仙草中表兒茶素的結構鑒定

邱 挺,林曉翠,王碧玉

福州大學化學化工學院,福州 350108

仙草中表兒茶素的結構鑒定

邱 挺＊,林曉翠,王碧玉

福州大學化學化工學院,福州 350108

通過高效液相色譜從仙草乙醇萃取物中分離并制備出樣品,利用紫外光譜、質譜、紅外光譜、核磁共振方法鑒定其為表兒茶素,從而建立了從仙草中分離制備表兒茶素的方法。

仙草;表兒茶素;結構鑒定

表兒茶素 (Epicatechin)屬于兒茶素類,兒茶素類物質是一種重要的酚類物質。植物中的天然抗氧化成分除了生育醇、抗壞血酸、類胡蘿卜素、生物堿之外,酚類物質是分布最廣、種類及含量最多的成分。經研究表明,兒茶素類物質具有清除自由基、抑制腫瘤、抗誘變、抗病毒、降脂助消化、護膚美容等多種生物活性[1]。

仙草 (Hsian-tsao,M esona procum bensHemsl)屬于唇形科草本植物,在我國分布廣泛。對其抗氧化成分的研究分析已表明,仙草水萃取物的抗氧化性極佳,強于生育醇,稍優于二丁基羥基甲苯(BHT)[2]。洪千雅等[3,4]的研究結果表明,仙草提取物中的主要抗氧化組分為原兒茶酸、咖啡酸、豆甾醇、熊果酸、山奈酚、芹菜素等,其中主要為多酚類物質。而從仙草中提取分離制備得到表兒茶素還未見文獻報道。

本文通過高效液相色譜從仙草乙醇提取物中分離制備出表兒茶素,并通過紫外光譜、質譜、紅外光譜、核磁共振四個方面對其進行結構鑒定,從而建立了從仙草中分離制備表兒茶素的方法。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

仙草:購自建甌,全草 80℃干燥后經粉碎,通過35目篩網,收集于密封袋中,保存于 0～4℃備用;甲醇(色譜純);其它試劑均為分析純。

Varian高效液相色譜儀,配有 C18液相色譜柱、PS210溶劑傳輸裝置、ProStar330二極管陣列檢測器、液相收集器 PS704;氣相色譜-質譜聯用儀,GCMS2010(日本島津公司);Vector 22紅外光譜儀(Bruker);Avance AMX-400核磁共振儀 (Bruker); MF10B研磨機 (德國)。

1.2 樣品制備

取仙草粉末 10 g,以 100 mL乙醇在 60℃下萃取2 h,連續萃取三次,所得萃取液過濾后,得仙草乙醇萃取液,冷藏備用。萃取液先以分析型高效液相色譜尋找最佳分離條件,再以此條件于制備型高效液相色譜進行重復收集與分離,最終得到的樣品,在55℃下真空干燥,卸壓后氮氣保護,備用。制備的樣品 (為黃色無定形粉末)采用硫氰酸鐵化法[5]測定其抗氧化性,結果證實其具有一定的抗氧化性。

1.3 液相色譜分析條件

色譜柱為 Varian Microsorb-MV C18150 mm× 4.6μm,流動相為甲醇:水 =15%:85%,柱流速 1δ4.76(1H,d,HO-R)顯示為與 C相接的 O-H信號,歸屬于 C3-OH信號。δ4.09(H,d,H-C-Ar)顯示為樣品的 C-H信號,歸屬于 H-2信號。δ2.78(H,q,HC-O)顯示為樣品的 C-H信號,歸屬于 H-3信號。δ1.25(2H,d,H-C-R)顯示為樣品的伯基 C-H信號,歸屬于 H-4信號。

綜合上述分析結果與表兒茶素的質譜、紅外和紫外光譜等特性數據,可以確定樣品為表兒茶素(Epicatechin),分子式為 C15H14O6,結構式如圖 3中預測的結構一致。

圖5 樣品的1H NMR譜圖Fig.51H NMR spectrum of sample

3 結論

通過高效液相色譜分離并制備得到的樣品,經結構鑒定為表兒茶素,為仙草中含有表兒茶素的首次報道,并對其進行抗氧化性能測定,結果證實其具有一定的抗氧化性,為仙草乙醇提取物的抗氧化組分之一。本文的研究結果對仙草中已分離純化的酚類抗氧化成分進行了補充,為今后更全面地進行仙草抗氧化性的研究打下了基礎。

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2 Kazuki H,Shinichi K,Michio Y.Natural antioxidants and active oxygen removers in food cos metics and phar maceuticals.Chem Abstr,1996,124,200690r.

3 Hung CY,Yen GC.Antioxidant activity of phenolic compounds isolated fromM esona procum bensHemsl.J Agric Food Chem,2002,50:2993-2997.

4 Hung CY,Yen GC.Extraction and identification of antioxidative components of Hsian-taso(M esona procumbensHemsl). Lebens m-W iss u-Technol,2001,34:306-311.

5 Mitsuda H,Yasumoto K, Iwami K.Antioxidative action of indole compounds during the autoxidation of linoleic acid.Eiyo to Shokuryo,1996,19:210-214.

6 Lv HT(呂海濤),Sun HF(孫海峰),Qu BH(曲寶涵),et al.Simultaneous determination of six phenolic compounds in apple juice by high performance liquid chromatography.Chin J Anal Chem(分析化學),2007,35:1425-1429.

Identification of Epicatechin fromM esona procum bensHem sl

Q IU Ting＊,L IN Xiao-cui,WANGBi-yu
College of Chem istry and Chem ical Engineering,Fuzhou University,Fuzhou,Fujian 350108,China

Sample was separated and prepared through HPLC from the ethanol extract ofM esona procum bensHemsl,and itwas identified as epicatechin by ultraviolet spectrum,mass spectrum,infrared spectrum and NMR.The separation and preparation method for epicatechin fromM.procum bensHemslwas established.

M esona procum bensHemsl;epicatechin;identification

Q503;R284.1

A

1001-6880(2010)05-0798-03

2009-03-20 接受日期:2009-07-10

福建省科技廳重點資助項目(2007N0043)

＊通訊作者 Tel:86-591-22866234;E-mail:tingqiu@fzu.edu.cn