口服人參皂甙Rg3聯合絲裂霉素C膀胱內灌注對表淺性膀胱癌術后血清VEGF的影響

莫乃新 常寶元 呂忠 吳斌 史紅雷 王旭剛 鐘敏 馮偉 魏漢平

(江蘇大學附屬武進醫院泌尿外科,江蘇 常州 213002)

手術是治療表淺性膀胱癌的首選方法,術后常輔以經尿道膀胱內灌注治療,以降低復發率,但療效尚難令人滿意。近年來一些研究[1]表明,血管生成抑制劑在抑制腫瘤生長、轉移和復發中起著重要的作用。化療與血管生成抑制劑聯合應用,可以提高對腫瘤的治療效果[2]。血管內皮生長因子(VEGF)能刺激血管內皮細胞增殖、轉移并引發病理性血管的形成。為此,我們給表淺性膀胱癌患者術后口服人參皂甙Rg3聯合絲裂素C(MMC)膀胱內灌注輔助治療,并監測VEGF的水平,探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2006年3月—2008年5月,本院手術的表淺性膀胱癌患者65例,其中男性51例,女性14例;年齡21～86(65.6±11.1)歲;其中行經尿道膀胱腫瘤切除術(TURBT)56例,膀胱部分切除術9例;均經術后病理證實為表淺性膀胱癌,術前均未行放療、化療或免疫治療。術后隨機將患者分為單純MMC治療組(A組)33例;口服人參皂甙Rg3+MMC治療組(B組)32例;同期健康體檢者30例作為對照組(C組)。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 膀胱癌患者于術前、輔助治療前及輔助治療后2個月經肘靜脈抽空腹血3 mL;健康體檢者也經肘靜脈抽空腹血3 mL,標本置室溫自然凝固后,以 2000 r?min-1離心10 min,分離血清,小管分裝后置-70°C冰箱保存待測。

1.2.2 檢測方法 采用Partec流式細胞分析儀測定血清VEGF濃度。試劑盒由美國BD公司提供,由專人進行監測,根據標準曲線求出VEGF濃度。

1.2.3 化療方法 (1)A組：術后1周開始經尿道膀胱灌注MMC 20 mg+0.9%氯化鈉液50 mL 1次/周,連續 8次后改每月1次,持續 1年。(2)B組：使用 MMC方法同 A組,同時口服人參皂甙Rg3(吉林亞泰制藥有限公司)20 mg 2次?d-1,連續服用2個月為1個療程,持續至少4個月。

1.3 統計學分析 各組數據以均數士標準差表示,采用t檢驗、方差分析比較組內和組間差異,統計學分析應用SPSS13.0軟件完成。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 表淺性膀胱癌患者術前血清VEGF水平(258.0士185.1)pg?mL-1明顯高于健康成人對照組(163.1±95.5)pg?mL-1,差異有顯著統計學意義(P＜0.01)(表1)。

表1 表淺性膀胱癌患者與健康成人對照組血清VEGF水平比較

2.2 輔助治療后2個月人參皂甙Rg3+MMC治療組血清VEGF水平(183.8±107.1)pg?mL-1明顯低于MMC治療組(246.4±177.5)pg?mL-1,差異有統計學意義(P＜0.05)(表2)。

表2 口服人參皂甙Rg3+MMC治療組與MMC治療組血清VEGF水平比較

3 討 論

上世紀70年代初,Folkman等[3]提出了腫瘤生長和轉移依賴于新生血管形成的觀點。一般認為,腫瘤較小時,主要依靠彌散活動獲得氧氣和營養物質,不具有浸潤和轉移的能力;腫瘤變大,新生毛細血管進入腫瘤,為腫瘤提供豐富的血液供應和養分,促進腫瘤細胞進一步生長,表現出浸潤和轉移的惡性生物學特性[4]。有研究[5]表明,VEGF蛋白在正常尿路上皮中不表達,而在膀胱癌組織中呈高表達,而且隨腫瘤分級、分期的增高,其陽性表達率越高。本研究結果顯示：健康成人靜脈血VEGF呈低表達,表淺性膀胱癌患者的血清VEGF濃度明顯高于健康成人對照組。

人參皂甙Rg3是中藥人參中的一種單體成分,屬四環三萜皂甙,其結構式為C42H72O13,分子量為784,化學名為 20(R)-達瑪烷烯二醇-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基(1-2)-β-D-葡萄吡喃糖。其膠囊制劑是我國獨立研制和開發的、擁有完全知識產權的國家1類中藥單體抗癌新藥,是國內第一個運用于臨床的腫瘤新生血管抑制劑和免疫增強劑。陳俊霞等[6]通過作體外實驗表明,人參皂甙Rg3能顯著抑制膀胱癌細胞系EJ細胞生長,且與濃度呈正相關。楊威等[7]通過實驗觀察發現,人參皂甙Rg3能明顯抑制鼠源性膀胱癌細胞系BBT739的粘附力,抑制小鼠膀胱癌的肺轉移。人參皂甙Rg3抑制腫瘤血管生成的分子機制主要是其抑制了腫瘤血管生成因子(主要是VEGF)的表達,從而使新生血管減少,促進腫瘤細胞的死亡或凋亡;人參皂甙Rg3還可促進體內一氧化氮(NO)生成,阻礙腫瘤細胞對纖維粘連蛋白和層粘連蛋白的粘附,抑制血管內皮細胞增殖和腫瘤新生血管形成;降低細胞內Ca2+濃度,破壞其在血管壁的著床和進入浸潤血管內壁,從而起到抑制腫瘤生長、擴散和轉移的作用。本研究結果顯示,MMC治療組2個月后血清VEGF水平較術前雖有降低,但仍明顯高于健康成人對照組,說明從短期看單純MMC膀胱內灌注治療的抗腫瘤血管生成作用尚不理想;口服人參皂甙Rg3+MMC膀胱內灌注治療組2個月后血清VEGF已明顯低于術前并接近正常組水平,較單純MMC治療組明顯降低,且兩者有顯著差異(P＜0.05),表明人參皂甙Rg3聯合MMC有較強的抑制血清VEGF表達的能力。本研究采用人參皂甙Rg3與MMC膀胱灌注聯合應用,就是利用兩者的協同作用,人參皂甙Rg3還有增強人體免疫力的功能,從而有可能進一步降低膀胱腫瘤術后的復發率。

本研究將口服人參皂甙 Rg3聯合MMC膀胱內灌注治療膀胱癌術后患者,初步發現兩者有協同治療作用,從而有可能降低膀胱癌的復發率,值得進一步研究。

1 Iishi H,Tatsuta M,Baba M,et al.Inhibition by ginsenoside Rg3 of bombesin-enhanced peritoneal metastasis of intestinal adenocarcinimas induced by azoxymethane in Wistar rats[J].Clin Exp Metastasis,1997,15：603-611.

2 Morioka H,Weissbach L,Vogel T,et al.Antiangiogenesis treatment combined with chemotherapy produces chondrosarooma necrosis[J].Clin Cancer Res,2003,9：1211-1217.

3 Folkman JD,Amore PA.Blood vessel formation：what is its molecular basis[J].Cell,1996,87(4)：1153-1155.

4 Li CY,Shan S,Cao Y,et al.Role of incipinent angiogenesis in cancer metastasis[J].Cancer Metastasis Rev,2000,19(2)：7-11.

5 Crew JP,Brien J,Brudburn M,et al.Vascular end elial growth factor is a predictor of relapse and stage progression in superficial bladder cancer[J].Cancer Res,1997,51(24)：5281-5285.

6 陳俊霞,彭惠民,蒲淑萍,等.人參皂苷 Rg3誘導膀胱癌細胞系EJ的凋亡作用[J].中國中藥雜志,2007,32(16)：1680-1683.

7 楊威,李博,喬世興.人參皂甙 Rg3抗鼠源性膀胱癌BBT 739黏附、侵襲和肺轉移作用的研究[J].中國老年學雜志,2005,5(25)：571-573.