南五味子不同生長期鞣質含量的測定

湘潭職業技術學院李君李俊雅吳梅青

南五味子不同生長期鞣質含量的測定

湘潭職業技術學院李君李俊雅吳梅青

南五味子來源于木蘭科植物科植物華中五味子Schisandra sphenantheraRehd.etWils.的干燥成熟果實。本品能益氣生津、斂肺滋腎、止瀉、澀精、安神，可治療久咳虛喘、津少口干、久瀉、健忘失眠等癥，是中醫臨床常用的名貴傳統藥物之一。本文以南五味子中鞣質含量變化為依據，用紫外-可見分光光度法結合干酪素法測定不同生長期南五味子中鞣質的含量。

一、儀器與試藥

Aglient8455型紫外-可見分光光度計，HS6150D超聲提取儀（昆山市超聲儀器有限公司），電子天平（BS224S，北京賽多利斯儀器系統有限公司）。南五味子樣品由貴州GAP基地提供，經河南中醫學院生藥教研室陳隨清教授鑒定為木蘭科植物華中五味子的果實。沒食子酸對照品（中國藥品生物制品檢定所），干酪素（北京雙旋微生物培養基制品廠），無水碳酸鈉。

二、方法與結果（本實驗應避光操作）

1.對照品溶液的制備。精密稱取沒食子酸對照品50mg，置100ml棕色容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每ml含沒食子酸0.05mg）。

2.標準曲線的制備。精密量取對照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分別置25ml棕色瓶中，各加入磷鉬鎢酸試液1ml，再分別加入11.5ml、11ml、10ml、9ml、8ml、7ml，用29%碳酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘以相應的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法在760nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

y=69.9041X-0.0057，r=0.9994。

3.供試品溶液的制備。取南五味子粉末約2g，精密稱定，置250ml棕色量瓶中，加水150ml，放置過夜，超聲處理10分鐘，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，靜置（使固體物沉淀），濾過，棄去初濾液50ml，精密量取續濾液20ml，置100ml棕色量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。

4.測定法：總酚。精密量取供試品溶液2ml，置25ml棕色瓶容量中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加入磷鉬鎢酸試液1ml”起，加水10ml，依次測定吸光度，從標準曲線中讀出供試品溶液中沒食子酸的量（mg），計算，即得。

不被吸附的多酚。精密量取供試品溶液25ml，加至已盛有干酪素0.6g的100ml具塞錐形瓶中，密塞，置30℃水浴中保溫1小時，時時振搖，取出，放冷，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液2ml，置25ml棕色量瓶中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加入磷鉬鎢酸試液1ml”起，加水10ml，依次測定吸光度，從標準曲線中讀出供試品溶液中沒食子酸的量（mg），計算，即得。按下式計算鞣質的含量：

鞣質含量=總酚量-不被吸附的多酚量。

5.精密度試驗。精密量取沒食子酸對照品溶液2.0ml，置25ml棕色瓶容量中，加入磷鉬鎢酸試液1ml，加水10ml，用29%碳酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，放置30分鐘以相應的試劑為空白，照紫外-可見分光光度法在760nm的波長處測定吸光度，連續測定5次，測得RSD值為0.29%，表明樣品的精密度良好。

6.穩定性試驗。精密量取沒食子酸對照品溶液2.0ml，置25ml棕色瓶容量中，加入磷鉬鎢酸試液1ml，加水10ml，用29%碳酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，分別在5min，10min，15min，30min，45min，60min放置時間點，測定其吸光度，測得RSD值為1.28%，表明樣品的穩定性良好。

7.重復性試驗。取南五味子粉末約2g，精密稱定，按2.3項下方法制備樣品液，用第4節方法進行分析，測定樣品中鞣質的含量，測得RSD值為0.64%，表明樣品的重復性良好。

8.加樣回收率試驗。取南五味子粉末約2g，精密稱定，按第3節方法制備樣品液，加入一定量的沒食子酸對照品，進行紫外-可見分析，計算加樣回收率，測得RSD值為1.36%，表明樣品的加樣回收率良好。

三、測定結果

以紫外-可見分光光度法結合干酪素法分別測定生長期為9月15日，9月25日，10月5日，10月15日，10月25日，11月5日的南五味子樣品。結果見表1。

表1 貴州GAP基地南五味子不同生長鞣質的含量

四、討論

1.以紫外-可見分光光度法結合干酪素法測定不同生長期南五味子鞣質含量的變化趨勢是相同的，在青果時鞣質的含量最高，隨著南五味子果實的成熟，鞣質含量的含量逐漸降低。

2.紫外-可見分光光度法結合干酪素法測定南五味子中鞣質的含量與2000版《中華人民共和國藥典》中皮粉法相比，具有樣品取樣量少，快速，靈敏等特點。但影響其準確性的主要因素是干酪素中微量雜質的含量