苦參素對肝炎后肝硬化患者外周血T細胞亞群和肝纖維化指標的影響

錢文杰

(浙江省樂清市第二人民醫院消化科，浙江 樂清 325608）

肝炎后肝硬化患者存在外周血T淋巴細胞功能失調，表現為CD3+和 CD4+細胞減少，CD8+細胞增加，CD4+/CD8+比值降低[1]。苦參素是從中藥苦豆子中提取的一種生物堿，具有抗炎、免疫調控、抗纖維化、降酶、退黃等藥理作用和臨床功能，對乙型肝炎后肝硬化治療效果肯定[2-3]，但國內外關于其對乙型肝炎后肝硬化患者外周血T細胞亞群的調節作用報道較少。筆者以乙型肝炎后肝硬化患者為研究對象，觀察苦參素對其外周血T細胞亞群CD4+和CD8+及肝纖維化指標的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2007年1月至2008年10月在我院治療的乙型肝炎后肝硬化患者40例作為治療組，均符合2000年9月西安全國傳染病與寄生蟲病學術會議制訂的《肝硬化診斷標準》[4]，其中男28例，女 12例；年齡 21～68歲，平均（41.5±9.7）歲；抗 HAV-IgM、抗HCV、抗HEV和抗HGV均陰性；排除自身免疫性肝炎、藥物性肝炎和脂肪肝。另選擇正常健康體檢者30例作為對照組，其中男20例，女 10例；年齡 19～61歲，平均（39.2±8.9）歲。

1.2 治療方法

治療組在保肝、利尿、補充電解質等一般性治療基礎上加用苦參素(氧化苦參堿膠囊，寧夏藥物研究所)300 mg口服，3次/d，療程3個月。在治療前和治療3月后檢測患者外周血T細胞亞群CD4+和CD8+及肝纖維化指標。對照組上述指標只測定1次。

1.3 觀察指標及方法

T細胞亞群：采用堿性磷酸酶法檢測患者外周血T細胞亞群CD4+和CD8+及CD4+/CD8+比值，試劑購自北京軍事科學院，具體步驟按試劑說明書進行操作。肝纖維化指標：采用放射免疫分析法檢測透明質酸(HA)、!型前膠原(PC!)、"型膠原(".C)、層粘蛋白(LN)，試劑由海軍醫學研究所提供。

1.4 統計學方法

結果用均數±標準差(X±s)表示，以SPSS 10.0軟件包進行統計分析，采用 t檢驗。

2 結果

2.1 外周血T細胞亞群變化

結果見表1。與對照組比較，治療組治療前外周血CD4+明顯減少，CD8+明顯增加，CD4+/CD8+比值下降；治療后外周血CD4+明顯增加，CD8+明顯減少，CD4+/CD8+比值明顯增加。

2.2 肝纖維化指標變化

結果見表2。與治療前比較，治療組治療后肝纖維化指標均明顯下降(P＜0.05或 P＜0.01)。

表1 對照組與治療組治療前后外周血T細胞亞群的變化(X±s)

表2 治療組治療前后肝纖維化指標的變化(X±s)

3 討論

乙型肝炎后肝硬化是乙型肝炎病毒（HBV）引起肝損傷，導致肝纖維化并逐漸加重的結果，如早期進行干預性治療可阻止或延緩肝硬化的發生。苦參素注射液中98%以上為氧化苦參堿。動物研究發現，氧化苦參堿有抗HBV作用，可降低HBV轉基因鼠肝臟內乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原（HBsAg和HBeAg）的含量，使Th1型細胞因子水平明顯升高，Th2型細胞因子水平明顯降低[5]。

HBV感染后出現不同臨床轉歸的機制目前尚不完全清楚，可能取決于病毒和宿主兩方面的因素。國內外研究顯示，宿主的細胞免疫功能特別是HBV特異性的CD4+和CD8+T細胞反應對HBV的清除和疾病的轉歸有重要影響[1，6]。CD4+和CD8+是T淋巴細胞中具有重要功能的兩個亞群，可以反映機體基本的細胞免疫狀態，CD4+/CD8+比值可在一定程度上反映機體細胞免疫調節功能。針對HBV的CD4+或CD8+T細胞反應是決定HBV感染患者預后的關鍵因素。對CD4+或CD8+細胞刪除黑猩猩HBV感染模型研究發現，通過細胞溶解或非溶解機制是CD8+細胞清除機體感染HBV的主要方式，而CD4+細胞通過分泌Th1細胞因子抑制HBV復制[7]。由本研究結果可知，乙型肝炎后肝硬化患者存在外周血T細胞亞群紊亂，經過苦參素治療3個月后有明顯改善，表明苦參素能通過調節外周血T細胞亞群紊亂，提高細胞免疫反應，有效抑制HBVDNA的復制，從而清除細胞內病毒。這與吳炳權等[8]報道相符。

纖維化是慢性肝病重要的病理特征，也是進一步向肝硬化發展的中間環節。其發生的主要機制是細胞外基質(ECM)的過度增多和異常沉積導致肝臟正常結構的破壞與重構及肝功能的損傷[9]。近年來對肝組織學和血清肝纖維化指標相關性的研究結果表明，血清肝纖維化指標和肝組織纖維化程度有良好的相關性，并與肝組織纖維化發展的階段性相一致[10]，故檢測血清肝纖維化指標ECM產物(HA，LN，PC"，#.C)的含量可客觀地推測肝細胞損傷及纖維化程度。本研究結果顯示，治療組患者經過苦參素治療3個月后，肝纖維化指標較治療前均明顯下降。推測治療后患者肝內ECM合成、膠原合成被抑制，纖維化程度得以改善，提示苦參素對肝纖維化有一定療效，與薛桂芹等[3]的報道一致。

綜上所述，肝炎后肝硬化患者存在外周血T細胞亞群紊亂，苦參素能通過調節外周血T細胞亞群紊亂，提高細胞免疫反應，有效抑制HBV-DNA病毒的復制，降低患者血清中肝纖維化指標水平，進而達到清除細胞內病毒、防治肝纖維化的目的。

[1]趙彩彥，劉金星，湯慧花.肝硬化和肝癌患者血清IL-2系統、IL-6、T細胞亞群的變化和意義[J].中華消化雜志，1999，19(1):68-69.

[2]喻志標，黃建榮，黃經球，等.苦參素藥理毒理與臨床應用研究進展[J].藥品評價，2005，2(6):455-458.

[3]薛桂芹，馬文娜.苦參素注射液治療乙型肝炎肝硬化62例療效觀察[J].菏澤醫專學報，2004，16(3):1-2.

[4]中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華肝臟病雜志，2000，8(5):324-329.

[5]董宇紅，席宏麗，田 楓，等.苦參素對HBsAg轉基因小鼠血清Th1和Th2細胞因子水平的影響[J].中華實驗和臨床病毒學雜志，2004，18(3):277-280.

[6]Alatrakchi N，Koziel MJ.Antiviral T-cell responses and therapy in chronic hepatitis B[J].J Hepatol，2003，39(4):631-634.

[7]Thimme R，Wieland S，Steiger C，et al.CD8(+)T cells mediate viral clearance and disease pathogenesis during acute hepatitis B virus infection[J].J Virol，2003，77(1):68-76.

[8]吳炳權，王婭玲，陳妙天，等.苦參素對肝炎后肝硬化T細胞亞群的影響[J].浙江中西醫結合雜志，2006，16(5):270-271.

[9]王吉耀.重視肝纖維化的基礎與臨床研究[J].中華醫學雜志，2005，85(15):1 009-1 010.

[10]薛愛玲，胡益民，高宗玲.病毒性肝炎病人血清纖維化標志檢測及其意義[J].中國基層醫藥，2004，11(4):453-454.