超聲提取龍眼核總黃酮量的工藝

賢景春，陳美贏

（泉州師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，福建 泉州 362000）

超聲提取龍眼核總黃酮量的工藝

賢景春，陳美贏

（泉州師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，福建 泉州 362000）

采用超聲方法研究龍眼核藥用成分提取，探討溶劑的濃度、超聲時(shí)間、溫度、料液比等各種因素對(duì)黃酮提取率的影響。并通過(guò)正交法對(duì)其超聲提取進(jìn)行全面分析,確定最佳提取工藝。其最佳工藝參數(shù)為60%乙醇為提取劑，溫度70℃，時(shí)間30 min，料液比1∶13，在此條件黃酮提取率可達(dá)3.99%。

龍眼核；超聲提取；總黃酮量

龍眼是我國(guó)南方一種常見(jiàn)的水果，有著2000多年栽培歷史,栽培面積和產(chǎn)量均居世界首位。福建、廣東、廣西及臺(tái)灣等省是主產(chǎn)區(qū)，而泉州是福建省中龍眼的盛產(chǎn)區(qū)。龍眼核系龍眼的種仁，呈球形，表皮紅褐色有光澤，直徑約0.8 cm～1.3 cm。龍眼核的重量占龍眼果實(shí)鮮重的17%。龍眼核性味澀、平,氣微,味淡而微苦,具有止血、定痛、理氣化濕等功效,用于治療創(chuàng)傷出血[1]、疝氣、疥癬、濕瘡等，并有開(kāi)胃健脾,補(bǔ)虛益智的功效。龍眼肉可以治療虛勞贏弱,失眠健忘,驚悸怔。經(jīng)研究表明，龍眼核中含有較為豐富的黃酮,對(duì)α－葡萄糖苷酶具有良好的抑制作用[2]。并具有抗氧化、抗心腦血管疾病、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抑菌抗病毒、抗衰老、抗輻射等作用[3]。龍眼核的藥用作用在相關(guān)資料上很早就有過(guò)記載，但一直也沒(méi)有得到利用和開(kāi)發(fā)。

泉州地區(qū)每年廢棄的龍眼核的重量就達(dá)幾十萬(wàn)噸，是值得研究和利用的天然植物資源。本文采用乙醇為溶劑，用超聲的方法對(duì)龍眼核的藥用成分進(jìn)行了提取，研究了各種因素對(duì)提取率的影響，同時(shí)通過(guò)正交法對(duì)龍眼核藥用成分的超聲提取工藝進(jìn)行了較全面的探索,確定了龍眼核總黃酮量超聲提取的最佳工藝。

1 儀器與試劑

721E型可見(jiàn)分光光度計(jì)：上海光譜儀器有限公司；BS224S電子天平：北京塞多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；索氏提取器。龍眼核（福建省泉州市）；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品：中國(guó)藥品生物制品檢定所；硝酸鋁（AR）；亞硝酸鈉（AR）；氫氧化鈉（AR）；無(wú)水乙醇（AR）。

2 方法[4]

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確吸取蘆丁對(duì)照液（0.10 g/L）0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 于 10.00 mL 容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30 mL,搖勻，靜置6 min；再加10%硝酸鋁溶液0.30 mL，搖勻,靜置6 min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00 mL，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻,靜置12 min，以試劑作空白，于510 nm處測(cè)吸光度。運(yùn)用Origin作圖軟件繪制出吸光度—濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。

根據(jù)圖1得回歸方程：A=0.01621+18.24198X，相關(guān)系數(shù)r=0.9992。

2.2 超聲波乙醇提取龍眼核中總黃酮的方法

取新鮮龍眼核,烘干,粉碎過(guò)40目。稱(chēng)取龍眼核粉末1 g,加入一定量的乙醇溶液,恒溫、超聲振蕩提取,提取液趁熱過(guò)濾。濾液用相應(yīng)濃度的乙醇溶液定容至50.00 mL的樣品液。測(cè)量時(shí)，量取0.50 mL樣于10.00 mL容量瓶中。按測(cè)定蘆丁標(biāo)準(zhǔn)樣的方法，測(cè)定樣品液的吸光度。然后利用回歸方程及相關(guān)數(shù)據(jù)計(jì)算出樣品的總黃酮的提取率。

3 結(jié)果與討論

3.1 濃度對(duì)提取率的影響

在50℃下，料液比1/10(g/mL)，不同乙醇濃度的條件下，進(jìn)行超聲波處理2 h，結(jié)果見(jiàn)圖2。

由圖2可知，乙醇濃度在50%～70%時(shí)，有較高的提取率。乙醇濃度大于80%，反而黃酮提取率會(huì)大幅度降低。故可選取50%、60%、70%3個(gè)濃度作為正交因素。

3.2 溫度對(duì)提取率的影響

在乙醇濃度為60%，料液比為1/10（g/mL），不同溫度的條件下，進(jìn)行超聲波處理2 h，結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3結(jié)果表明，提取率隨溫度的升高不斷提高，但提高的幅度不大，考慮溫度太高會(huì)破壞黃酮類(lèi)藥物的活性，同時(shí)增加能耗。故選取50、60、70℃3個(gè)溫度作為正交因素。

3.3 時(shí)間對(duì)提取率的影響

在50℃，乙醇濃度為60%，料液比為1/10（g/mL），進(jìn)行超聲波處理，結(jié)果見(jiàn)圖4。

總黃酮提取率在10 min～180 min期間內(nèi)雖有提高，但只有0.5%的增幅。故從效率出發(fā)，選取10、20、30 min作為正交因素。

3.4 料液比對(duì)提取率的影響

在50℃，乙醇濃度為60%，不同固液比進(jìn)行超聲波處理2 h，結(jié)果見(jiàn)圖5。

由圖5可知總黃酮提取率雖隨提取溶劑量的增加有所提高，但增幅也只有0.1%左右。從節(jié)省成本，提高效率考慮，選取 1∶9、1∶11、1∶13 三個(gè)料液比因素進(jìn)行正交。

3.5 正交試驗(yàn)

用正交試驗(yàn)方案綜合考察提取溶劑濃度、溫度、時(shí)間以及料液比4個(gè)因素對(duì)提取率的影響,每個(gè)因素選擇3個(gè)水平（表1）。以總黃酮類(lèi)化合物提取率為考核指標(biāo)，用L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果如表2。

表1 因素水平表Table1 Factor and level of experiment

表2 L9（34）的正交設(shè)計(jì)及極差分析結(jié)果Table2 Orthogonal experimental L9（34）and analytical result of polar difference

由表2的極差值R分析結(jié)果可以看出，4種因素對(duì)總黃酮類(lèi)化合物提取率的影響程度依次為A>B>D>C,即濃度>溫度>料液比>時(shí)間。其中濃度對(duì)提取率的影響最顯著，提取時(shí)間對(duì)提取率的影響最小[5]。結(jié)果4種因素的優(yōu)化組合為A2B3C3D3。

4 結(jié)論

采用超聲方法對(duì)龍眼核總黃酮量進(jìn)行提取，工藝設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便，提取時(shí)間短，溫度、濃度適中。通過(guò)單因素試驗(yàn)討論了濃度、溫度、時(shí)間、料液比對(duì)提取率的影響，正交試驗(yàn)確定了影響黃酮提取率的主次順序。龍眼核超聲提取的最佳工藝條件是，乙醇濃度60%，溫度70℃，時(shí)間30 min，料液比1∶13。按此優(yōu)化組合平行試驗(yàn)3次，平均總黃酮提取率為3.99%，此項(xiàng)研究為龍眼核的應(yīng)用開(kāi)發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。

[1]肖更生，黃儒強(qiáng)，曾慶孝，等.龍眼核的營(yíng)養(yǎng)成分[J].食品科技,2004(1)：93－94

[2]黃儒強(qiáng)，劉學(xué)銘，曾慶孝.龍眼核提取物對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究[J].現(xiàn)代食品科技，2005，21(2)：62－63

[3]姜國(guó)芳,謝宗波,樂(lè)長(zhǎng)高.銀杏葉黃酮類(lèi)化合物的研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2004,15(5):306-308

[4]張永明,張倩,楊青,等.現(xiàn)代技術(shù)與傳統(tǒng)方法萃取古尼蟲(chóng)草總黃酮的比較[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2007，28(1)：136－140

[5]蘭昌云,周崇松,范必威，等.超聲波法提取槐花中黃酮的最佳工藝研究[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2005，17(1)：55－58

Study of the Procedures of Extracting Total Quantity of Flavone from Longan Seed by Using Ultrasonic Wave and Ethanol Extraction

XIAN Jing-chun，CHEN Mei-ying
（The College of Chemistry and Life Science，Quanzhou Normal College，Quanzhou 362000，F(xiàn)ujian,China）

This paper aims to extract total quantity flavone from longan seed based on the reality that longan seed is a kind of plentiful fruit in quanzhou.This research discussed the method of extracting total quantity of flavone and the effect of concentration of menstruum,time,temperature,ratio of material to liquid.Meanwhile,the best conditions for extraction were chosen after complete orthogonal analysis.The best parameters are 60%ethanol as extractant,temperature on 70 ℃,extraction time by 30 min,ratio of material to liquid on 1∶13.In this case,the rate of extraction can reach up to 3.99%.

longan core；ultrasonic wave；flavone

泉州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2007N4）；泉州師范學(xué)院碩士學(xué)位授予單位立項(xiàng)建設(shè)化學(xué)學(xué)科資助

賢景春（1955—），女（漢），教授，本科，主要從事配位化學(xué)研究。

2009-07-02