印楝素乳油對三葉草斑潛蠅存活和產卵量的影響

崔旭紅 陳 陽 李曉宇 林 俊 商晗武

（1中國計量學院生命科學學院生物計量檢驗檢疫技術實驗室，浙江杭州 310018；2江蘇吳江出入境檢驗檢疫局，江蘇吳江 215200）

三葉草斑潛蠅〔Liriomyza trifolii（Burgess）〕屬于雙翅目（Diptera）、潛蠅科（Agromyzidae）、斑潛蠅屬（Liromyza），是一種為害蔬菜、花卉等多種經濟作物和園藝植物的重要害蟲。由于殺蟲劑的廣泛使用，三葉草斑潛蠅已對多種化學農藥產生了不同程度的抗性，使其防治更加困難，篩選新型、不易產生抗性的殺蟲劑顯得尤為重要（Ferguson，2004）。印楝素（Azadirachtin）是從印楝（Azadirachta indica）中提取的一種四環三萜類固醇化合物，具有殺蟲范圍廣，害蟲不易產生抗藥性，對人畜、天敵較安全等優點，被認為是21世紀最有發展前景的植物源農藥。在國外，印楝素已被用于防治多種斑潛蠅，但防治效果存在一定差異（Weintraub & Horowitz，1997；AzaMet al.，2003）。三葉草斑潛蠅是我國近年來新發生的重要害蟲，國內尚未有印楝素對其防治效果的報道。為了明確印楝素對三葉草斑潛蠅的控制作用，本試驗測定了0.5 %印楝素乳油對三葉草斑潛蠅存活和產卵量的影響，以期為印楝素的合理利用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源、寄主植物和藥劑

試驗于2008～2009年在中國計量學院生命科學學院生物計量檢驗檢疫技術實驗室進行。

供試三葉草斑潛蠅采自本實驗室長期維持的種群。寄主植物為菜豆（Phaseolus vulgarisLinn.）品種:天馬地豆。菜豆種子經催芽后播種，待長出2片真葉后用于種群維持和試驗。

0.5 %印楝素乳油由光明印楝產業開發有限責任公司生產，用超純水稀釋成1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg·L-15個濃度的溶液用于試驗。

1.2 試驗方法

1.2.1 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅不同蟲態存活的影響 卵:將菜豆清潔苗放入工氣候箱〔溫度（26±1）℃，相對濕度70 %±5 %，光照時間16 h/8 h（晝/夜）〕中的養蟲籠（30 cm×30 cm×30 cm）內，每籠接入30對成蟲，任其取食產卵，24 h后驅除成蟲并將植株從籠中取出。在體視顯微鏡下用記號筆對卵進行標記，為了避免蟲口密度過大造成競爭，保持每1 cm2葉片上的卵數≤1個，多余的卵用解剖針扎死。將標記好的菜豆苗分成5組，隨后用噴霧器將稀釋的印楝素乳油溶液（1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 mg·L-1）噴灑于植株正反葉面，直至藥液滴落。待藥液不滴后將植株重新放回人工氣候箱，2 d后開始觀察記錄卵的孵化情況，隨后每隔24 h調查1次，直至沒有卵孵化。每個處理的卵數不少于20粒。

幼蟲:將菜豆清潔苗放入養蟲籠中，接蟲24 h后驅除成蟲并取出植株，隨后將接好蟲的植株放入培養箱，待卵孵化發育至3齡幼蟲時用于試驗。幼蟲齡期參考鄭丹等（2009）的方法和葉片上潛道寬度變化情況來確定，將葉片上3齡幼蟲留下，其余蟲態用針扎死。將接好蟲的菜豆分成5組，隨后用噴霧器將稀釋好的印楝素藥液噴灑于植株正反葉面，直至藥液滴落。待藥液不滴后將植株重新放回人工氣候箱，24 h后開始觀察記錄幼蟲化蛹情況，以后每隔24 h調查1次，直到沒有幼蟲化蛹為止。每個處理的幼蟲數量不少于25頭。

蛹:隨機采集三葉草斑潛蠅蛹放入培養皿中，培養皿底部鋪有濾紙，隨后用噴霧器將稀釋的印楝素藥液噴灑于培養皿內，1 min后注意用濾紙將多余藥液吸去。24 h后開始觀察記錄蛹羽化的情況，直至沒有蛹羽化。每個處理的蛹數量不少于25頭。

以噴灑清水的處理作為空白對照。每個處理3次重復。

1.2.2 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅成蟲產卵量的影響 將噴灑過不同濃度印楝素藥液和清水的菜豆苗各1株隨機擺放在養蟲籠中，接入25對三葉草斑潛蠅成蟲（♀∶♂=1∶1），48 h后采用染色法（Parrella & Robb，1982）調查記錄每片葉上的卵量。各處理3次重復。

1.3 數據分析

采用統計軟件SPSS10.0和SPSS Inc（USA）進行數據分析。用單因素方差分析（One-way Analysis，S-N-K test）來檢驗不同處理間的差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅不同蟲態存活的影響

由表1可知，用1.25～20.00 mg·L-1的印楝素噴灑菜豆后，葉片上三葉草斑潛蠅卵的孵化率超過90.0 %，與對照差異不顯著。3齡幼蟲的死亡率隨著印楝素藥液濃度的升高迅速升高。當印楝素濃度為1.25 mg·L-1時，超過90 %的3齡幼蟲能夠正常化蛹，與對照差異不顯著；印楝素濃度為2.50 mg·L-1及以上時，3齡幼蟲的死亡率迅速上升；印楝素濃度為20.00 mg·L-1時，3齡幼蟲全部死亡。三葉草斑潛蠅蛹經過印楝素處理后，死亡率迅速上升，遠高于卵和3齡幼蟲。當噴灑1.25 mg·L-1印楝素后，蛹死亡率超過70 %；經過10.00 mg·L-1印楝素處理后，三葉草斑潛蠅的蛹全部死亡。因此，印楝素對三葉草斑潛蠅卵孵化沒有顯著影響，但對 3齡幼蟲和蛹致死作用明顯。

表1 印楝素藥液處理后三葉草斑潛蠅的死亡率和成蟲產卵量、產卵忌避率

2.2 印楝素乳油對三葉草斑潛蠅成蟲產卵量的影響

經1.25～20.00 mg·L-1的印楝素處理后，菜豆葉片上三葉草斑潛蠅成蟲的產卵量顯著低于對照，且隨著印楝素濃度的增加，三葉草斑潛蠅成蟲產卵量呈現出逐漸降低的趨勢，印楝素對三葉草斑潛蠅雌蟲產卵具有明顯的忌避作用（表1）。

3 結論與討論

印楝素對三葉草斑潛蠅卵孵化沒有顯著影響，對幼蟲、蛹有明顯的致死作用，其中對蛹的致死作用大于幼蟲，這與前人對美洲斑潛蠅和南美斑潛蠅的研究結果一致（Weintraub & Horowitz，1997；Hossain，2005）。因此，根據三葉草斑潛蠅的發生狀況選擇使用印楝素的時機對提高其防治效果非常重要。

根據報道，印楝素對南美斑潛蠅產卵量沒有顯著影響（Weintraub & Horowitz，1997），但本試驗表明，2.50 mg·L-1的印楝素即對三葉草斑潛蠅成蟲表現出明顯的產卵忌避作用（產卵忌避率＞50 %）；成蟲產卵量隨著印楝素濃度的增加顯著下降。這可能與印楝素的施用方式有關，采用噴霧葉片的方式使用印楝素對多種害蟲的產卵有抑制作用，灌根的方式則產卵忌避較差（文吉輝 等，2007）。成蟲的產卵情況對害蟲后代種群發展具有重要影響，因此使用印楝素防治三葉草斑潛蠅時宜采用噴霧的方式。

文吉輝，侯茂林，盧偉，黎家文．2007．印楝素乳油不同施用方式對煙粉虱寄主選擇和產卵的影響．中國生物防治，23（4）:333-337.

鄭丹，崔旭紅，李志江，陳陽，商晗武．2009．三葉草斑潛蠅對6種寄主植物的選擇適應性及其與寄主化學物質含量的關系．植物保護，36（3）:93-96.

AzaMK M，Al-Raeesi A A，Srikandakumar A，Bowers W S．2003．Control of leafMiner（Liriomyza trifoliiBurgess）on cucumber by plant extracts．Crop Research，25:567-571.

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Parrella MP，Robb K L．1982．Technique for staining eggs ofLiriomyza trifoliiwithin chrysanthemum，celery，and tomato leaves．Journal of Economic Entomology，75:383-384.

Weintraub P G，Horowitz A R．1997．Systemic effects of a neeMinsecticide onLiriomyza huidobrensislarvae．Phytoparasitica，25:283-289.