親和介質及溶液條件對蛋白質溶液中內毒素去除的影響

邢海新，黃永東，李巖，羅堅，張麗葉，馬光輝，蘇志國

1 北京化工大學生命科學與技術學院，北京 100029

2 中國科學院過程工程研究所 生化工程國家重點實驗室，北京 100190

3 中國科學院過程工程研究所 國家生化工程技術研究中心，北京 100190

生物技術與方法

親和介質及溶液條件對蛋白質溶液中內毒素去除的影響

邢海新1,2，黃永東2,3，李巖2，羅堅2，張麗葉1，馬光輝2，蘇志國2

1 北京化工大學生命科學與技術學院，北京 100029

2 中國科學院過程工程研究所 生化工程國家重點實驗室，北京 100190

3 中國科學院過程工程研究所 國家生化工程技術研究中心，北京 100190

生物制品中內毒素的去除是一項十分重要的工作。為了更好地去除各種生物制品中的內毒素，采用合成的多粘菌素B瓊脂糖親和介質，通過靜態吸附的方法去除蛋白質溶液中的內毒素。重點考察了介質的間臂長度、配基密度以及各種溶液條件 (pH值、鹽種類和濃度、蛋白質種類和濃度、內毒素濃度、添加劑等) 對內毒素去除率及蛋白質回收率的影響。分別采用動態濁度法和Lowry法檢測內毒素含量和蛋白質濃度。結果表明該介質具有載量高、去除速度快、去除率高、可重復使用的特點。此外，配基密度、pH值、鹽濃度和蛋白質特性 (等電點和疏水性) 對內毒素去除效果均有重要影響。在優化的條件下，血紅蛋白、人血清白蛋白和溶菌酶的回收率分別達到87.2%、73.4%和97.3%，相應的內毒素去除率分別達到99.8%、97.9%和99.7%。闡明了各種因素對內毒素去除率和蛋白質回收率的影響規律，為生物制品中內毒素的高效去除提供了參考。……