阿咖酚散中雜質水楊酸檢查要點探討

國家標準對阿咖酚散中水楊酸要求的限度是不得過阿司匹林的2%，但最新的2010版[3]藥典中阿司匹林原料藥和阿司匹林片也采用高效液相色譜法控制雜質水楊酸，只是改變了流動相和溶劑等色譜條件，且水楊酸限度分別為0.1%和0.3%。隨著標準的提高，要求藥檢人員更加注意質量標準實踐中的細節。筆者在日常藥檢工作中，對阿咖酚散國家標準中規定的阿司匹林的降解產物水楊酸的檢查進行了實踐，現提出一些注意事項供參考交流。

1 儀器與試藥

美國Agilent -1200型高效液相色譜儀，TB-215D電子天平（德國賽多利斯公司），KQ5200E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。對照品對乙酰氨基酚（批號：100018-200408）、咖啡因（批號：171215-200608）、阿司匹林（批號：100113-200603）、水楊酸（批號：100106-200303）均購自中國藥品生物制品檢定所，含量測定用。甲醇為色譜純，去離子水為本實驗室自制，其他試劑均為分析純。阿咖酚散（批號：R1832），規格為：每盒100包，每包含阿司匹林230 mg、對乙酰氨基酚126 mg、咖啡因30 mg）由廣州白云山制藥股份有限公司白云山何濟公制藥廠提供，藥品質量標準為國家藥品監督管理局國家藥品標準：WS—10001—(HD— 0941) —2002。

2 實驗方法

2.1 色譜條件 色譜柱：Hanbon Packing Material Li chrospher 5-C18(150 mm×4.6 mm，5μm)；流動相：磷酸鹽緩沖液（取0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液，用磷酸調節pH值至2.6±0.1）-甲醇（7∶3）；檢測波長為254nm；流速為1.0ml/ml；柱溫為30 ℃。

2.2 樣品測定 照阿咖酚散藥品標準中游離水楊酸檢查項配制對照品溶液和供試品溶液。將供試品溶液配好后立即注入液相色譜儀和放置20min、1h、4h、8h后注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

3 實驗結果

見附圖、附表。

附圖 HPLC色譜圖

4 討論

3.1 檢測波長 水楊酸紫外吸收光譜掃描結果顯示，254nm為水楊酸最小紫外吸收波長[2]，顯然該波長不利于阿咖酚散中主要有關物質水楊酸的測定。因此在實際操作中，為了達到更好的測定效果，應利用二極管陣列掃描來確認在其他波長處，水楊酸的含量也符合質量標準限度。

附表 阿咖酚散不同放置時間測定的水楊酸峰面積

3.2 流動相 有文獻報道[2]，流動相中磷酸二氫鉀濃度和甲醇的比例對各組分的分離影響很大，隨著磷酸鹽濃度的增加保留時間均有提前；流動相的pH值對阿咖酚散中組分的測定也有較大影響，阿司匹林在堿性溶液中易于水解，而在酸性溶液中可以減少其降解程度，因此在調節流動相pH值時，可以適當加大磷酸用量，使流動相的pH值在2.6以下，從而減少阿咖酚散中阿司匹林的降解程度。

3.3 放置時間 實驗結果的圖譜可以看出，隨著放置時間的延長，樣品溶液中水楊酸的峰面積不斷增大，樣品放置8小時后的水楊酸峰面積是放置20min后樣品的9.7倍，可見隨放置時間延長阿司匹林水解為水楊酸的量不斷增加，因此隨著放置時間的延長可能導致雜質水楊酸含量超限，而主要成分之一的阿司匹林含量則降低甚至使阿司匹林含量低于標準要求。配制樣品時要現配現用，才能確保阿司匹林含量測定和水楊酸雜質檢查的準確性。