聶建軍,殷海善,李兆斌,王 錚
(山西省農業科學院農業資源綜合考察研究所,山西太原030006)
食用菌液體菌種是通過液體培養得到的食用菌菌種,簡單地講,是指生長在液體培養基中用于繁殖下一代的菌種或栽培菌絲體,即以菌絲體所存活培養基的存在形態來命名的[1]。
在菌絲體培養過程中,液體母種(液體培養的斜面母種)是食用菌液體培養的核心環節,菌種質量的好壞直接關系到食用菌栽培的成敗以及其產量的高低和質量的好壞。液體培養基由于培養條件與固體培養基有所不同,因此對菌種有其獨特的要求。液體培養基營養豐富,分布均勻,溫度、pH等條件適宜,細菌及其他雜菌在這樣的培養液條件下更易繁殖。通常細菌繁殖一代只需20~30 min,如果液體培養菌中進入一個細菌,繁殖15 h后,細菌數量可達到10億個[2],這樣大量雜菌會造成所需制備的液體菌種染菌酸敗。但筆者在試驗中發現,帶有微量雜菌的菌種接到固體培養基上基本不影響菌種的萌發和吃料,接入菌瓶或菌袋仍能正常生長。
本研究采用木屑濾菌法和藥物濾菌法(木屑培養基中加0.5%多菌靈),對用于液體培養的斜面母種進行純化,以期達到液體培養的要求。
供試菌種為申香6號香菇(Lentinus edodes),引自上海市農業科學院。
1.2.1 斜面母種PDA培養基 馬鈴薯200 g,葡萄糖 20 g,瓊脂 20 g,水 1 000 mL,pH 自然[3]。
1.2.2 液體培養基 玉米粉6%,麩皮2%,KH2PO40.1%,MgSO40.05%,維生素 B110 mg/L,pH 自然[4]。
1.3.1 液體母種純化 將未純化菌種、木屑濾菌法純化菌種、藥物濾菌法純化菌種、木屑濾菌法和藥物濾菌法純化(高度純化)菌種分別接入PDA斜面試管,25℃下培養12 d?!?br>