羅布麻葉膠囊質(zhì)量標準的研究

石 江，何 勇

（遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院，貴州 遵義563003）

羅布麻葉膠囊是由羅布麻葉原藥粉及其浸膏組成的。功能主治：降壓，用于高血壓，頭暈，心悸。原質(zhì)量控制方法采用分光光度法測定其槲皮素的含量，質(zhì)控方法簡單，本試驗采用高效液相色譜法(HPLC)測定方中主藥羅布麻葉中槲皮素的含量，擬作為其新的質(zhì)控方法。

1 儀器與試藥

日本島津LC-10Avp高效液相色譜儀，島津天平。槲皮素標準品（中國藥品生物制品檢定所，批號：10081-9905）；甲醇為色譜純；鹽酸為分析純；磷酸為分析純；水為二次重蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜柱條件 色譜柱：C18；流動相：甲醇-0.4%磷酸溶液（50:50）；流速：1.0mL/min；檢測波長：360nm；柱溫：30℃；理論塔板數(shù)不低于 4000；進樣量：對照品和供試品均為10μL[1]。

2.2 溶液的制備 對照品溶液的制備：精密稱取槲皮素對照品14.80mg，置10mL容量瓶中，加80%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得每1mL含1.48mg的對照品儲備液溶液。供試品溶液的制備：取本品0.3g，精密稱定，制劑經(jīng)80%甲醇50mL加熱回流提取1h后，放冷，用80%甲醇補足減失的重量，取續(xù)濾液10mL加鹽酸1mL回流60min，立即冷卻，移至25mL的量瓶中，用80%甲醇定容，得供試液，如此處理后，HPLC測定雜質(zhì)無干擾，回收率好。陰性對照液的制備：取缺羅布麻葉藥材的陰性制劑，按供試品制備方法制備陰性對照樣液。

2.3 線性關(guān)系考察 分別精密吸取對照品儲備液，用80%甲醇稀釋，搖勻，配制得每1mL含槲皮素7.4、14.8、29.6、35.52、59.2ug 的系列對照品溶液。分別精密吸取上述系列對照品溶液10μL，注入液相色譜儀，記錄色譜，以峰面積Y和進樣量X（μg）進行線性回歸計算，得線性回歸方程：Y=28474X-60563，R=0.9995，擬合為過坐標原點的直線方程為Y=26974X。將每1mL含槲皮素29.6ug的對照品溶液進樣所得的峰面積分別代入上兩式方程計算，結(jié)果的相對偏差為2.05%，由此可視截距近似為零，故正文采用外標一點法計算含量。線性范圍:7.4～59.2μg。2.4 系統(tǒng)適用性試驗 分別取上述對照品溶液、供試品溶液及陰性對照液10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，見圖1。從圖1中可見，槲皮素的保留時間(Rt)約為10.1分鐘，本試驗條件下槲皮素與其他組分分離完全,陰性對照無干擾。

圖1 羅布麻葉膠囊高效液相圖譜

2.5 精密度試驗 取一供試品，按制劑質(zhì)量標準中供試液的制備方法制備供試液，重復進樣5次，測定峰面積，平均峰面積為818159.8，RSD=1.74%。

2.6 重復性試驗 取同一批號（20070305）供試品，按制劑質(zhì)量標準草案中供試液的制備方法制備5份供試液，分別進樣，測定峰面積，計算結(jié)果列入表，平均含量1.456%，RSD=1.49%。

2.7 穩(wěn)定性試驗 取了一供試品，按制劑質(zhì)量標準中供試液的制備方法制備供試液，按規(guī)定的時間測定，結(jié)果表明供試品溶液中槲皮素在30h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 回收率試驗 稱取已測定含量的制劑（平均含量1.37%）9份，精密加入槲皮素對照品適量，按制劑質(zhì)量標準制備9份供試液，分別進樣，測定峰面積，計算結(jié)果列入表1，槲皮素的平均回收率為98.2%，RSD=2.9%。

表1 制劑供試品中槲皮素的回收率試驗

3 討論

本制劑羅布麻葉藥材是以其原藥粉和其浸膏兩種形式存在，根據(jù)槲皮素易溶解于甲醇的性質(zhì)，試驗采用了80%甲醇為溶劑，并比較了超聲處理和回流提取對制劑中槲皮素含量的影響，結(jié)果表明回流提取的效果高于超聲提取的效果，因此，本試驗采用了回流提取。

結(jié)果表明，本方法穩(wěn)定、可靠、靈敏度高、重復性好，操作簡便易行，可用于羅布麻葉膠囊質(zhì)量的控制。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［S］.北京：化學工業(yè)出版社，2005.147.