊地上部進行提取，以蘿卜、萵苣、馬唐、稗草為試驗材料，測定不同溶劑的問荊提取物對4種供試植物生長發育的影響。結果表明：對供試植物株高抑制作用，丙酮提取物的基本順序是：萵苣＞馬唐＞蘿卜＞稗草，氯仿提取物的基本順序是：萵苣＞馬唐＞稗草＞蘿卜；對供試植物根長的抑制作用，丙酮、氯仿提取物的基本順序都是萵苣＞稗草＞馬唐＞蘿卜。

關鍵詞：問荊；提取物；抑制率

中圖分類號：S482.49 文獻標識號：A 文章編號：1001—4942(2010)12—0036—03

問荊(Equisetum arvense L)為厥類植物門木賊科木賊屬植物，多年生草本，別名節節草、益母草、空心草、筆頭草。問荊廣泛分布在北溫帶及北寒帶，在我國東北、華北、西北、西南各省區均有分布，是個豐富的自然資源。全草入藥，性味苦平，清熱利尿，消腫抗炎，清肝明目，鎮痛止血。我國北方部分麥田、玉米田、大豆田因連年化學除草已選擇出僅有問荊和某種旱田作物的群落形式。問荊的水提取物含黃酮醇類化合物，可顯著降低家兔血壓。問荊乙醚提取物為主要組分的鎮痛靈注射液，具有較強的鎮痛作用。俄羅斯的科學家發現問荊的水提取物可以抑制30多種雜草種子的萌發，可以用來開發既環保，又無污染的植物源除草劑。為了進一步開發利用問荊中的生物活性物質，從中尋找具有防除作用的先導化合物，作者采用了不同有機溶劑對問荊地上部進行了提取，選用蘿卜、萵苣、馬唐、稗草4種植物進行了活性篩選。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 樣品的準備 將問荊地上部通風自然陰干，用粉碎機粉碎成粉末，過40目標準篩，冰箱中低溫保存，備用。

1.1.2 提取溶劑 丙酮、氯仿(國藥集團化學試劑有限公司)。

1.1.3 供試植物 蘿卜(大連青蘿卜)、萵苣(現代舞裙)，購于種子市場；馬唐、稗草種子，采于延邊大學農學院試驗農場。

1.2 方法

1.2.1活性成分提取 備用樣品分2份，每份20g，用濾紙包封，分別放入索氏提取器，分別加入250ml丙酮、氯仿，水浴加熱，在略高于沸點溫度回流4h，回收溶劑，用旋轉蒸發儀濃縮至浸膏，在恒溫水浴鍋中把有機溶劑揮發干凈，再用冷凍干燥機將浸膏干燥成粉狀，4℃冰箱中保存待用。

提取率(％)=提取干物質質量／樣品重量×100

1.2.2 除草劑試驗的測定方法 挑選籽粒飽滿的4種植物種子若干，用紗布包好放在流動水中6h，待種子吸水充足后，放于50℃左右的溫水中進行表面消毒，殺滅種子表面的大部分病菌。取2種有機溶劑和干燥的提取物，把溶液稀釋成3個濃度，即500、259、125mg／L，每個濃度6ml，用移液槍吸取各濃度的藥液4ml，分別置于放有濾紙的培養瓶中，重復3次。將加有藥液的培養瓶置于通風廚中3～4h，讓溶劑充分發揮后，濾紙即為藥膜。用同樣的方法分別取4ml相同有機溶劑處理濾紙作為對照。選取消毒的種子放到藥膜上，每皿50粒，每個處理共150粒；然后每個皿加水6ml，放入27℃光照培養室內培養7天，測定株高、根長，計算抑制率。

抑制率(％)=(對照的株高或根長－處理的株高或根長)／對照的株高或根長×100

2 結果與分析

2.1 不同有機溶劑的提取率

經DPS多重比較分析，2種有機溶劑對問荊地上部的提取率差異顯著，氯仿的提取率為4.45％，明顯大于丙酮的提取率(2.72％)。根據相似相溶原理，可以推斷，問荊地上部中化學物質親脂性的較多，而親水性者較少。

2.2 丙酮提取物對4種供試植物株高的抑制作用

由表1可以看出，問荊的丙酮提取物中含有對這4種植物株高生長的抑制活性物質，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是1342.15、22104.53、19958.28、449.88mg／L。對植物株高生長抑制作用的基本順序是：萵苣＞馬唐＞蘿卜＞稗草。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

2.3 丙酮提取物對4種供試植物根長的抑制作用

由表2可以看出，問荊的丙酮提取物中含有對這4種植物根長生長的抑制活性物質，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是3007.88、370246.92、32909.07、123269.70mg／L。對植物根長抑制作用的基本順序是：萵苣＞稗草＞馬唐＞蘿卜。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

2.4 氯仿提取物對4種供試植物株高的抑制作用

由表3可以看出，問荊的氯仿提取物中含有對這4種植物株高生長的抑制活性物質，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是1327.43、1181526.27、446471.14、176689.97mg／L。對植物株高生長抑制作用的基本順序是：萵苣＞馬唐＞稗草＞蘿卜。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

2.5 氯仿提取物對4種供試植物根長的抑制作用

由表4可以看出，問荊的氯仿提取物中含有對這4種植物根長生長的抑制活性物質，其中對蘿卜、萵苣、馬唐、稗草的ECso分別是2471.94、527987.90、40769.26、73920.46mg／L。對植物株高生長抑制作用的基本順序是：萵苣＞稗草＞馬唐＞蘿卜。對萵苣的抑制效果明顯高于其它3種植物的抑制效果。

3 結論與討論

在化學提取流程中，選用何種有機溶劑能夠最大限度地提取和分離出抑制活性物質至關重要。本研究選用丙酮、氯仿兩種有機溶劑，采用索氏提取法對問荊地上部的活性成分進行了提取和活性測定。根據相似相溶的原理，推測活性成分中親脂性化合物較多，兩種有機溶劑的提取物對萵苣的抑制效果明顯強于其它3種植物。至于活性物質的具體結構與活性的關系等問題，尚需進一步分離和生物活性跟蹤測定。