RP-HPLC測定鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質的含量

厲鳳英，朱鵬，史向紅，余珍艷，王鴻

（1.浙江普洛家園藥業有限公司，浙江東陽322118；2.浙江工業大學藥學院，浙江杭州310014）

RP-HPLC測定鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質的含量

厲鳳英1,2，朱鵬1，史向紅1，余珍艷1，王鴻2

（1.浙江普洛家園藥業有限公司，浙江東陽322118；2.浙江工業大學藥學院，浙江杭州310014）

建立了一個測定抗抑郁藥鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質的高效液相色譜方法，該方法準確、靈敏、精密度高，可用于抗抑郁藥鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質的含量測定。關鍵詞：反相高效液相色譜法；鹽酸安非他酮；間氯苯甲酸；含量測定

鹽酸安非他酮（Bupropion Hydrochloride）是一種新型的抗抑郁藥[1，2]，生產中間氯苯甲酸會被帶到產品中，鹽酸安非他酮降解也會產生間氯苯甲酸。美國藥典（USP）中用TLC方法來控制間氯苯甲酸雜質[3]，而采用高效液相色譜法檢測間氯苯甲酸雜質還未見報道。為了更好的控制該雜質來評價鹽酸安非他酮的產品質量，本文建立了鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質含量測定的液相方法，該方法滿足ICH[4]中關于分析方法驗證的要求。

1 實驗部分

1.1 儀器與試藥

Agilent1100（四元泵、柱溫箱、脫氣機、自動進樣器、紫外檢測器）。

乙腈（GC）；三氟乙酸（GC）；超純水；間氯苯甲酸對照品（默克公司，批號為S）；鹽酸安非他酮對照品（美國藥典（USP）標化的對照品，批號為W）；鹽酸安非他酮樣品（批號：1、2、3）。

1.2 實驗方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAXSB-C18（4.6×250mm，5μm）（安捷倫公司）；流動相：水-乙腈-三氟乙酸（65∶35∶0.1）；檢測波長：235nm；流速：1.0mL· min-1；柱溫：25℃；進樣量：20μL；運行時間：30min。

1.2.2 溶液配制

1.2.2.1 系統適應性溶液精密稱取50mg鹽酸安非他酮工作對照品于50mL容量瓶中，用適量流動相溶解后，加0.50mL的400μg·mL-1間氯苯甲酸儲備液，并用流動相稀釋至刻度，搖勻。

1.2.2.2 間氯苯甲酸對照溶液配制4μg·mL-1的間氯苯甲酸對照液，此溶液為間氯苯甲酸的100%溶液。

1.2.2.3 供試液精密稱取20mg鹽酸安非他酮樣品于10mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。

2 結果與分析

2.1 系統適應性實驗

照“1.2.1”項下的色譜條件注入高效液相色譜儀一次，其具體數據見表1。

表1 系統適應性數據Tab.1Data of system suitability

由表1可知，結果表明符合鹽酸安非他酮與間氯苯甲酸分離度應不小于10，間氯苯甲酸相對保留時間約為2.05的要求。

2.2 精密度

取“1.2.2.2”項下的間氯苯甲酸對照溶液注入高效液相色譜儀，連續測定6次，計算主峰峰面積的RSD應不大于2%。測得的數據見表2。結果表明符合要求。

表2 精密度數據Tab.2Data of RSD

2.3 定量限（LOQ）和檢測限（LOD）

將間氯苯甲酸逐步稀釋成一定濃度，直至S/ N=10，連續進6針，記下該濃度，計算定量限（LOQ），再換算檢測限（LOD），得到的數據見表3。

表3 定量限和檢測限數據Tab.3Data of LOQ and LOD

表3結果表明，該方法的定量限為1.60ng；檢測限0.48ng。

2.4 線性實驗

分別精密稱取間氯苯甲酸適量，用流動相配制成LOQ、25%、50%、100%、200%的溶液，各進3針，其相關數據見表4。結果表明，間氯苯甲酸在LOQ～200%的范圍內，相關系數R為1.000，有良好的線性。

表4 線性實驗數據Tab.4Data of linear experiment

2.5 準確度

分別精密稱取間氯苯甲酸適量，用流動相配制成50%、100%、200%的溶液，分別進樣3針，分別計算回收率，得到的數據見表5。

表5 回收率實驗數據Tab.5Data of recovery experiment

表5結果表明，符合回收率應在98%～102%之間的要求。

3 結論

取“1.2.2.3”項下3個批次的鹽酸安非它酮樣品的供試液，照“1.2.1”項下的色譜條件得到的檢測結果與TLC方法的檢測結果進行對比，其數據見表7。

表7 三批樣品的含量Tab.7The assay of three lots of samples

表7結果表明，RP-HPLC方法較TLC方法更靈敏。并且分析方法的確認結果表明該方法能夠有效的進行鹽酸安非它酮中間氯苯甲酸雜質的檢測。

參考文獻

［1］Settle EC Jr.Bupropion sustained release:side effect profile［J］.J. Clin.Psychiatry，1998，59（l4）:32-36.

［2］Goldstein MG.Bupropion sustained release and smoking cessation［J］.J.Clin.Psychiatry，1998，59（l4）:66-72.

［3］美國藥典［S］.2005年版，2005.1721.

［4］ICH三方協調指南匯編，（第一版）［M］.2000.76.

Determination of m-chlorobenzoic acid in bupropion hydrochloride by RP-HPLC

LI Feng-ying1，2，ZHU Peng1，SHI Xiang-hong1，YU Zhen-yan1，WANG Hong2
（1.Apela Jiayuan Pharmaceutical Co.,Doyang 322118,China; 2.College of Pharmaly,Zhejiang University of Techology,Hangzhou 310014,China）

A RP-HPLC method for the determination of m-chlorobenzoic acid in the antidepressant of bupropion hydrochloride was estab lised.The method was proved to be accurate,sensitive and precise.It can be applied for the content assay of m-chlorobenzoic acid in the bupropion hydrochloride.

RP-HPLC；bupropion hydrochloride;m-chlorobenzoic acid；assay

book=2010,ebook=231

1002-1124（2010）11-0027-03

2010-09-26

厲鳳英（1969-）女，浙江東陽人，浙江普洛家園藥業有限公司質量經理，工程師，浙江工業大學在讀工程碩士，研究方向：藥物分析。

O657.7

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