紫蘇子油納米乳的制備及其對高血壓大鼠血壓及心率的影響

吳旭錦,朱小甫

(咸陽職業(yè)技術學院生物科技系,陜西咸陽712000)

高血壓可導致多種心血管疾病的發(fā)生,嚴重危害人類的健康,目前臨床上應用的降血壓藥對肝、腎多有不良反應,且易產生藥物依賴。因此,尋找無毒副作用的降壓藥,是心腦血管疾病防治中亟待解決的問題。紫蘇子油可降血壓、降血脂、預防心血管疾病[1-3],但它對血壓的影響及其作用的機制是目前尚未深入開展的課題。

紫蘇子油屬干性油,在加工和儲藏過程中極易氧化而失去生理活性。因而防止紫蘇子油氧化的方法是其生產、貯存中最關鍵的問題。納米乳是一種近年來被廣泛應用的新型藥物載體,對易氧化的藥物有保護作用[4]。現(xiàn)以聚氧乙烯氫化蓖麻油(RH 40)為表面活性劑,小麥胚芽油為油相,制備紫蘇子油納米乳,觀察紫蘇子油納米乳對高血壓大鼠血壓及心率的影響,為紫蘇子油的應用開發(fā)提供合理的試驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料 左旋硝基精氨酸(L-NNA,Sigma公司);紫蘇子油(盤錦格潤生物科技有限公司);紫蘇子油軟膠囊(湖北李時珍生物科技有限公司);其他所用試劑均為國產分析純。SD大鼠(體重160～180 g,雌雄各半),購于解放軍第四軍醫(yī)大學實驗動物中心。

1.2 方法

1.2.1 紫蘇子油納米乳的制備 采用滴定法制備紫蘇子油納米乳：精確稱取聚氧乙烯氫化蓖麻油(RH 40)18.0 g,小麥胚芽油2.0 g,放入燒杯,室溫下攪拌使之充分混勻,加入5.0 g紫蘇子油,攪拌混勻后向其中緩慢滴加蒸餾水,邊加邊攪拌,體系會變粘稠,繼續(xù)滴加并不斷攪拌,當體系突然變稀時,形成的即是穩(wěn)定的無色透明紫蘇子油納米乳,稱其總重量為50.0 g。

1.2.2 紫蘇子油納米乳對大鼠血壓及心率的影響

1.2.2.1 大鼠高血壓模型的建立[5]采用腹腔注射L-NNA建立高血壓大鼠模型。將20只體重160 g～180 g SD大鼠隨機分為2組,雌雄各半。LNNA 組：每日給L-NNA 15 mg/(kg?d),分2次腹腔注射,連續(xù)4周,以此方法來制備高血壓模型;于第2周起給自來水2mL灌胃,每日1次,連續(xù)4周。對照組：給1 mL生理鹽水腹腔注射,每日2次,連續(xù)4周。于第2周起給自來水2mL灌胃,每日1次,連續(xù)4周。于第4周末用RBP-1B型大鼠尾壓測量儀測定每組大鼠血壓。

1.2.2.2 紫蘇子油納米乳對高血壓大鼠血壓及心率的影響 將SD大鼠70只,隨機分成7組,每組10只,雌雄各半,分為正常組(正常飼喂)、模型組(每日灌服生理鹽水2.5 g/kg)、空白納米乳組(每日灌服空白納米乳2.25 g/kg)、紫蘇子油軟膠囊組(每日灌服紫蘇子油軟膠囊2.60 g/kg)、紫蘇子油組(每日灌服紫蘇子油2.00 g/kg)、紫蘇子油納米乳組(每日灌服紫蘇子油納米乳2.25 g/kg)及陽性對照組(每日灌服牛黃降壓丸0.12 g/kg),連續(xù)給藥15 d后,測量各組大鼠尾動脈收縮壓和心率的變化。測定時間定于 8：00～9：00。以心臟重量(m g)/體重(g)比值表示心指數(shù)。結果進行統(tǒng)計學處理試驗結果以±SD表示,應用方差分析及組間q檢驗作統(tǒng)計學處理。

2 結果

2.1 紫蘇子油納米乳制備結果 RH 40與小麥胚芽油質量比為8∶2、9∶1時均能形成穩(wěn)定、均質、透明的具淡藍色乳光的紫蘇子油納米乳,以8∶2為佳。

2.2 對大鼠血壓及心率的影響試驗結果

2.2.1 大鼠高血壓模型的建立結果 腹腔注射LNNA建立高血壓大鼠模型,4周后,用RBP-1B型大鼠尾壓測量儀測定每組大鼠血壓,結果見表1。模型組大鼠與正常組大鼠血壓有顯著差異,說明造模成功。與對照組大鼠相比,L-NNA大鼠血壓升高48%(P＜0.01),心率減慢10%(P＜0.01),心肌肥大,心指數(shù)增加26%(P＜0.01)。

表 1 大鼠高血壓模型建立的測定結果(±SD,n=10)

表 1 大鼠高血壓模型建立的測定結果(±SD,n=10)

注：與正常組比較,差異極顯著(P＜0.01),用字母a表示

組別 血壓 心率 心指數(shù)正常組 110±5 384±10 3.08±0.18模型組 163±8a 345±9a 3.88±0.19a

2.2.2 大鼠血壓及心率影響的試驗結果 紫蘇子油納米乳對高血壓大鼠血壓的影響見表2。紫蘇子油納米乳能顯著降低大鼠血壓,與模型組比較,血壓降低28%(P＜0.01),心率增快14%(P＜0.01),心指數(shù)降低19%(P＜0.01)。

3 討論

本研究結果顯示,紫蘇子油納米乳對大鼠尾動脈收縮壓顯著低于模型組,提示較高劑量的紫蘇子油納米乳有明顯的抵抗血壓升高的作用,這為紫蘇子油的應用開發(fā)提供了合理的試驗依據。

心腦血管病死亡率很高,高血壓則是冠心病、心肌梗死、腦卒中的主要危險因素之一。多年以來,眾多學者致力于心腦血管病的研究,建立了多種高血壓動物模型,這對人類高血壓病的發(fā)病機制、并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展規(guī)律及防治措施起了重要的作用。高血壓大鼠模型也可分為自發(fā)性高血壓大鼠模型和繼發(fā)性高血壓大鼠模型。藥物誘發(fā)高血壓大鼠模型屬于繼發(fā)性高血壓大鼠模型。本研究采用腹腔注射LNNA建立高血壓大鼠模型,機制是臨床及試驗研究表明,高血壓患者及動物存在內皮依賴性的血管舒張功能障礙,在持續(xù)性的誘導NO合成下降過程中,內皮功能障礙可增強壓力反射,通過損害機體的自穩(wěn)機制中而引起高血壓,升高的血壓又可以進一步損害內皮細胞的NO合成能力,維持已形成的高血壓。

表2 紫蘇子油納米乳對高血壓大鼠血壓、心率和心指數(shù)的影響(±SD,n=10)

表2 紫蘇子油納米乳對高血壓大鼠血壓、心率和心指數(shù)的影響(±SD,n=10)

注：與模型組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母a表示;差異極顯著(P＜0.01),用字母 b表示;與正常組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母c表示;差異極顯著(P＜0.01),用字母d表示;與陽性對照組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母 e表示;差異極顯著(P＜0.01),用字母f表示;與紫蘇子油納米乳組比較,差異顯著(P＜0.05),用字母g表示

組別 血壓(mm Hg) 心率(次/m in) 心指數(shù)正常組 112±8b 386±9 3.11±0.15模型組 162±7 342±6 3.85±0.17紫蘇子油組 129±4a,c,e,g 399±2 3.12±0.16紫蘇子油軟膠囊組 130±6a,c,e,g 401±4 3.14±0.12空白納米乳組 161±5d,f 340±9 3.82±0.14陽性對照組 110±6b 382±5 3.09±0.11紫蘇子油納米乳 116±7b 390±8 3.10±0.16

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：化學工業(yè)出版社,2005：237.

[2] 郭英,蔡秀成,李華娟,等.紫蘇子油和松籽油對大鼠機體脂類和脂質過氧化的影響[J].營養(yǎng)學報,1996,18(3)：268-273.

[3] Shimokawa T,Mo riu chi A,H ori T,eta l.Effect of dietarv alinolenate/linoleatebalanceonm ean su rvival time,incidence of stroke and blood pressu re of spontaneously by pertensive rats[J].Life Sciences,1998,43(25)：2067-2072.

[4] 趙建,張鈞壽,張瑛,等.胰島素微乳大鼠結腸給藥的藥效學研究[J].中國藥科大學學報,2004,35(6)：491.

[5] 葉海英,張忠義.法莫替丁微乳的研制及其質量評價[J].第一軍醫(yī)大學學報,2003,23(1)：68-70.