豬心傳導系標本的制作

張 冬，林小博

(漯河醫學高等?？茖W校解剖學教研室，河南漯河 462002)

豬心傳導系標本的制作

張 冬，林小博

(漯河醫學高等?？茖W校解剖學教研室，河南漯河 462002)

目的：綜合利用心傳導系顯示技術，制作滿足解剖學教學要求的心傳導系標本。方法：用新鮮豬心，經常規解剖顯示其大體結構。綜合利用一系列心傳導系顯示技術處理標本。結果：該技術制作的標本，心傳導系各結構顯示清晰全面，便于教學。結論：該方法制作的心傳導系標本能夠滿足教學及科研使用。

豬心；心傳導系；制作技術

人體解剖學是研究人體正常形態結構的科學，是其他醫學學科的先導課，是一門實踐性較強的學科。解剖學的實驗教學歷來受到重視，由于心傳導系統的各個結構不能在經固定液固定的標本上制作顯現，需要新鮮的心才能染色顯示，所以常用動物心臟制作心傳導系標本。豬心在解剖結構上和人比較相似且又容易獲得，常作為實驗材料應用到解剖學實驗教學中。大體顯示心傳導系形態的方法可歸納為兩大類：一類是大體解剖法，即用解剖器械解剖，直接顯示心傳導系；另一類是染色法，即用化學藥品染色達到顯示心傳導系的目的。大體解剖法主要適用于顯示心臟傳導系中的竇房結、房室結、房室束等大結構。染色法主要適用于顯示心臟傳導系中的左右束支以及浦肯野纖維網等小結構。兩類方法各有利弊[1]，單靠一種方法制作的豬心傳導系標本不方便觀察，作者嘗試綜合運用多種制作方法，效果滿意，現報道如下：

1 材料與方法

1.1 材料

新鮮豬心、解剖顯微鏡、解剖器械、1 ml注射器及 4號針頭、502膠水、細毛筆和脫脂棉球、印度墨汁過濾水溶液、3%～5%的復方碘溶液。

1.2 方法和步驟

由于染色對標本的新鮮度要求較高，所以先染色顯示左右束支以及蒲肯野纖維。

1.2.1 左右束支以及蒲肯野纖維顯示 由于豬心較小，墨汁不易注入包繞房室束和左右束支的結締組織鞘內，為精確定位結締組織鞘內的位置，提高注入的準確率，先用復方碘溶液涂染，臨時顯示左右束支以及蒲肯野纖維；待顯示后再采用墨汁注入法定型染色以顯示左右束支以及蒲肯野纖維分布。具體操作方法：①復方碘溶液涂抹染色[2]，由于蒲肯野纖維內含有大量糖元，糖元與碘結合即呈藍色反應，在新鮮標本心內膜下涂以復方碘溶液 ，即可把左右束支及蒲肯野纖維染成藍黑色條紋。操作過程是先經肺動脈口剪開，沿右冠狀溝稍下方剪向銳緣（相當于人的心下緣），到后室間溝處再轉向下，直達近心尖處，將右心室游離壁向下翻，暴露右束支主干和主要分支的走行部位。再打開左心室從心左緣縱行剪開，并向上以此剪開二尖瓣和主動脈瓣，使左室前后乳頭肌分居前后，暴露左室間隔面及游離壁。為方便觀察，腱索和瓣膜一并剪除。暴露完畢后，用棉球或毛筆將復方碘液涂于心內膜表面，內膜下蒲肯野纖維很快呈棕黑色。②墨汁注射染色[3]，在剖開的心室壁游離緣處，根據復方碘液染色顯示注射墨汁染色。右手持注射器，稍用力使注射器針尖平行按壓在有左右束支及其分支的心內膜上，使心內膜微陷同時保持針尖斜面向上。之后向前進針，使針尖的斜面完全進入心內膜下后，再進針1～2 mm。平穩轉動注射器180°，使針尖斜面轉向心??；接著先試著輕推活塞，若進針正確，輕輕推壓即可使墨水進入；若阻力較大，且無墨水注入，則說明針尖未進入到結締組織鞘內，需調整或重新進針。注射時要緩緩注射，同時用刀柄輕輕推送或用手輕輕撫摸注射部位，以防壓力過大，導致鞘膜破裂。依照上述方法由傳導系遠端向近端逆向灌注墨汁染色，依次把左、右束支及其分支和浦肯野纖維網全部染色。

1.2.2 竇房結、房室結及房室束的顯示 竇房結與周圍組織界線不明顯，用肉眼解剖法難以確定，因而需要借助竇房結動脈尋認竇房結。房室結較大，尋找較竇房結容易。具體方法[4]：①在右冠狀動脈注射染料后，沿右冠狀動脈竇房結支，尋認竇房結；竇房結色黃而較周圍組織致密，一般在前腔靜脈（相當于人的上腔靜脈）與右心耳交界處前面的最高點上界溝的內側，靠近前腔靜脈處的心外膜下，圍繞竇房結動脈周圍的一段心肌處。②縱行切開右心房和后腔靜脈（相當于人的下腔靜脈），在冠狀竇的前方鈍性分離心內膜，在房室交界區可見一色稍白而致密的團塊狀結構，即是房室結。③借助碘染色追跡，仔細用小鑷子剝除心內膜或薄層心肌。顯示左 、右束支的起始部和房室束。④染色，由于標本要在標本盒中保存，加之竇房結、房室結及房室束都比較小，標本需要染色才能方便學生觀察。由于竇房結和房室結不宜著色，可以用注射器注入少許墨汁，然后用502膠封住。

1.2.3 固定封存 縫合兩心室壁游離緣，使心室內膜平展，標簽編號，放入 10%甲醛溶液中固定 1周。固定后放入5%過氧化氫溶液漂白1周，然后將制好的心臟標本放入裝有5%甲醛溶液的標本盒中保存。

2 結果

經過上述方法制作的標本顯示心傳導系統比較清晰，特別是能在盒裝標本中清楚地顯示竇房結、房室結和房室束，方便學生觀察，利于提高教學效果。但是由于保存在液體中，學生觀察時會因為折光等因素，很難想象在活體上的空間相對結構，不利于后續課程中心電知識的學習，如果能通過進一步的塑化技術處理，做成塑化標本，將更有助于提高教學效果。

3 討論

3.1 對材料的要求

①豬心要新鮮，取出動物跳動的心臟后，需在 1～2 h內染色，效果較好，時間久則效果漸差，過 6～10 h后常不能染示。另外，存放時間過長的豬心，其心室內膜韌性變小，不易灌注。②重量和體積宜大，一般而言，重量和體積越大的豬心，其心內膜下結締組織鞘越粗，越易操作。③碳素墨水的選材原則為顆粒越小越好，用濾紙過濾墨水后更佳。④環境溫度以10～20℃為宜，該溫度下，方便操作，多人配合可做到1 d內完成標本制作，無需凍存過夜，利于標本保鮮。

3.2 操作注意事項

①由于心室被剖開處容易漏液，染色時需注意兩人合作。一人用棉簽壓在心室壁邊緣，以防漏夜，另一人推注。②剪開心腔時，注意不要傷及其他心內膜，以免漏液。③為使標本著色清晰完全，宜多點注射。

[1]韋昭文,任平.兩類顯示心臟傳導系方法的比較[J].遼寧中醫藥大學學報,2010,12(1):198-199.

[2]谷學靜.心傳導系碘染顯示法[J].錦州醫學院學報,2003,24(6):68．

[3]張寶良,申彪,鄭彭毅,等.牛心傳導系顯示方法和技巧[J].新鄉醫學院學報,2006,23(3):260-261.

[4]魯金波,王玉忠,陳國英,等.顯示心臟傳導系的標本制作[J].內蒙古獸醫,2002,(1):29-30.

[5]李忠華,王興海.解剖學技術[M].2版.北京:人民衛生出版社,1997:121-122．

R322-34

B

1674-4721（2010）09（a）-120-02

張冬（1983-），男，河南周口人，本科，助教，主要從事人體解剖學教學和科研工作。

2010-08-02）