重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)兩種產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌耐藥性動(dòng)態(tài)分析

余建申,盧建明,夏 海,習(xí)德娥,向常青

(三峽大學(xué)仁和醫(yī)院1.檢驗(yàn)科;2.重癥監(jiān)護(hù)病房,湖北宜昌 443001)

重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)兩種產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌耐藥性動(dòng)態(tài)分析

余建申1,盧建明1,夏 海1,習(xí)德娥1,向常青2

(三峽大學(xué)仁和醫(yī)院1.檢驗(yàn)科;2.重癥監(jiān)護(hù)病房,湖北宜昌 443001)

目的對(duì)醫(yī)院ICU(重癥監(jiān)護(hù)病房)兩種常見(jiàn)產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)細(xì)菌的檢出率及耐藥性進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察,為指導(dǎo)臨床合理使用抗生素提供依據(jù)。方法對(duì)我室2006至2009年從ICU標(biāo)本分離的479株肺炎克雷伯菌和491株大腸埃希菌采用紙片協(xié)同試驗(yàn)和雙紙片確證試驗(yàn)檢測(cè)其ESBLs,并用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果四年來(lái)大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性率從41.6%上升至58.4%;肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性率從29.0%上升至35.3%。產(chǎn)ESBLs株對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs株,但對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物都敏感。結(jié)論4年來(lái),大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌中ESBLs陽(yáng)性率逐年升高,對(duì)產(chǎn)ESBLs菌株的治療應(yīng)首選含酶抑制劑的抗生素、非B內(nèi)酰胺類敏感的抗生素或碳青霉烯類抗菌藥物。

超廣譜B-內(nèi)酰胺酶;耐藥;大腸埃希氏菌;肺炎克雷伯菌

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1428)

本院自2006年以來(lái),本室對(duì)來(lái)自ICU的標(biāo)本培養(yǎng)后進(jìn)行了病原學(xué)和藥敏分析,特別是對(duì)于大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌進(jìn)行了檢出率和耐藥性的動(dòng)態(tài)分析。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是引起院內(nèi)感染常見(jiàn)的革蘭陰性桿菌,其對(duì)抗菌藥物的耐藥性日趨嚴(yán)重。由于第3.4代頭孢菌素的廣泛應(yīng)用,導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)新一代B-內(nèi)酰胺類抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性[1]。為了解本院ICU病房產(chǎn)ESBLs菌株的發(fā)生率和耐藥特性,制定有效對(duì)策控制其傳播和流行,我們對(duì)整整4年來(lái)自ICU病房標(biāo)本中分離的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌進(jìn)行了ESBLs檢測(cè)及藥敏分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來(lái)源 2006年1月至2009年12月,從本院ICU送檢細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本中共分離出肺炎克雷伯菌479株(其中產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶156株)和大腸埃希菌491株(其中172株產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶),剔除同一病人相同部位的重復(fù)菌株。

1.1.2 質(zhì)控菌株 ATCC25922大腸埃希菌,ATCC35218大腸埃希菌;ATCC700603肺炎克雷伯菌、ATCC25923金黃色葡萄球菌,ATCC27853銅綠假單孢菌,均購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.1.3 藥敏紙片 頭孢唑啉、頭孢噻肟鈉、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢他定、慶大霉素、環(huán)丙沙星、氨曲南、阿米卡星均購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司;氨芐西林、美羅西林、頭孢吡肟、復(fù)方新諾明、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、氨芐西林/舒巴坦、美羅培南 、頭孢哌酮/舒巴坦、確證試驗(yàn)紙片頭孢噻肟鈉、頭孢噻肟鈉/棒酸、頭孢他啶、頭孢他啶/棒酸均購(gòu)自英國(guó)OXOID公司;

1.1.4 試劑 API生化反應(yīng)板購(gòu)自法國(guó)梅里埃公司。

1.1.5 儀器 ATB半自動(dòng)生化藥敏鑒定儀。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌鑒定 采用ATB鑒定系統(tǒng)對(duì)分離細(xì)菌株進(jìn)行鑒定。

1.2.2 藥敏試驗(yàn) 采用雙紙片擴(kuò)散法,嚴(yán)格按照NCCLS 2005版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.2.3 產(chǎn)ESBLs檢測(cè)試驗(yàn) 篩選試驗(yàn) 奧格門丁/克拉維酸與頭孢他啶、頭孢吡肟、頭孢唑林、頭孢哌酮、頭孢曲松相鄰,觀察抑菌圈有無(wú)協(xié)同作用,有協(xié)同現(xiàn)象為陽(yáng)性;確證試驗(yàn) 頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸;頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸。2組紙片中任意1組或2組加克拉維酸抑菌藥的抑菌圈直徑與不加克拉維酸抑菌藥的抑菌圈直徑之差大于等于5 mm時(shí)為陽(yáng)性。

2 結(jié)果

2.1 2種菌株產(chǎn)ESBLs的逐年檢出率 見(jiàn)表1。

表1 2種菌株ESBLs的逐年檢出率

2006年1月至2009年12月,臨床分離到491株大腸埃希菌和479株肺炎克雷伯菌,產(chǎn)ESBLs酶肺炎克雷伯菌的檢出率按年份分別為29.0%、31.4%、32.0%、35.3%;產(chǎn)ESBLs酶大腸埃希菌的檢出率按年份分別為41.6%、46.1%、46.9%、58.4%。2種細(xì)菌ESBLs的檢出率明顯呈逐年上升趨勢(shì)。

2.2 兩種細(xì)菌對(duì)18種抗生素的耐藥分析 見(jiàn)表2。

表2 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥率(%)

用紙片擴(kuò)散法測(cè)定172株產(chǎn)超廣譜B內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌和156株產(chǎn)超廣譜B內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌以及不產(chǎn)酶的219株大腸埃希菌和323株肺炎克雷伯菌對(duì)18種抗菌藥物耐藥率,發(fā)現(xiàn),大腸埃希氏菌對(duì)抗生素耐藥率由高到低前3位依次為:氨芐西林(100%、89.6%)、美洛西林(90.6%、63.6%)、復(fù)方新諾明(83.7%、61.3%)、;肺炎克雷伯菌對(duì)抗生素的耐藥率由高到低前3位依次為:氨芐西林(100%、84.3%)、復(fù)方新諾明(86.6%、41.9%)、美洛西林(77.1%、65.3%);可以看出兩種細(xì)菌耐藥率最高的前3位抗生素大致相同,從表2中也可以看出兩種細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類(亞胺培南、美羅培南)耐藥率最低,對(duì)部分含酶抑制劑抗生素(頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦)的耐藥率也較低。同時(shí)也可以看出,產(chǎn)酶株耐藥率明顯高于非產(chǎn)酶株,大腸埃希菌耐藥率高于肺炎克雷伯菌的耐藥率。

3 討論

重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU),是集中疑難重危病例進(jìn)行監(jiān)測(cè)和積極治療的單位,也是醫(yī)院易感人群和感染因素集中的場(chǎng)所,由于其特殊性,患者病情危重,抵抗力差,患者接受較多的治療和監(jiān)護(hù)措施,大量運(yùn)用抗生素,產(chǎn)生耐藥菌的機(jī)會(huì)明顯增多[2].而細(xì)菌耐藥性又是全球醫(yī)療領(lǐng)域中的重要問(wèn)題[3-4]。ESBLs陽(yáng)性菌株的產(chǎn)生是細(xì)菌長(zhǎng)期在抗菌藥物的作用下為適應(yīng)環(huán)境而不斷變異的結(jié)果。產(chǎn)ESBLs菌株的出現(xiàn)與住院患者的細(xì)胞免疫功能下降、器官移植、介入治療、呼吸機(jī)應(yīng)用等危險(xiǎn)因素相關(guān)外,在很大程度上取決于臨床廣譜B-內(nèi)酰胺類抗菌藥物特別是第3代頭孢菌素的作用。隨著第3代頭孢菌素的大量使用,臨床ESBLs陽(yáng)性菌株的檢出率有明顯上升的趨勢(shì),給臨床治療帶來(lái)了極大困難。通過(guò)表1表明,近4年來(lái)我院ESBLs菌株陽(yáng)性率逐年升高,大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌株從2006的41.6%上升到2009年的58.4%,肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs菌株從2006年的29.0%上升到2009年的35.3%。

產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)主要由質(zhì)粒介導(dǎo),可通過(guò)接合、轉(zhuǎn)化和傳導(dǎo)等方式在細(xì)菌種屬之間進(jìn)行傳遞,它能賦予細(xì)菌對(duì)頭孢類,青霉素類,單酰胺類,和氨曲南等抗菌藥物的耐藥,導(dǎo)致耐藥現(xiàn)象的擴(kuò)散[5]。通過(guò)表2表明,ESBLs陽(yáng)性菌株對(duì)頭孢菌素的耐藥率明顯高于ESBLs陰性菌株,ESBLs陽(yáng)性菌株對(duì)氨基酸苷類、氟喹諾酮類、磺胺類等抗菌藥物的耐藥性也較為明顯,說(shuō)明ESBLs陽(yáng)性菌株存在著廣泛的多重耐藥現(xiàn)象。ESBLs陽(yáng)性菌株對(duì)碳青霉烯抗菌藥物、部分含酶抑制劑(頭孢哌酮/他唑巴坦,哌拉西林/他唑巴坦等)抗生素均較敏感,可作為ESBLs陽(yáng)性菌株病例的首選藥物。

ESBLs會(huì)使醫(yī)院感染變得復(fù)雜化,正確使用抗菌藥物有助于控制其播散與爆發(fā)流行[6]。因此及時(shí)對(duì)產(chǎn)ESBLs菌株進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),研究其耐藥譜的變化,對(duì)指導(dǎo)臨床用藥有重要的意義。由于在目前醫(yī)院抗菌藥物的使用、管理、控制的相對(duì)不規(guī)范以及大量使用抗生素,是造成耐藥菌株特別是產(chǎn)酶菌株出現(xiàn)的重要因素。特別是在重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU),病人病情嚴(yán)重,病人免疫力較低下,治療周期較長(zhǎng),抗生素運(yùn)用相對(duì)過(guò)多,所以開(kāi)展ESBLs感染的前瞻性監(jiān)測(cè),及時(shí)準(zhǔn)確地提供給臨床,提高醫(yī)務(wù)人員對(duì)醫(yī)院感染的認(rèn)識(shí),加強(qiáng)抗菌藥物的合理使用及管理,對(duì)有效控制產(chǎn)ESBLs菌株及其他耐藥菌株在醫(yī)院的感染將起到至關(guān)重要的作用。

[1]林建平,潘品福,陶興和.醫(yī)院產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌耐藥性動(dòng)態(tài)觀察[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,24(2):91.

[2]張 華.重癥監(jiān)護(hù)病房(ICU)院內(nèi)感染的控制[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2010,5(6):207.

[3]JonesRN,Pfaller MA.Bacterial resistance;a worldwide problem[J].Diagn Microbiol Infect Dis,1998,31(2):379.

[4]World Heath Organization.WHO global strategy for containment of antimicrobial resistance[EB/OL].WHO/CDS/CSR/DRS/2001.2.

[5]劉水音,何小峰,吳 鏑,等.產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢測(cè)及耐藥分析[J].空軍總醫(yī)院學(xué)報(bào),2009,25(2):71.

[6]彭少華,李從榮,施菁玲,等.產(chǎn)超廣譜B內(nèi)酰胺酶細(xì)菌的檢測(cè)及耐藥性觀察[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2001,24(6):350.

The dynamical analysis of two Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias in intensive care unit(ICU)

YU Jian-shen,LU Jian-ming,XIAHai,et al.(The Renhe hospital of The Three GorgesUniversity1Clinical laboratary2intensive care unitYI Chang city,Hubei province443001,China)

Objectiveanalyse the detection rate and drug resistance of two common Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias in intensive care unit(ICU)dynamically to provide an evidence for clinical doctors to choose antibiotics reasonably.MethodsBetween year 2006 and 2009,test Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing rate of 479 Klebsiella pneumoniae and 491Escherichia coli isolatedfrom the samples of patients in ICU by disk synergy test and double disk test confirmatory test,at the same time do the antibiotics sensetivity test with disk diffusionmethod.ResultsIn recent four years the positive rate of extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing Escherichia coil have increased to 58.4%from 41.6%,which of Klebsiella pneumoniae have increased to 35.3%to 29.0%.The drug resistance rate of extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias is higher obviously than that of the bacteriaswhich don't produce extended-spectrum beta-lactamases(ESBL).However,all these bacterias are sensetive to Carbapenem antibiotics.ConclusionThe positive rates of Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae have increased year by year in recent 4years.For the therapy of extendedspectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias,the antibiotics including beta-lactamases inhibitor,antibiotics unsensetive to beta-lactamases and Carbapenem antibiotics should be choosed firstly.

Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)drug resistance Escherichia coli Klebsiella pneumoniae

R915

A

1007-4287(2010)09-1428-03

余建申(1973-),男,主管技師,從事臨床微生物檢驗(yàn)13年。

2010-02-17)