山醫(yī)群體近交系中國地鼠血液生理生化指標的測定分析

陳朝陽，張銳虎，景志杰，龐文彪，王志平，劉田福

(山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，太原 030001)

研究報告

山醫(yī)群體近交系中國地鼠血液生理生化指標的測定分析

陳朝陽，張銳虎，景志杰，龐文彪，王志平，劉田福

(山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，太原 030001)

目的對山醫(yī)群體中國地鼠近交A、E家系主要血液生理、生化和血清電解質(zhì)指標進行檢測分析。方法對山醫(yī)群體中國地鼠近交A、E家系成年動物進行空腹采血，常規(guī)方法測定13項血液生理、12項生化以及4項電解質(zhì)指標，分別對相同性別不同家系間和同一家系不同性別間指標進行統(tǒng)計分析。結(jié)果相同性別A、E家系間動物血小板(PLT)、中間細胞數(shù)(M ID)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總膽固醇(TC)、總膽紅素(TBiL)、肌酐(Cr)和血鉀(K)差異有顯著性;相同家系雌、雄動物間PLT、TBiL和尿酸(UA)差異有顯著性。結(jié)論A、E家系動物間產(chǎn)生了一定的血液生理、生化性狀的分離。

中國地鼠;生理指標;生化指標

中國地鼠(Chinese hamster)是黑線倉鼠(Cricetulus barabensis Pallas)的俗稱。1980年春山西醫(yī)科大學(xué)薄家璐教授等從北京郊區(qū)購回捕獲的60只野生中國地鼠，進行近交培育，稱為A家系;1981年4月又從北京購回74只中國地鼠進行近交培育，稱為E家系。近交繁育至20代已建成近交系，定名為SYBI，并于1992年公布于Bred Strain of Mice雜志［1］。陳朝陽等［2］曾對該群體動物的生長曲線、臟器系數(shù)及部分生理學(xué)指標等生物學(xué)性狀進行報道。

到目前為止，A、E家系分別繁殖至47代和38代，隨著的近交代數(shù)的升高，可能會出現(xiàn)一些生物學(xué)性狀的分離。對其基礎(chǔ)生物學(xué)性狀的研究，對該品系動物的標準化和科學(xué)應(yīng)用具有重要意義。本文對近交系中國地A、E家系血液生理、生化指標進行了測定和比較分析。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

38周齡普通級山醫(yī)群體近交中國地鼠A家系F47代，山西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供【SCXK(晉)2009－001】，70只，雌雄各半;E家系F38代70只，雌性34只、雄性36只。飼料成份符合國家標準(GB14924.6－2001)《實驗動物地鼠配合飼料》的要求。

1.2 血樣采集

動物禁食12 h后，眼眶靜脈叢采血2.5 mL。其中EDTA抗凝血1 m L，顛倒混勻，用于血常規(guī)檢查;非抗凝血1.5 m L，2000 r/min離心20 min取血清，用于生化指標的測定。

1.3 測定指標

1.3.1 血液生理指標:測定紅細胞(RBC)、紅細胞壓積(HCT)、平均紅細胞壓積(MCV)、血紅蛋白(Hb)、平均紅細胞含量(MCH)、平均紅細胞濃度(MCHC)、血小板(PLT)、白細胞(WBC)、淋巴細胞數(shù)(LY)、中間細胞數(shù)(MID)、中性粒細胞數(shù)(GR)單核細胞(Mon)、嗜酸細胞(E)等13項指標。

1.3.2 血液生化指標:測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總膽紅素(TBiL)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、Glu(葡萄糖)、高密度脂蛋白(HDL)、尿素氮(UN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、堿性磷酸酶(AKP)等12項指標。

1.3.3 血清電解質(zhì)指標:測定了血清內(nèi)鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、鈣(Ca)等4項指標。

1.4 檢測方法

采用Sysmex公司生產(chǎn)的自動血液分析儀(Sysmex XT.2000iV)，測定各項血液生理指標;采用日本日立公司生產(chǎn)的全自動生化儀(automatic biochemical analyzer，Hitachi 7020)，常規(guī)操作測定各類血液生化和血清電解質(zhì)指標。生化試劑盒購自美國Sysmex公司。

1.5 統(tǒng)計方法

2 結(jié)果

2.1 血液生理指標比較

山醫(yī)群體中國地鼠近交A、E家系動物血液生化指標測定結(jié)果及比較見表1。同一性別A、E家系動物間PLT和MID差異有顯著性;而同一家系不同性別間僅PLT差異存在顯著性。其他指標間差異沒有顯著性。

表1 山醫(yī)群體近交系中國地鼠血液生理指標(±s)Tab.1 Blood physiological indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)

表1 山醫(yī)群體近交系中國地鼠血液生理指標(±s)Tab.1 Blood physiological indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)

*P＜0.05，相同家系雌、雄動物間比較;△P＜0.05，相同性別A、E家系間動物比較Note:*P＜0.05，comparison between females and males of the same family;△P＜0.05，comparison between families A and E of the same sex

測定項目A家系(A family) Measurement E家系(E family)♀(n=35)♂(n=35)♀(n=33)♂(n=36) RBC(1012/L)8.438±0.965 8.318±1.239 8.718±0.958 8.505±1.192 HCT(%)38.283±5.082 37.280±5.686 39.703±3.835 38.576±5.669 MCV(fL)45.143±1.478 44.943±1.697 45.639±1.915 45.143±2.158 Hb(g/L)160.743±15.760 157.743±18.318 164.194±16.787 159.235±19.134 MCH(fg)18.600±1.265 18.686±2.349 18.278±1.344 18.371±1.573 MCHC(g/L)417.735±22.186 415.806±88.872 414.306±29.079 417.059±40.099 PLT(109/L)607.257±124.965 658.471±144.379*650.083±171.436△741.182±146.444△*WBC(109/L)3.014±1.755 3.363±1.991 3.719±2.218 3.529±2.236 LY(109/L)2.409±1.264 2.426±1.290 2.772±1.600 2.643±1.469 MID(109/L)0.214±0.237 0.349±0.387 0.358±0.371△0.460±0.465△GR(109/L)0.391±0.350 0.583±0.577 0.536±0.469 0.686±0.577 Mon(109/L)0.034±0.020 0.039±0.024 0.039±0.023 0.041±0.019 E(109/L)0.015±0.010 0.012±0.004 0.013±0.004 0.014±0.008

2.2 血液生化指標比較

山醫(yī)群體中國地鼠近交A、E家系生化指標測定結(jié)果見表2。相同性別不同家系間差異均有顯著性的有ALT、TC、TBiL和Cr四項指標;E家系雌性動物Glu高于A家系雌性動物，差異具有顯著性。同一家系不同性別間差異有顯著性的有TBiL和UA兩項指標。

2.3 血清電解質(zhì)指標

血清電解質(zhì)指標測定結(jié)果見表3。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理發(fā)現(xiàn)，除血清K之外，其他3項指標的測定值在不同家系之間和不同性別動物之間差異均無顯著性。A家系的雌、雄動物血清K分別低于E家系，差異具有顯著性。

表2 山醫(yī)群體近交系中國地鼠血液生化指標(±s)Tab.2 Measurement of biochemical indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)

表2 山醫(yī)群體近交系中國地鼠血液生化指標(±s)Tab.2 Measurement of biochemical indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)

*P＜0.05，相同家系雌、雄動物間比較;△P＜0.05，相同性別A、E家系間動物比較Note:*P＜0.05，comparison between females and males of the same family;△P＜0.05，comparison between families A and E of the same sex

測定項目A家系(A family) Measurement E家系(E family)♀(n=31)♂(n=32)♀(n=34)♂(n=32) ALT(U/L)105.931±44.821 92.600±41.249 81.771±20.405△74.156±19.266△TBiL(umol/L)2.204±0.985 1.464±0.618*2.776±1.911△1.922±0.974*△TPr(g/L)72.613±10.512 75.129±11.260 66.303±7.256 70.656±10.820 ALB(g/L)34.933±5.212 37.567±6.574 35.559±6.698 38.500±5.582 TC(mmol/L)3.936±0.961 3.946±0.897 4.518±0.887△4.448±0.750△TG(mmol/L)1.550±1.378 1.788±1.205 1.226±0.637 1.243±0.696 Glu(mmol/L)3.452±1.201 3.597±0.962 4.219±1.201△3.672±1.051 HDL(mmol/L)2.370±0.599 2.254±0.618 2.688±0.671 2.848±0.585 UN(mmol/L)13.227±4.958 12.77±13.803 14.96±14.910 13.568±2.593 Cr(umol/L)58.484±15.556 60.800±17.553 48.853±17.790△51.531±15.110△UA(umol/L)172.613±103.519 117.000±90.088*150.182±75.383 111.250±57.332*AKP(U/L)128.807±27.216 140.966±38.440 126.000±26.492 132.656±23.720

表3 山醫(yī)群體近交系中國地鼠電解質(zhì)指標(±s)Tab.3 Measurement of electrolyte indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)

表3 山醫(yī)群體近交系中國地鼠電解質(zhì)指標(±s)Tab.3 Measurement of electrolyte indexes in the Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster(±s)

△P＜0.05，相同性別A、E家系間比較Note:△P＜0.05，comparison between families A and E of the same sex

測定項目A家系(A family) Measurement E家系(E family)♀(n=31)♂(n=31)♀(n=34)♂(n=31) K(mmol/L)5.818±0.747 5.813±0.909 6.580±0.905△6.232±0.659△Na(mmol/L)156.258±6.706 156.139±6.566 153.079±7.661 154.697±6.950 Cl(mmol/L)110.684±7.957 108.307±3.475 110.735±5.606 109.229±4.609 Ca(mmol/L)2.332±0.221 2.410±0.286 2.383±0.308 2.397±0.309

3 討論

本實驗采集樣本數(shù)為山醫(yī)群體中國地鼠A、E家系動物各70只，因個別樣品溶血等原因，測定結(jié)果兩家系樣本數(shù)均不足70例。所測指標中，血液生理指標PLT和MID，生化和電解質(zhì)指標ALT、TC、TBiL、Cr和血K等在相同性別兩個家系間差異存在顯著性。而同一家系不同性別間存在顯著差異的指標僅有PLT、TBiL和UA三項。可見有些指標與性別之間有一定的相關(guān)性，而更多項指標的差異存在于不同家系之間。從測定結(jié)果分析，提示兩個家系已出現(xiàn)一定程度的生物學(xué)性狀分離，這與對近交系山醫(yī)群體中國地鼠A、E家系的遺傳分析的結(jié)果相一致［3］。

中國地鼠近交繁殖有自發(fā)性高血糖或糖尿病傾向［4，5］。從所測本群體動物血糖指標來看，E家系雌性動物血糖要高于A家系雌性動物，而E家系雌雄動物間血糖值差異無顯著性。A家系近交代數(shù)高于E家系，但血糖濃度并不高于E家系，可見血糖高低與近交代數(shù)并無直接關(guān)系，可能與近交過程中與動物基因遺傳漂變有關(guān)。因此，利用近交系中國地鼠培育自發(fā)性高血糖動物的過程，應(yīng)不斷地監(jiān)測動物血糖值選擇較為穩(wěn)定的高血糖動物進行近交培育。

本文僅對成年動物的部分血液生理生化指標進行了測定，這主要是由于山醫(yī)群體近交系動物繁殖與飼養(yǎng)比較困難。兼顧群體數(shù)量與樣本數(shù)量，因此選擇測定了成年動物。今后，將進一步對不同周齡動物的主要生物學(xué)指標進一步研究和比較分析，為本品系動物的開發(fā)和實驗提供更為完善的基礎(chǔ)生物學(xué)數(shù)據(jù)。

［1］劉田福.中國地鼠山醫(yī)群體近交系的培育［J］.實驗動物科學(xué)與管理，2003，20(增刊):22－24.

［2］陳朝陽，張瑞虎，景志杰，等.山醫(yī)群體近交系中國地鼠主要生物學(xué)指標的建立［J］.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2009，40 (5):388－390.

［3］宋國華，劉田福，趙嘉慧，等.近交系中國地鼠山醫(yī)群體遺傳結(jié)構(gòu)的隨機擴增多態(tài)分析［J］.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2005，36(3):270－274.

［4］Gerritsen GC.The Chinese hamster as a model for the study of diabetes mellitus［J］.Diabetes，1982，31(2):14－23.

［5］孫淑華，劉德惠，田金菊，等.自發(fā)NIDDM中國地鼠血液電解質(zhì)及血脂的變化研究［J］.中國實驗動物學(xué)雜志，1999，9 (4):222－224.

Determ ination and Analysis of Blood Physiological and Biochem ical Indexes in Shanyi Colony Inbred Strain of Chinese Ham ster

CHEN Zhao－yang，ZHANG Rui－h(huán)u，JING Zhi－jie，PANG Wen－biao，WANG zhi－ping，LIU Tian－fu
(Laboratory Animal Center of Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China)

Objective To determine and analyze the blood physiological and biochemical indexes in Shanyi colony inbred strain of Chinese hamster.M ethods Thirteen blood physiological，twelve biochemical and four electrolyte indexes in Shanyi colony of Chinese hamster inbred strain families A and E were measured by conventional methods.The differences between both sexes in the same family were analyzed as well as both families of the same sex.ResultsIn the same sex there were significant differences in PLT，MID，ALT，TC，TBiL，Cr and K between families A and E，and PLT，TBiL and UA showed significant difference between both sexes in the same family.ConlusionThere were blood physiological and biochemical characteristics segregation between Shanyi colony Chinese hamster inbred strain families A and E.

Chinese hamster;Colony inbred strain;Physiological indexes;Biochemical indexes

R－332

A

1005－4847(2010)03－00262－03

2010－03－12

山西省自然科學(xué)基金資助(編號:20051087);山西省實驗動物專項基金項目(編號:2005K02)。

陳朝陽(1972－)，男，高級實驗師。主要研究方向:實驗動物學(xué)。

劉田福(1954－)，男，教授，碩士生導(dǎo)師。主要研究方向:實驗動物學(xué)。E－mail:ykdltf@yahoo.com.cn