龍血竭緩釋滴丸的制備工藝研究

張曉燕,高 菲,馬 偉,徐 峰,張媛媛,張淑華,王建明

(1.黑龍江中醫藥大學中醫藥研究院,哈爾濱150040;2.黑龍江省雙鴨山市饒河縣人民醫院藥劑科,黑龍江饒河155700)

龍血竭緩釋滴丸是以國產血竭龍血竭制備的緩釋制劑.國產血竭名為龍血竭,為百合科植物劍葉龍血樹Dranaena cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen的含脂樹皮和木質部經提取得到的樹脂.具有活血散瘀、鎮痛止血、斂瘡生肌等功效,用于跌打損傷,瘀血作痛,外傷出血[1].現代藥理研究表明,龍血竭具有擴張冠狀動脈,降血脂,抗炎止痛,抗真菌,抗糖尿病等多種藥理作用.由于龍血竭難溶于水,口服吸收差,生物利用度低,從而影響了其療效.本研究將其制成緩釋滴丸,緩釋滴丸是將緩控釋固體分散體制成滴丸的形式,與其他緩控釋劑型相比,緩釋滴丸能夠在控制藥物釋放的同時增加藥物溶解度,以期望增加藥物吸收,穩定血藥濃度,達到長效和高效的目的.因此,我們將其制成緩釋滴丸,在提高生物利用度的同時,為其工業化生產提供參考.?

1 實驗材料與儀器

龍血竭藥材(廣西中醫學院制藥廠);龍血素B對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號:111558-2000303,供含量測定用);聚乙二醇4000、6OOO(天津市福晨化學試劑廠);波洛沙姆;硬脂酸(天津市博迪化工有限公司);簡易滴丸裝置(自制);D-800LS智能藥物溶出儀(天津大學無線電廠制造);756PC型可見紫外分光光度計.

2 滴丸的制備方法

稱取龍血竭藥材粉末和基質適量,置于一定溫度的水浴中,加熱使之熔融;將熔融液倒入自制滴丸機中,保溫15min,以一定速度滴入冷凝劑液體石蠟中;待其成型后,收集滴丸,用濾紙吸出表面的液體石蠟,置于干燥器中24 h,即得[2].

3 龍血竭緩釋滴丸處方設計與優化

初步固定滴制條件為:藥液溫度85℃,滴距5 cm,冷卻柱長80 cm,滴速20滴/min,滴口內徑0.6 mm,冷凝劑液體石蠟溫度為10～15℃,進行龍血竭緩釋滴丸的處方單因素考察和正交實驗設計.

3.1 波洛沙姆(F-188)用量影響實驗

由于龍血竭藥材難溶于水,在體內的溶解性較差,故需要加入一定量的速釋性固體分散體載體材料來促進其在體內的溶出,本實驗采用的是波洛沙姆(F-188)為載體材料,來提高藥物在體內的累計釋放百分含量[3].

固定載藥量為20%,選用聚乙二醇4000(PEG-4000)為水溶性基質,考察PEG-4000與波洛沙姆(F-188)比例為4∶1,3∶1,2∶1,1∶1時滴丸的粒徑、圓整度及崩解時限.結果表明加入波洛沙姆對滴丸的粒徑、圓整度影響并不明顯,崩解時限均為3～5min,且隨著波洛沙姆的增加,溶出性越好,在PEG-4000∶F-188為1∶1時,溶出液達到完全澄清.

3.2 硬脂酸(SA)用量影響實驗

硬脂酸、乙基纖維素、聚丙烯酸樹脂等均為緩釋載體骨架材料,考慮到盡量避免有機溶劑的使用,而以熔融法制備,故選擇與人體具有良好生物相容性的硬脂酸為緩釋材料[4].

固定載藥量為20%,PEG-4000與波洛沙姆(F-188)比例為1∶1,考察硬脂酸用量占輔料總量的10%、15%、20%、25%時對滴丸的粒徑、圓整度及溶出曲線的影響.結果表明硬脂酸的含量達25%時滴丸圓整度較差,20%以下圓整度較好.如圖1所示,硬脂酸質量分數越高藥物釋放越慢.

圖1 硬脂酸用量對滴丸溶出的影響

3.3 載藥量影響實驗

固定硬脂酸質量分數20%,PEG-4000與波洛沙姆(F-188)比例為1∶1,考察藥物占總量10%、15%、20%、25%時對滴丸的粒徑、圓整度及溶出曲線的影響.結果表明藥物的含量多少對滴丸的粒徑,圓整度影響并不明顯,載藥量為25%時,滴丸溶出較差.

3.4 正交試驗

經過大量的單因素試驗,以滴丸的粒徑、圓整度、崩解時限及溶出曲線為指標,確定了主要基質的類型、用量范圍,在此基礎上采用正交試驗進一步篩選處方.對載藥量、硬脂酸用量和波洛沙姆用量按正交設計L9(34)表試驗,以藥物溶出率達到一半所需要的時間T50及12 h內達到最大累積溶出度的時間Td為試驗指標,考察和篩選龍血竭緩釋滴丸的基本處方.將9批實驗樣品分別按2005版中國藥典溶出度測定方法測12 h的累積溶出度,并描繪出溶出曲線[4].L9(34)正交試驗設計因素和水平見表1,正交試驗測定結果見表2,溶出曲線見圖2.

表1 正交試驗因素水平表

數據處理的結果分析:以對滴丸的緩釋效果影響最大的T50及Td為指標,根據各指標的重要性,確定其權重系數依次為0.4,0.6,將兩項的最佳指標定為滿分,得到綜合評判公式:y=0.4×(100-1.47+y)+0.6×(100-11.8+y2),1.47為9個T50中最大值,11.8為9個Td中最大值.由圖2可見,9次實驗12h的累積溶出率均在95%以上,滴丸的溶出度較好.

表2 正交試驗結果表

圖2 正交試驗滴丸的溶出曲線

對不同處方試驗結果進行方差分析,比較處方因素對藥物溶出快慢的影響.結果見表3.

表3 方差分析表

由表3可見,A、B、C 3個因素對結果均有一定的影響,其中C因素,即硬脂酸的質量分數對結果存在極顯著意義.各因素對T50的影響順序為C＞B＞A,最優組合為A2B3C3,對Td的影響順序為C＞B＞A,最優組合為A3B1C3,根據單因素考察情況,波洛沙姆比例越大,藥物溶出越好,越宜被人體吸收,考慮到減少服藥量,綜合平衡后選擇最佳組合為A3B1C3,即載藥量為20%,PEG-4000/波洛沙姆=1∶1,硬脂酸用量占輔料量20%,且與正交試驗的結果相符.

3.5 滴制條件的優化

3.5.1 物料溫度對成型的影響

將藥物與基質按照最佳處方比例進行熔融,對以下不同的物料溫度80、85、90、95℃共4種方案進行比較,其余參數固定:滴速為20滴/min,滴距5 cm,以圓整度、拖尾情況為評價指標.料液80℃時下降太慢,拖尾嚴重;85℃拖尾較重;90℃少量拖尾,成型度較好;95℃時滴丸不成形.故貯料罐溫度可為90℃.

3.5.2 滴距的確定

選用不同的滴距2、3、5、6、8 cm,其余參數固定:滴速為20滴/min,藥液溫度90℃,進行考察.以圓整度、拖尾情況為評價指標.滴距2 cm時,滴丸過大,圓整度較差;滴距3 cm時最佳;滴距5 cm以上,拖尾或斷尾,故滴距可為3 cm.

3.5.3 滴速對成型的影響

選用不同的滴制速度15、20、30、40滴/min共4種方案比較,其余參數固定.以圓整度、拖尾情況為評價指標.在滴速大于30滴/min時,拖尾重,圓整度較差;滴速15或20滴/m in時,滴丸圓整度較好,且少有拖尾,考慮到效率最高,故選擇滴速為20滴/m in.

3.5.4 冷凝液溫度的考察

選用不同的冷凝溫度,0～5℃,6～10℃,11～15℃,15～20℃共4種方案比較.以圓整度、拖尾情況為評價指標.在一定范圍內冷凝液溫度越低,與物料溫差越大,滴丸落下后迅速散熱冷卻,更易成型.但溫度在0～5℃時,液體石蠟幾近凝固,滴制困難,且硬脂酸熔點較低,使物料較軟,溫度過低時,滴丸迅速冷卻成型,圓整度較差,故冷卻液溫度宜為11～15℃,高于15℃則拖尾較重.

以上滴制試驗結果最終確定龍血竭緩釋滴丸的滴制條件為:藥液溫度90℃,滴速20滴/min,滴距3 cm,冷凝液溫度11～15℃.滴制出的滴丸外表光滑,園整不拖尾.

4 討 論

選用3個不同長度的冷卻管60、80、100 cm進行試驗,冷卻管長度過短時,由于冷卻時間不夠,滴丸部分粘連,使圓整度下降,過長則不利生產設計.故冷卻管長度選用80 cm.

本處方緩釋設計是要求藥物在體內緩慢釋藥達12 h,處方篩選的依據定為藥物溶出率達到一半所需要的時間T50及12 h內達到最大累積溶出度的時間Td,經過正交試驗篩選出的 最佳處方2 h釋藥達到50%以上,10 h釋藥達80%以上,制劑服用后既可使血藥濃度快速達到治療范圍又能持續維持一段時間的藥物濃度[5-6].

[1]王錦亮,李興從,江東福,等.云南血竭的化學成分及抗真菌活性[J].云南植物研究所,1995,17(3):336-340.

[2]李津明,孫愛霞,李 鑫.寬心緩釋滴丸的制備工藝研究[J].中成藥,2008,30(6):848-852.

[3]唐春發.水飛薊素緩釋滴丸的研制及其體外釋放特性[J].中國藥師,2005,8(4):273-277.

[4]符聯昌,金描真,趙光華.龍血竭黃酮滴丸處方設計[J].廣東藥學院學報,2007,23(6):615-617.

[5]李 慧,邊寶林,孟繁蘊,等.精制芎歸緩釋滴丸的制備[J].中國中藥雜志,2005,30(10):747-749.

[6]李 濱,唐慧蓮,王 羅,等.銀翹雙解滴丸制備工藝的研究[J].哈爾濱商業大學學報:自然科學版,2010,26(1):17-18,29.