中性氧化鋁對三黃片中鹽酸小檗堿含量測定的影響

王世清

(河南省濮陽市藥品檢驗所，河南 濮陽 457000)

國家食品藥品監督管理局《藥品檢驗補充檢驗方法和檢驗項目批準件》(2007002號)中規定了三黃片每片含鹽酸小檗堿不得低于4.36 mg。然而，筆者在使用該標準過程中，曾先后用上海五四化學試劑有限公司、上海納輝干燥試劑廠、上海陸都化學試劑廠的中性氧化鋁測定同一批三黃片的含量，結果分別為2.53，4.94，3.02 mg，出現了合格與不合格兩種截然不同的結論。為了尋找三黃片中鹽酸小檗堿含量測定不準確的原因，筆者再次進行了試驗，結果理想，報道如下。

1 儀器與試藥

Waters高效液相色譜儀手動進樣器(美國);Precisa92SM202ADR型電子天平;KQ2200型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。鹽酸小檗堿對照品(批號為110713-200609，中國藥品生物制品檢定所);中性氧化鋁(批號為F20080901，國藥集團化學試劑有限公司);三黃片(批號為08010342，襄樊隆中藥業股份有限公司);乙腈(色譜純)，水(重蒸餾水)，其他試劑(分析純)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件[1]

色譜柱:Kromasil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:0.05%十二烷基硫酸鈉(含0.1%磷酸)-乙腈(52∶48);流速:0.8 mL/min;檢測波長:265 nm;柱溫:室溫;進樣量:20 μL(20 μL定量環);進樣方式:手動進樣。理論板數按鹽酸小檗堿峰計算不低于4 000。

2.2 對照品溶液制備

精密稱取105℃下干燥5 h的鹽酸小檗堿對照品(含量按98.14%計)12.38 mg，置200 mL無色量瓶中，用甲醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過，作為對照品溶液A(鹽酸小檗堿的濃度為0.060 8 mg/mL)。另精密稱取105℃下干燥5 h的鹽酸小檗堿對照品14.94 mg(相當于3片三黃片的含量)，置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸-甲醇(1∶100)溶液75 mL，稱定質量，密塞，超聲處理30 min，放冷，再稱重，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過。精密量取續濾液5 mL，置中性氧化鋁柱(5 g，100～200目，1.0 cm×15 cm，用甲醇10 mL預洗)上，以甲醇60 mL洗脫，收集洗脫液，低溫蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉移至10 mL量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過，作為對照品溶液B(鹽酸小檗堿的理論質量濃度為0.097 8 mg/mL)。

2.3 樣品中鹽酸小檗堿含量測定

取本品10片(除去糖衣)，稱定質量，研細，取約相當于1片的質量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸-甲醇(1∶100)溶液25 mL，稱定質量，密塞，超聲處理30 min，放冷，再稱重，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過。精密量取續濾液5 mL，置中性氧化鋁柱(5 g，100～200目，1.0 cm ×15 cm，用甲醇 10 mL預洗)上，以甲醇60 mL洗脫，收集洗脫液，低溫蒸干(避免快速蒸發引起的邊緣效應造成的損耗)，殘渣用甲醇溶解，轉移至10 mL量瓶中并稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液。用高效液相色譜儀測定，結果見表1和表2。

表1 三黃片中鹽酸小檗堿的含量測定

表2 以對照品溶液B為基準計算的樣品含量

3 討論

由表1可見，與標準相比，雖加大了甲醇的洗脫量(增加50%)、加粗了中性氧化鋁柱的直徑(增大50%)，卻仍不能改變測定結果。結合本批產品前幾次的測定結果，筆者認為中性氧化鋁是影響測定結果的關鍵因素。從表2可以看出，中性氧化鋁對鹽酸小檗堿的吸附作用相當嚴重(雖然此法中鹽酸小檗堿的狀態與樣品中的不同，但中性氧化鋁對鹽酸小檗堿的吸附作用可見一斑)，損耗達40%以上;以對照品溶液B為基準計算的樣品含量值與廠家投料相符。因此，選用合格的中性氧化鋁就成為本法的關鍵。同時，也提示今后遇到此類問題時應多加注意。

在檢驗過程中還發現，對照品溶液保存在棕色量瓶與保存在無色量瓶中，峰面積的重復性不同，使用無色量瓶效果較好，使用棕色量瓶則較差。初步判斷可能是由于鹽酸小檗堿存在兩種異構體，進樣及操作過程中發生了吸光轉型所致。因此，在配制對照品溶液和供試品溶液時宜用無色量瓶，且應同時配制。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社，2005:附錄ⅥD.