孟魯司特對(duì)哮喘患兒外周血Th 1/Th2平衡的調(diào)控作用及肺功能的影響

湯衛(wèi)紅，茹錦巖，管敏昌

(浙江省臺(tái)州醫(yī)院路橋院區(qū)兒內(nèi)科，浙江 臺(tái)州 318050)

支氣管哮喘是一種以氣道高反應(yīng)性和慢性炎癥性氣道阻塞為特征的變態(tài)反應(yīng)性疾病，T細(xì)胞及其分泌的各種因子在哮喘的氣道慢性炎癥中發(fā)揮著重要作用。目前T輔助淋巴細(xì)胞兩個(gè)功能性亞群(Th1和Th2)的失衡在支氣管哮喘發(fā)病中的作用已引起廣泛關(guān)注[1]。免疫學(xué)上一般以干擾素 -!（IFN-!）和白細(xì)胞介素 4（IL-4）分別作為Th1和Th2細(xì)胞的特征性細(xì)胞因子，通過檢測(cè)這兩種細(xì)胞因子可以了解Th1和Th2細(xì)胞的功能狀態(tài)。孟魯司特是一種白三烯受體拮抗劑，近年來臨床研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)哮喘患兒療效確切[2]，動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)其具有調(diào)節(jié)哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡的作用[3]，但國內(nèi)外對(duì)哮喘患兒外周血Th1/Th2細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用鮮有報(bào)道。筆者通過觀察孟魯司特對(duì)哮喘患兒外周血IL-4和IFN-!、免疫球蛋白E（IgE）水平的干預(yù)及肺功能的影響，探討其對(duì)外周血Th1/Th2平衡的調(diào)控作用及其防治哮喘的作用機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2008年1月至10月在我院兒科門診就診的急性發(fā)作期哮喘患兒80例，診斷均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科分會(huì)呼吸學(xué)組制訂的哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)，將其隨機(jī)均分為兩組。治療組40例中男22例，女18例；年齡 9～13歲，平均（11.2±1.7）歲。對(duì)照組 40例中男 23例，女 17例；年齡8～14歲，平均（11.6±1.9）歲。所有患兒發(fā)病前4周內(nèi)均無感染性疾病史和免疫抑制劑應(yīng)用史，1周內(nèi)未用過色甘酸鈉、酮替芬或其他抗組胺類藥物，無心、肝、腎等嚴(yán)重的器質(zhì)性疾病。兩組患兒性別、年齡、病程、哮喘程度比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法

對(duì)照組予常規(guī)吸入激素治療。治療組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用孟魯司特鈉片5 mg/d，1次/d，睡前口服，連用3月。兩組患兒治療期間病情反復(fù)發(fā)作者，可加用短效"2-受體激動(dòng)劑。

1.3 觀察指標(biāo)

兩組患兒均于治療前和治療3月后檢測(cè)外周血IL-4，IFN-!，IgE及肺功能的變化。用淋巴細(xì)胞分離液從肝素抗凝血中分離單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，1×109/mL細(xì)胞加入植物血凝素(PHA)100 g/L，37 ℃ 、5%CO2培養(yǎng) 48 h，收集上清液，用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)IL-4和IFN-!含量。以IRMA法檢測(cè)外周血IgE水平，試劑盒購于法國Daclone公司和北方免疫試劑研究所，嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。采用意大利Spirolab便攜式肺功能儀檢測(cè)肺功能，觀察大氣道指標(biāo)用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼氣量(FEV1)、最大呼氣流速(PEF)，小氣道指標(biāo)25%肺活量呼氣流速(FEF25)、50%肺活量呼氣流速(FEF50)、75%肺活量呼氣流速(FEF75)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示，以SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用 t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

結(jié)果見表1。兩組患兒治療前外周血IL-4，IFN-!，IgE水平及肺功能指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，治療后外周血IL-4和IgE水平均明顯下降，IFN-!水平均明顯上升，肺功能指標(biāo)均明顯改善，且治療組較對(duì)照組變化更明顯、改善程度更高。

表1 兩組患兒觀察指標(biāo)變化（X±s）

3 討論

正常情況下，體內(nèi)Th1/Th2系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)，Th1細(xì)胞可產(chǎn)生白細(xì)胞介素 2（IL-2）、白細(xì)胞介素 12（IL-12）、IFN-! 等細(xì)胞因子，介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答；Th2細(xì)胞可產(chǎn)生白細(xì)胞介素 4，5，6，9，10（IL-4，IL-5，IL-6，IL-9，IL-10）等細(xì)胞因子，介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。兩種免疫應(yīng)答之間存在著交互的負(fù)反饋?zhàn)饔?，維持著正常的免疫平衡，一旦此平衡被打破，出現(xiàn)Th1型或Th2型反應(yīng)優(yōu)勢(shì)，則會(huì)引起異常的免疫應(yīng)答，出現(xiàn)病理狀態(tài)。

目前普遍認(rèn)為，支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)制主要與Th1/Th2型細(xì)胞因子比例失衡密切相關(guān)[1，4]。正常情況下，Th1細(xì)胞分泌 IL-2 和IFN-"，促進(jìn)Th0細(xì)胞向Th1分化，同時(shí)抑制Th2型細(xì)胞因子的分泌；Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子中，IL-4是關(guān)鍵分子，它可以抑制IFN-"分泌，促進(jìn)Th0細(xì)胞向Th2分化，促進(jìn)Th2細(xì)胞分泌IL-5和白細(xì)胞介素13（IL-13），從而募集嗜酸性粒細(xì)胞，介導(dǎo)B細(xì)胞分泌IgE，最終導(dǎo)致哮喘的一系列病理生理變化。哮喘時(shí)，Th1/Th2型細(xì)胞因子平衡失調(diào)，Th2型細(xì)胞效應(yīng)增強(qiáng)，Th1型細(xì)胞效應(yīng)減弱，尤其是IL-4/IFN-"的比例與哮喘的進(jìn)展密切相關(guān)，因而人們常常以此比例來間接反映Th1/Th2的比例。調(diào)整Th1/Th2平衡，糾正Th1細(xì)胞向Th2細(xì)胞漂移狀況，使免疫反應(yīng)由Th2型向Th1型逆轉(zhuǎn)，是目前治療哮喘最有效的途徑[5]。

白三烯作為花生四烯酸的代謝產(chǎn)物，能誘發(fā)哮喘患兒的氣道和其他組織產(chǎn)生大量的前炎癥反應(yīng)，即平滑肌痙攣、血流改變、血漿滲出、黏液分泌和炎性細(xì)胞活化，誘發(fā)哮喘反復(fù)急性發(fā)作。孟魯司特鈉是新一代的白三烯受體拮抗劑，能阻斷白三烯與受體的結(jié)合，從而阻斷白三烯的致炎作用，抑制氣道炎癥，緩解氣道痙攣，降低氣道高反應(yīng)性，減輕氣道阻塞，有效控制哮喘癥狀，改善肺功能[6]。Ihaku等[7]研究發(fā)現(xiàn)，孟魯司特可抑制棕色挪威大鼠的遲發(fā)性氣道反應(yīng)，抑制氣道中嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤，顯著降低IL-5 mRNA的表達(dá)。Henderson等[8]研究發(fā)現(xiàn)，孟魯司特鈉能抑制哮喘小鼠氣道內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞浸潤、杯狀細(xì)胞增多及氣道平滑肌細(xì)胞增生等，降低哮喘小鼠肺組織內(nèi)細(xì)胞周期蛋白的表達(dá)水平，延緩氣道重塑及肺纖維化進(jìn)程。近年來動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，孟魯司特治療哮喘的作用機(jī)制與糾正Th2的過度極化，上調(diào)Th1方向的分化，恢復(fù)Th1/Th2的平衡有關(guān)[3]。本研究結(jié)果顯示，孟魯司特治療哮喘的臨床療效確切，能明顯改善患兒的肺功能，其作用機(jī)制可能是通過糾正Th1/Th2細(xì)胞因子平衡，使免疫反應(yīng)由Th2型向Th1型逆轉(zhuǎn)，抑制嗜酸性細(xì)胞聚集，減少IgE分泌。

[1]Varga EM，Wachholz P，Nouri AK，et al.T cells from human allergeninduced late asthmatic responses express IL-12 receptor beta 2 subunit mRNA and respond to IL-12 in vitro[J].J Immunol，2000，165(5):2 877-2 885.

[2]姚冬莉，崔敏嫻，張 源，等.孟魯司特鈉預(yù)防兒童哮喘急性發(fā)作臨床療效分析[J].浙江醫(yī)學(xué)，2006，28(4):298-299.

[3]冼樂武，梁宗安，劉春濤.支氣管哮喘大鼠單個(gè)核細(xì)胞Th1/Th2的變化及孟魯司特的干預(yù)作用[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2003，26(5):312-313.

[4]梁 紅，譚 平.哮喘患者Th1/Th2細(xì)胞因子水平變化[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2006，10(11):1 350-1 352.

[5]韓詩淼，崔雁輝.支氣管哮喘患者外周血單核細(xì)胞因子Th1/Th2失衡的檢測(cè)[J].中國基層醫(yī)藥，2007，14(3):439-440.

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[7]Ihaku D，Cameron L，Suzuki M，et al.Montelukast，a leukotriene receptor antagonist，inhibits the late airway response to antigen，airway eosinophilia，and IL-5-expressing cells in Brown Norway rats[J].J Allergy Clin Immunol，1999，104:1 147-1 154.

[8]Henderson WR，Tang LO，Chu SJ，et al.A role for cysteinyl leukotrienes in airway remodeling in a mouse asthma model[J].Am J Respir Crit Care Med，2002，165(1):108-116.