MIF和VEGF在子宮內膜異位癥組織中的表達及臨床意義

劉晶華,冷維春,劉俊寶*,王 微

(1.上海市公共衛生臨床中心,上海 201508;2.吉林大學中日聯誼醫院婦產科;3.吉林大學第四醫院)

MIF和VEGF在子宮內膜異位癥組織中的表達及臨床意義

劉晶華1,冷維春2,劉俊寶2*,王 微3

(1.上海市公共衛生臨床中心,上海 201508;2.吉林大學中日聯誼醫院婦產科;3.吉林大學第四醫院)

目的探討巨噬細胞移動抑制因子(MIF)和血管內皮生長因子(VEGF)在子宮內膜異位癥(Ems)組織中的表達情況及其兩者的相關性。方法應用免疫組織化學技術對50例EMs組織中的MIF和VEGF蛋白的表達情況進行研究。結果MIF在Ems中異位內膜的表達明顯高于在位內膜(P＜0.05),在位內膜中的表達明顯高于正常對照內膜(P＜0.05);VEGF在Ems中異位內膜的表達同樣明顯高于在位內膜(P＜0.05),在位內膜中的表達高于正常對照內膜(P＜0.05);MIF和VEGF表達呈正相關。結論MIF和VEGF在異位內膜中的表達呈明顯的正相關,提示MIF與VEGF協同促進異位內膜的生長。

Ems;MIF;VEGF

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1405)

子宮內膜異位癥(EMs)是指具有生長功能的子宮內膜組織(腺體和間質)出現在子宮腔被覆內膜及宮體肌層以外的其他部位[1],屬良性疾病,但具有侵襲、擴散等惡性腫瘤的生長特征。MIF可從多方面促進子宮內膜在異位組織的生長。VEGF通過參與異位內膜組織的周圍新生血管的形成,對EMS的發生、發展起重要作用。本文利用免疫組織化學的方法,研究MIF及VEGF在子宮內膜異位癥的異位及在位內膜組織及正常內膜組織中的表達,探討MIF及VEGF與子宮內膜異位癥發生、發展的作用及兩者的相關性。

1 資料與方法

1.1 資料

選取2006年3月-2007年12月期間吉林大學中日聯誼醫院子宮內膜異位癥患者50例,患者年齡23-46歲,平均年齡33.8歲。取典型異位內膜組織50例,刮取在位內膜40例,另取同期非子宮內膜異位癥(并排除其它婦科疾病)的正常人自愿刮宮所取正常子宮內膜組織30例作為對照,患者年齡26-49歲,平均年齡37.5歲。所有標本均經10%甲醛固定,常規石蠟包埋,4 μ m連續切片,每一標本取3張切片,其中1張做HE染色明確病理診斷,其余兩張行MIF及VEGF免疫組化染色,試劑盒內已知陽性片作陽性對照。所有切片均經病理學專家盲法認定。

1.2 方法

采用SP免疫組織化學方法,DAB顯色,蘇木素復染細胞核。MIF(FL-115)為兔抗人多克隆抗體,購自美國Santa Cruz公司,兔抗人多克隆抗體VEGF、SP試劑盒和DAB顯色液均購自福州邁新生物技術開發有限公司。

1.3 結果判定

MIF免疫組化染色以細胞質或細胞核中出現棕黃色顆粒為其陽性判定標準;VEGF免疫組化染色以細胞質或細胞膜中出現棕黃色顆粒為其陽性判定標準。根據細胞染色強度和染色細胞所占面積積分之和進行判斷。染色強度評分標準:不著色為0分,黃色為1分,棕黃色為2分,黃褐色為3分。染色面積評分標準:無細胞染色為0分,＜25%為1分,26%-50%為2分,＞50%為3分。兩種評分相加,0-1分為(-),2分為(+),3-4分為(++),5-6分為(+++)。≤2分的定為陰性,＞2分的定為陽性。

1.4 統計學方法

顯著性檢驗采用 χ2檢驗。MIF和VEGF的相關性應用非參數統計中Spearman等級相關進行分析。所有數據統計均在SPSS11.5軟件上進行。

2 結果

2.1 MIF在正常子宮內膜組織及EMs患者在位內膜及異位內膜中的表達情況(見表1)。在位內膜、異位內膜與正常子宮內膜表達率均有顯著性差異(P＜0.05)。

表1 MIF在正常子宮內膜及EMs在位、異位內膜中的表達

2.2 VGEF在正常子宮內膜組織及EMs患者在位內膜及異位內膜中的表達情況(見表2)。異位內膜、在位內膜與正常子宮內膜表達率均有顯著性差異(P＜0.05)。

表2 VEGF在正常子宮內膜及EMs在位及異位子宮內膜中的表達

2.3 MIF及VEGF在50例EMs異位內膜中表達的關系。

如表3所示,MIF陽性表達與VEGF陽性表達呈正相關(r=0.307,P＜0.05),提示兩者具有協同作用,可能通過某種調控機制共同調控異位內膜的生長。

表3 MIF和VEGF在EMs異位內膜中表達的相關性

3 討論

巨噬細胞移動抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是Bloom和Bennett等研究遲發性超敏反應時發現的一個細胞因子,是可溶性的淋巴因子[2]。參與多種生理生化過程,如:炎癥反應、免疫應答、細胞增殖、血管生成以及腫瘤形成等過程。子宮內膜的異位生長必須依賴新生血管提供營養,新生血管的形成是內膜種植及發展的必要條件。研究發現,MIF可能通過以下兩種途徑促進血管生成:一是直接通過刺激血管內皮細胞增殖發揮作用;二是通過聚集巨噬細胞并分泌各種血管生成因子間接發揮血管生成作用。Eiji[3]等研究也證實,MIF能刺激內皮細胞形成內皮血管。另有研究[4]發現MIF在早期病變中表達增多,提示MIF可能在子宮內膜異位癥早期血管形成中起重要作用。單志新[5]等通過分子克隆,定量PCR的方法在大腸桿菌中表達出MIF,MIF能特異性誘導人血管內皮細胞中血管生成相關基因(VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF-a、PDGF-a等)的表達,參與血管形成。另MIF通過多種途徑促進子宮內膜組織在異位的種植。MIF通過提高MMPs的能力,增強了內膜細胞的侵襲力,使內膜細胞易于植入。Harada[6]等進行了EMs在位及異位內膜與正常女性子宮內膜對凋亡敏感性的比較實驗發現,EMs患者在位及異位內膜對凋亡的敏感性均明顯下降,異位者較在位者下降更明顯,且無周期性變化。因此,MIF在子宮內膜異位癥的發生發展中起作用,其可通過多種機制參與內異癥的發生發展。

血管內皮生長因子(VEGF)是迄今發現最強的促血管生成因子,在體內外均有特異性促進血管發生的作用。研究發現VEGF是一種多功能的血管生成因子,可直接刺激內皮細胞生長,促使血管生成;也可誘導細胞表達多種組織蛋白酶,降解細胞外基質,從而介導內皮細胞遷移和浸潤,誘導血管生成;同時VEGF可以與其受體特異性結合,通過降解血管內皮細胞的基質、削弱血管的屏障作用,致使新生血管基底膜缺損加重,從而促進子宮內膜異位癥的異位種植。血管生成在EMs的發生發展中占有重要位置[7],異位內膜在盆腔局部的種植與病灶的進一步發展需要新生血管提供營養[8,]Goteri等[9]通過研究得出血管新生(angiogenesis)在卵巢子宮內膜異位癥中發揮重要作用;Oosterlynack等[10]研究顯示:EMs患者腹腔液中VEGF等一些血管活性物質水平增高,使腹壁微血管生成增多,導致盆腔局部對異位內膜種植的接受能力增強。可見血管生成與EMs發生、發展密切相關,腹腔局部微環境內新生血管的形成為異位的子宮內膜的種植發展提供了營養和物質基礎。

我們的研究發現,MIF與VEGF這兩種因子在子宮內膜異位癥的發生發展過程中起重要作用,間接提示了子宮內膜異位癥的發生發展是多因素共同作用的結果,且兩者在異位內膜中的表達水平呈明顯的正相關性,提示這兩個因子可能通過促進新生血管形成的途徑協同促進了異位內膜的種植和生長,為以后進一步治療MES提供了理論基礎。

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The Expression and clinical significance of MIF and VEGF in the the Occurence and Progress of Endometriosis

LIU Jinghua,LEN Wei-chun,LIU Jun-bao,et al.(Department of Obstetrics and Gynecology,Shanghai Public Health Clinical Center Affiliated toFudan University,Shanghai201508,China)

ObjectiveTo discussthe expression of macrophage migration inhibitory factor(MIF)and vascular endothelial growth factor(VEGF)in endometriosis(Ems)tissues and the correlation between MIF and VEGF.MethodsA research is conducted on the protein expressions of MIF and VEGF in 50 cases of EMs organizationswith the immunohistochemis-trical SP method.ResultsThe expression of MIF in the eutopic endometrial endometrial was significantly higher than that in the ectopic endometria in endometriosis(P＜0.05);the expression of MIF in the ectopic endometria in endometriosis was higher than that in the normal endometrium(P＜0.05);the expression of VEGF in the eutopic endometrial was also significantly higher than that in the ectopic endometria in endometriosis(P＜0.05);the expression of MIF in the ectopic endometria in endometriosis was higher than that in the normal endometrium(P＜0.05);so there was a positively correlation between MIF and VEGF.ConclusionThe expression of MIF and VEGF in ectopic endometrial was significantly positively correlated,suggesting thatMIF and VEGF playing an important role in the growth of ectopic endom.

EMs;MIF;VEGF

R392

A

1007-4287(2010)09-1405-03

*通訊作者

2009-11-15)