郭光輝,束振華
(深圳市龍崗中心醫院檢驗科,廣東 深圳 518116)
血漿凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)、纖維蛋白原(FIB)簡稱凝血四項,是臨床常用的出血與血栓疾病篩檢試驗,常用于患者手術前準備、抗凝藥物治療監測、出血性或血栓性疾病的初步診斷等,是一項非常重要的實驗指標。但許多分析前因素如標本的采集、抗凝劑比例、標本放置的時間等影響測定的準確性與可靠性,本文分析了這些影響因素與測定結果的關系,以利于我們更好控制這些因素,使得我們的實驗數據更準確與可靠。
1.1 標本采集 使用真空靜脈抽血管,抗凝劑為109 mmol/L枸櫞酸鈉0.3 ml,抽取靜脈血2.7 ml,抗凝劑與血的比例應為1:9。
1.2 標本來源 收集我院2010年3月至2010年6月不合格標本488例,其中采血量不足標本(采血量<2.4 ml視為采血量不足)223例,采血量過多標本(采血量>3.0 ml視為采血量過多)160例,溶血標本105例,所有不合格標本重抽血,標本合格后,再測定。其中采集即送檢合格標本35例立即測定和室溫放置 2 h 、4 h、8 h與4℃放置2 h、4 h、8 h再測定。
1.3 儀器及實驗方法 應用法國STAGO-R血凝儀,試劑均采用法國STAGO原裝試劑,PT測定組織活酶ISI值為1.41,檢測項目為凝血酶原時間(PT)、凝血酶時間(TT)、活化部分凝血酶時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)。
2.1 采血量不足對檢測結果的影響 見表1。采血量不足使PT、APTT和TT結果升高,FIB結果降低。
表1 采血量不足對檢測結果的影響(n=223)(±s)

表1 采血量不足對檢測結果的影響(n=223)(±s)
檢測項目PT(s)APTT(s)TT(s)FIB(g/L)采血量不足標本重抽合格標本P 16.5±3.213.0±1.4<0.0543.2±5.830.3±2.3<0.0520.2±2.416.4±1.6<0.052.68±0.463.15±0.81<0.05
2.2 采血過多對檢測結果的影響 見表2。采血過多同樣使PT、APTT和TT結果升高,FIB結果降低。
表2 采血過多對檢測結果的影響(n=160)(±s)

表2 采血過多對檢測結果的影響(n=160)(±s)
檢測項目PT(s)APTT(s)TT(s)FIB(g/L)采血量過多標本重抽合格標本P 16.7±2.113.8±1.3<0.0540.4±4.231.5±2.0<0.0521.7±2.217.3±1.4<0.052.75±0.553.21±0.84<0.05
2.3 溶血對檢測結果的影響 見表3。溶血造成PT和APTT結果降低,TT結果升高,FIB結果無明顯影響。
表3 溶血對檢測結果的影響(n=105)(±s)

表3 溶血對檢測結果的影響(n=105)(±s)
檢測項目PT(s)APTT(s)TT(s)FIB(g/L)溶血標本重抽合格標本P 12.1±0.7614.5±1.0<0.0526.6±2.130.7±2.3<0.0519.3±1.416.5±1.3<0.053.16±0.813.15±0.75>0.05
2.4 室溫放置時間對檢測結果的影響 見表4。室溫放置8 h時,PT和APTT結果升高,對TT和FIB結果無明顯影響。室溫放置4 h內對PT和APTT結果無明顯影響。
2.5 4℃放置時間對檢測結果的影響 見表5。4℃放置8 h內對PT、APTT、TT和FIB結果均無影響。
表4 室溫放置時間對檢測結果的影響(n=35)(±s)

表4 室溫放置時間對檢測結果的影響(n=35)(±s)
注:*與即刻測定組比較P>0.05,#與即刻測定組比較P<0.05。
檢測項目即刻2 h 4 h 8 h FIB(g/L)3.25±0.913.24±0.85*3.25±0.93*3.26±1.00*PT(s)14.1±1.214.3±1.3*14.2±1.2*16.1±1.3#APTT(s)31.2±2.331.5±2.4*31.5±2.4*35.3±2.6#TT(s)17.1±1.517.3±1.6*17.4±1.5*17.2±1.6*
表5 4℃放置時間對檢測結果的影響(n=35)(±s)

表5 4℃放置時間對檢測結果的影響(n=35)(±s)
注:*與即刻測定組比較P>0.05。
FIB(g/L)檢測項目PT(s)APTT(s)TT(s)3.25±0.913.27±0.93*3.26±0.90*3.26±0.91*即刻2 h 4 h 8 h 14.1±1.214.2±1.1*14.1±1.2*14.2±1.3*31.2±2.331.5±2.4*31.4±2.3*31.6±2.5*17.1±1.517.2±1.6*17.1±1.4*17.0±1.5*
ISO15189《醫學實驗室質量和能力的專用要求》將醫學實驗室檢驗全過程分為三部分,即分析前質量管理、分析中質量管理、分析后質量管理。分析前程序按照時間順序,從臨床醫生開出醫囑開始,到檢驗分析程序啟動時終止的步驟,包栝檢驗申請、患者準備、原始樣品的采集、標本運送到實驗室并在實驗室內進行傳遞等[1]。據權威報道,臨床反饋不準確的檢驗結果,最終80%可溯源至實驗分析前程序的不規范[2],而最重要的則為標本采集的不規范、不準確。檢驗分析前質量控制是國內外醫學實驗室管理的熱點,是我國質量管理最薄弱的環節,最易出現問題,是潛在因素最多、最難控制的環節。該環節直接影響實驗結果的準確性,甚至導致臨床誤診,延誤病情,致使臨床醫生對實驗結果產生懷疑,影響了醫、技、護之間的信任與協作。凝血四項檢測結果的準確性也與這些分析前因素密切相關。
我院2010年3月至2010年6月共有9700份送檢標本做凝血四項測定,其中不合格標本488例,占5.0%,包括采血量不足標本223例,采血過多標本160例,溶血標本105例。所有不合格標本均重抽血,不合格標本與合格標本均進行凝血四項檢測。從表1-3可看出,采血量不足或過多、標本溶血都影響凝血四項的測定結果,而這些都與標本的不正確采集有關。因此檢驗科應聯合護理部門對護士進行培訓,使其做到熟練掌握靜脈穿刺、各種真空采血管的正確使用及標本處理的標準程序等技能,認識護理工作對確保檢驗質量的重要性,確立提高醫療質量的服務理念。
血液離體即開始變化,儲存時間過長,凝血因子活性明顯減低而導致凝血四項檢測結果不同[3]。但溫度低可減緩凝血因子失活的速度。因此將血標本分別置于4℃與室溫2 h、4 h、8 h再測定,發現4℃、室溫放置2 h、4 h測定結果與即刻測定的結果無顯著差異,PT和APTT在室溫8 h測定結果與即刻測定的結果有顯著差異,而在4℃放置8 h的所有四項測定結果與即刻測定的結果無顯著差異。由此可見,凝血標本在室溫下保存時,PT和APTT的測定應在4 h內完成,否則可因其活性降低而使測定結果延長;而在4℃下保存,PT和APTT的測定結果雖能保持相對長時間的穩定,但也應于8 h內完成測定,時間過長也可能因凝血因子活性異常而導致測定結果誤差[4]。至于TT和FIB在室溫和4℃條件下,測定結果均相當穩定,但測定也應于8 h內完成。因此采血后應及時將標本送至檢驗科,使待測時間控制在4 h之內,如不能按時測定,應立即將標本放置于4℃冰箱冷藏,但待測時間不宜超過8 h,以保證測定結果的準確性與可靠性。
從影響凝血四項結果的分析前因素,我們可以看出分析前質量控制對檢驗結果至關重要,因此應把它作為檢驗科重要的工作內容,它也是全面管理質量管理的關鍵環節。但對分析前階段的質量控制,只有通過科室之間互相學習與溝通,正確、規范化采集標本,做好各項環節的質量保證措施,才能提高分析前階段的質量控制水平,使檢驗結果能正確、可靠、真實。
[1]顧可梁.尿有形成分分析幾個問題[J].臨床檢驗雜志,2006,24(1):74.
[2]叢玉隆.分析前質量管理及存在問題與對策[S].第二屆世界華人臨床生化和檢驗醫學大會第六屆全國檢驗醫學學術會議論文匯編,2004:10-13.
[3]叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗學[M].北京:中國科學技術出版社,1997:204-207.
[4]張勁豐.不同保持條件下對PT和APTT結果的影響[J].微循環學雜志,2004,14(1):46-49.