中藥方劑對鴨疫里氏桿菌病的治療效果研究

肖琛聞，鮑國連，韋 強，劉 燕，季權安

（浙江省農業科學院畜牧獸醫研究所，杭州石橋路145號310021）

鴨疫里氏桿菌病是由鴨疫里氏桿菌引起的鴨、鵝、火雞等多種禽類的一種急性或慢性傳染病。該病呈急性或慢性敗血癥過程，以纖維性心包炎、肝周炎、氣囊炎、干酪性輸卵管炎為特征。1-8周齡鴨敏感，惡劣環境條件可以促發感染。發病率為5%一90%，病死率高達80%，慢性耐過鴨主要表現神經性癥狀，導致殘鴨和僵鴨。RA血清型較多，全菌疫苗存在著較大的局限性，該病的疫苗目前還沒有獲得國家批文。對于鴨傳染性漿膜炎治療現在多采用抗生素治療，但效果不十分理想，容易產生耐藥性，危害人類健康。

中藥防治疾病作為動物疫病防治手段越來越受到重視和青睞。天然藥物具有綠色，環保，無藥物殘留等優點。本研究室在前期已經研究發現中藥對于防治鴨疫里氏桿菌病有較好效果。本研究將在此基礎上研究中藥對鴨疫里氏桿菌病的防治效果，同時對中藥的抗菌機理作一些研究。

1 材料和方法

1．1 材料

1．1．1 藥物

黃連、黃柏、甘草、白頭翁、秦皮等中藥，均購自杭州武林藥店。

1．1．2 實驗動物

10日齡櫻桃谷非免疫鴨由浙江省桐鄉市某鴨場提供，出生后至實驗結束，飼喂不含抗生素的配合飼料。在本實驗室動物房適應飼養

1天后用于實驗。

1．1．3 菌種和培養基

鴨疫里氏桿菌II型菌種由本實驗室保存，馬丁瓊脂和肉湯培養基由本實驗室配制。

1．2 方法

1．2．1 實驗一

1.2.1.1 中藥方劑口服用藥

由于鴨疫里氏桿菌病的臨床癥狀呈急性或慢性敗血過程，以纖維性心包炎、肝周炎、氣囊炎、干酪性輸卵管炎為特征。根據中醫診斷判斷其急性病程特征為熱證特征，根據中醫辨證論治方法，需以清熱涼血藥治療。結合前期本實驗室研究結果，擬出2個方劑，分別是黃連漿膜湯：黃連 1g，黃柏 1g，甘草 2g；白頭翁湯：白頭翁 2g，黃連 1g，黃柏 1g，秦皮 1g。各組方用100ml水煎制，共煎制兩次，合并煎液為100m1。每羽鴨每次喝5m1藥液，喝時摻水5ml。每天早晚各一次。

1.2.1.2 試管體外抑菌法及OD值測定

另外采用水煎法制備生藥濃度為1g／ml的白頭翁湯，過0．22μm濾膜待用。取試管8支，分別加入肉湯2m1TSB肉湯，50μl細菌菌液，200μ1白頭翁原液或不同稀釋倍數 (用TSB對倍稀釋)的白頭翁湯，搖床培養24小時，觀察結果，并且在OD570nm下測吸光值。

1.2.1.3 動物分組與處理

將60只鴨子隨機分為5組，每組12只。具體分組情況見下表1。

表1 動物分組與處理

1．2．1．1 人工發病治療試驗

根據已有的試驗結果，給各小組的小鴨注射II型RA細菌0.15ml/只，（II型RA含菌量均為 1.5×109cfu/ml，使用平板計數法）。各組鴨的臨床癥狀和死亡情況連續觀察6天。記錄鴨健康變化情況。

1．2．2 實驗二

1．2．2．1 中藥方劑口服用藥白頭翁湯：白頭翁2g，黃連1g，黃柏1g，秦皮1g。

表2 動物分組與處理

各組方用100ml水煎制，共煎制兩次，合并煎液為100ml。每羽鴨每次喝5ml藥液，喝時摻水5ml。每天早晚各一次。

1．2．2．2 動物分組與處理

將40只鴨子隨機分為5組，每組8只。具體分組情況見下表2。

1．2．2．3 人工發病治療試驗

根據已有的試驗結果，給各小組的小鴨注射II型RA細菌0.15ml/只，（II型RA含菌量均為 1.5×109cfu/ml，使用平板計數法）。各組鴨的臨床癥狀和死亡情況連續觀察6天。記錄鴨健康變化情況。

2 結果

2．1 白頭翁湯體外最小抑菌濃度

白頭翁湯體外最小抑菌濃度為0.125g/ml。見圖1

2．2 中藥方劑對于鴨疫里氏桿菌病治療效果（實驗一）

攻毒后鴨群精神萎靡、食欲減退或廢絕、縮頸嗜睡，眼瞼和鼻孔處附粘性分泌物，病死鴨剖檢呈典型傳染性漿膜炎癥狀，心臟，肝臟被膜，心包炎等癥狀。白頭翁組鴨精神較好于其他組，存活率最高。經2d治療，白頭翁組病情得到控制，經卡方統計表明，白頭翁組與對照組比，差異顯著（P＜0.01）。

表3 中藥方劑對于鴨疫里氏桿菌病治療效果（一）

2．3白頭翁湯對于鴨疫里氏桿菌病治療效果 （實驗二）

攻毒后鴨群精神萎靡、食欲減退或廢絕、縮頸嗜睡，眼瞼和鼻孔處附粘性分泌物，病死鴨剖檢呈典型傳染性漿膜炎癥狀，心臟、肝臟被膜，心包炎等癥狀。白頭翁組鴨精神較好于其他組，存活率最高。經2d治療，白頭翁湯3組與對照組對比，差異顯著（P＜0.01）。

表4 中藥方劑對于鴨疫里氏桿菌病治療效果（二）

3 討論

隨著規模養鴨業的不斷擴大和區域養殖業的迅速發展，養殖區內成片爆發鴨病時有發生。浙江省近年爆發的鴨疫里氏桿菌病主要以Ⅰ型和Ⅱ型居多，其中又以Ⅱ型更為急性。抗生素治療雖然短期可以治愈該病，但長期使用會造成耐藥菌株的出現，反而使疫病更難控制，另外抗生素治療會造成鴨體內大量抗生素殘留進而危害人類健康。因此迫切需要一種環保綠色的方法控制該病。

中藥治療一些動物疫病已有成功案例[1-3]。本研究中使用黃連漿膜湯以及白頭翁湯進行對于鴨疫里氏桿菌II型病的治療研究。發現白頭翁湯連用2天可以提高鴨群較好的抵抗RAII型攻擊。

方中黃連、黃柏對大腸桿菌、金葡菌、鏈球菌、肺炎球菌等皆有較強的抗菌作用[4]。白頭翁鮮汁、煎劑及乙醇提取物，體外實驗對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌、枯草桿菌、傷寒桿菌、沙門氏桿菌等都有明顯抑制作用[5]。曹景花等[6]研究發現，100%白頭翁水浸出液濾紙片對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、炭疽桿菌、傷寒桿菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌等均有明顯抑菌作用。白頭翁及其復方對皮膚真菌、酵母菌、錐蟲、白色念珠菌等均有抑制作用；白頭翁素還具有很強的殺真菌作用[7]。此外，白頭翁對小白鼠流感病毒有輕微抑制作用[7]。本研究中的白頭翁湯可以使患病鴨群死亡率降低至50%。治療效果顯著，可以為鴨疫里氏桿菌病的防治提供一種新的治療手段。

[1]姚林宇.中藥治療鴨病毒性肝炎[J].畜牧與獸醫，2004，6：45.

[2]陳功義，何志生.自擬清瘟解毒飲治療鴨病毒性肝炎[J].中獸醫學雜志，2005，（04）：19.

[3]季權安，韋強，鮑國連，張先福，蔡翼虎，俞堅群，俞乾挺.中藥防治野鴨大腸桿菌病的臨床效果試驗[J].浙江畜牧獸醫，2007，（02）：5-6.

[4]魯華柏，陳坤.中藥治療鴨出敗[J].中獸醫醫藥雜志，2004，5：38.

[5]韓進庭.白頭翁的藥理作用及臨床應用[J].現代醫藥衛生，2007，14（23）：2123-2124.

[6]曹景花，李玉蘭，邱世翠.白頭翁的體外抑菌作用研究[J].時珍國醫國藥，2003，14（9）：528.

[7]王本祥.新編中藥學辭典[M].天津：科學技術出版社，1996，p361.