組胺H3受體拮抗劑對嗎啡成癮大鼠復吸行為的影響

曲 偉 ，羅 雄 ，李學英 ，陳麗紅 ，王大忠

（1.德州學院 山東 德州253000；2.遵義醫學院 貴州 遵義563000；3.湘南學院 湖南 郴州423000）

藥品毒品成癮在許多國家流行成災，危害身心健康，破壞家庭幸福，并且引發犯罪；而且吸毒人群已成為愛滋病及肝炎等傳染病的重要傳播源。成癮性物質分為麻醉藥品、精神藥品及其他（煙草和酒精等）。其中麻醉藥品又可分為阿片類（鴉片、嗎啡、海洛因等）、大麻類和可卡因類（古可卡、可卡因）等。在我國，以吸食阿片類物質最多見。實際戒毒工作中的兩個主要問題是患者在脫毒階段難以忍受的痛苦及脫毒后的高復吸率。因而，常出現以下兩種情況，一方面患者不愿堅持戒毒，另一方面患者陷入吸毒→戒毒→脫毒→再吸毒（復吸）的惡性循環中。藥物成癮機制是一個涉及多層次、多通路、多因素的復雜網絡系統。自從發現組胺H3受體與藥物成癮有關以來，國內外的研究組織投入了廣泛關注。對組胺H3受體與藥物依賴（成癮）之間的關系的初步探索研究，主要采用在動物（大鼠或小鼠）的皮下或側腦室內注射H3受體拮抗劑或激動劑方法，觀察其對動物的成癮行為的影響，發現H3受體與藥物成癮之間有著密切的關系。但是對其在復吸行為中的作用及其作用的機制，還未弄清楚。本文利用CPP法對組胺H3受體拮抗劑在嗎啡成癮大鼠復吸行為中的影響作出研究。

1 材料與方法

1.1 材料 清潔級SD雄性大鼠購自第三軍醫大學野戰外科動物實驗中心，鹽酸嗎啡購自沈陽第一制藥廠，生理鹽水購自華美生物工程有限公司，組胺H3受體拮抗劑購自Sigma公司，位置偏愛箱（黑白箱）自制，攝像頭聯想E360，電腦IBMR52-1840。

1.2 方法

1.2.1 嗎啡成癮大鼠復吸模型的建立和分組 采用嗎啡頸部皮下注射法建立嗎啡成癮大鼠復吸模型。大鼠適應性喂養1周，觀察無異常行為后開始進行實驗。隨機分成4組：組胺H3受體拮抗劑低劑量組、中劑量組、高劑量組、生理鹽水對照組。遞增法皮下注射嗎啡：每天 2次（8：00AM，5：00PM）頸部皮下注射嗎啡；第1天劑量為10mg/kg，每天增加10mg/kg，至第5天為50mg/kg。并且于每次注射嗎啡后立即將其放于白箱中（通道已關閉）訓練40min。然后，自然戒斷 48小時：每天 2次（8：00AM，5：00PM）于大鼠頸部皮下注射生理鹽水1mL后，立即將其于黑白箱（通道已開通）中訓練40min，共2d（48h）。末次注射生理鹽水后，立即放入位置偏愛箱中，觀察記錄15min內大鼠在黑/白箱中分別停留的累積時間。于戒斷后第20天，末次注射生理鹽水后，觀察記錄15min內在黑/白箱中分別停留的累積時間。

1.2.2 藥物干預 組胺H3受體拮抗劑低劑量組于自然戒斷的第21天，皮下注射組胺受體拮抗劑（5mg/kg），30min注射嗎啡，然后放入黑白箱中。觀察記錄15min內在黑/白箱中分別停留的累積時間。組胺H3受體拮抗劑中劑量組于自然戒斷的第21天，皮下注射組胺受體拮抗劑（10mg/kg），30分鐘注射嗎啡，然后放入黑白箱中。觀察記錄15min內在黑/白箱中分別停留的累積時間。組胺H3受體拮抗劑高劑量組于自然戒斷的第21天，皮下注射組胺受體拮抗劑（20mg/kg），30min注射嗎啡，然后放入黑白箱中。觀察記錄15min內在黑/白箱中分別停留的累積時間。生理鹽水對照組于自然戒斷的第21天，皮下注射生理鹽水1mL，30min注射嗎啡，然后放入黑白箱中。觀察記錄15min內在黑/白箱中分別停留的累積時間。

1.3 統計學處理 采用SPSS12.0軟件，計量資料以均數標準差（±s）表示，將處于組胺H3受體拮抗劑低、中、高劑量組與生理鹽水對照組的大鼠在白箱和黑箱中停留的時間進行配對t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同時相的組胺H3受體拮抗劑低劑量組大鼠在黑箱和白箱中的停留時間 見表1：

表1 不同時相的組胺H3受體拮抗劑低劑量組大鼠在白箱和黑箱中停留的時間（±s）

表1 不同時相的組胺H3受體拮抗劑低劑量組大鼠在白箱和黑箱中停留的時間（±s）

說明：*P＜0.01 vs黑箱時間

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根據統計結果,可以認為：①組胺H3受體拮抗劑低劑量組大鼠均無自然偏愛，（P＞0.05）；②大鼠在戒斷嗎啡48小時后，表現出明顯偏愛于白箱，(P＜0.01)，說明已對嗎啡形成依賴。③大鼠在經過15天的戒斷后，無位置偏愛表現（P＞0.05），說明已脫毒；④在注射拮抗劑（5mg/kg）后經嗎啡點燃，又表現出明顯偏愛于白箱（P＜0.01），已復吸。說明低劑量拮抗劑對大鼠復吸無明顯影響。

2.2 不同時相的組胺H3受體拮抗劑中劑量組大鼠在黑箱和白箱中的停留時間 見表2：

根據統計結果,可以認為：①組胺H3受體拮抗劑中劑量組大鼠均無自然偏愛（P＞0.05）；②大鼠在戒斷嗎啡48小時后，均表現出明顯偏愛于白箱（P＜0.01），說明已對嗎啡形成依賴；③大鼠在經過15天的戒斷后，無位置偏愛（P＞0.05），說明已脫毒；④大鼠在注射拮抗劑（10mg/kg）后經嗎啡點燃，又表現出明顯偏愛于白箱（P＜0.01），已復吸。說明中劑量拮抗劑對大鼠復吸無明顯影響。

表2 不同時相的組胺H3受體拮抗劑中劑量大鼠在黑箱和白箱中的停留時間（±s）

表2 不同時相的組胺H3受體拮抗劑中劑量大鼠在黑箱和白箱中的停留時間（±s）

說明：*P＜0.01 vs黑箱時間

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2.3 不同時相的組胺H3受體拮抗劑高劑量組大鼠在黑箱和白箱中的停留時間 見表3：

表3 不同時相的組胺H3受體拮抗劑高劑量組大鼠在白箱和黑箱中停留的時間（±s）

表3 不同時相的組胺H3受體拮抗劑高劑量組大鼠在白箱和黑箱中停留的時間（±s）

說明：*P＜0.01，vs黑箱時間

?

根據統計結果,可以認為:①組胺H3受體拮抗劑高劑量組大鼠均無自然偏愛（P＞0.05）；②大鼠在戒斷嗎啡48小時后，均表現出明顯偏愛于白箱（P＜0.01），說明其已對嗎啡形成依賴；③大鼠在經過15天的戒斷后，無位置偏愛表現（P＞0.05），說明已脫毒；④大鼠在注射拮抗劑（20mg/kg）后經嗎啡點燃后，無明顯偏愛表現（P＞0.05），說明高劑量的拮抗劑影響大鼠的復吸。

2.4 不同時相的生理鹽水對照組大鼠在黑箱和白箱中的停留時間 見表4：

表4 不同時相生理鹽水組大鼠的黑箱和白箱時間（±s）

表4 不同時相生理鹽水組大鼠的黑箱和白箱時間（±s）

說明：*P＜0.01 vs黑箱時間

?

根據統計結果,可以認為：①生理鹽水對照組大鼠均無自然偏愛（P＞0.05）；②大鼠在戒斷嗎啡48小時后，均表現出明顯偏愛于白箱（P＜0.01），說明已對嗎啡形成依賴；③大鼠在經過15天的自然戒斷后，無位置偏愛表現（P＞0.05），說明其已脫毒；④大鼠在注射生理鹽水后經嗎啡點燃后，又表現出明顯偏愛于白箱（P＜0.01），說明其已復吸。

3 討論

目前，評價大鼠藥物依賴的實驗模型，主要有：身體依賴評價模型和精神依賴評價模型，后者又分為：大鼠條件性位置偏愛實驗模型、大鼠自身給藥實驗模型和大鼠藥物辨別實驗模型。

本實驗采用大鼠條件性位置偏愛實驗模型，但該實驗模型的實施，受多種因素的影響。如：①環境因素，包括噪音、燈光、特殊氣味等，②動物的種屬、生理狀態等。因而，采用該模型時，必須保持實驗條件的一致性[1]。實驗動物為購自第三軍醫大學野戰外科動物實驗中心的清潔級雄性SD大鼠，實驗開始時每組準備了12只大鼠，共60只，體重150~200mg/只，環境溫度相對穩定，自然光照與通風，自由飲水、進食等條件下喂養。實驗過程中，出現死亡和生理狀況異常的大鼠均予剔除，不進入統計范疇。實驗時大鼠都置于無明顯噪音，光線柔和穩定，無特殊氣味的黑/白箱中，因而認為，所得實驗結果可靠。結合統計分析結果可以認為：各時相模型建立成功。

組胺H3受體主要分布于腦組織。在前額葉皮質、伏核、海馬、紋狀體等處組胺H3受體都有分布[2]。組胺H3受體是一種膜受體，通過G蛋白作用于Ca2+通道，減少Ca2+內流，并負性調節AC的活性，降低細胞內cAMP水平，抑制神經遞質的合成與釋放[3~5]。組胺H3受體可位于突觸前，也可位于突觸后。它既是一種自身受體，位于組胺能神經元末梢，抑制組胺的合成與釋放；又是一種異源性受體，位于其他神經元上，抑制包括乙酰膽堿（Ach）、5-羥色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、γ-氨基丁酸（GABA）及谷氨酸（Glu）等在內的多種神經遞質的合成與釋放[6]。

國外一些科學家發現組胺H3受體激動劑可以增強酒精依賴大鼠對酒精的偏愛，而拮抗劑可以減弱酒精依賴大鼠對酒精的偏愛[7]；Steven R Goldberg等[8]發現組胺H3受體拮抗劑增加MAP誘導的伏核的DA的釋放；Carmen P,Cano MV等[9]報道大劑量組胺H3受體拮抗劑THIO減弱大鼠對嗎啡的偏愛，與本實驗結果相似。

本實驗通過CPP法發現高劑量的組胺H3受體拮抗劑（20mg/kg）在嗎啡成癮大鼠復吸時減弱了大鼠對伴藥箱（白箱）的偏愛。

目前藥物成癮的生物學機制尚未闡明，成癮者的臨床療效不佳，復吸率一直居高不下，嚴重阻礙成癮者回歸社會,走向正常生活。如能對藥物戒斷后的厭惡以及相應的負性強化過程的生物學機制進行深入的研究，必將進一步豐富藥物成癮的理論。

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