不同干燥方法對麥參咳喘膠囊浸膏中甘草酸含量的影響

張 毅，陳楊芳，葉 磊，王 麗

（安徽省藥物研究所·安徽省中藥研究與開發(fā)重點實驗室，安徽 合肥 230022）

麥參咳喘膠囊由黨參、麥冬、白術(shù)、甘草等7味藥材經(jīng)提取制成，具有益氣固表、健脾補腎的功能，臨床用于脾虛痰盛、腎氣不固所致咳嗽、痰多、喘息氣促、動則喘劇者及慢性支氣管炎、肺氣腫、支氣管哮喘見上述癥候者。筆者研究了4種干燥方法對麥參咳喘膠囊浸膏中有效成分含量的影響，以期為選擇浸膏干燥方法提供科學依據(jù)。甘草酸為本品中甘草的主要有效成分，故以甘草酸單銨鹽為對照品，采用高效液相色譜法測定麥參咳喘膠囊中甘草酸的含量[1]，可以有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

LC-10AT型泵（日本島津），SPD-10A型檢測器（日本島津），N-2000型色譜工作站（浙江大學）；GZX-9140MBE數(shù)顯鼓風干燥箱（上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；WD700（MG-5021T1）型LG微波爐；ZK-82A型真空干燥箱；LHS型噴霧干燥設(shè)備。甘草酸單銨鹽對照品（含量測定用，中國藥品生物制品檢定所，批號為0756-200009）；麥參咳喘膠囊浸膏及陰性樣品（安徽省藥物研究所自制）；甲醇、乙腈為色譜純（上海化學試劑總廠），其余均為分析純，水為自制重蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品浸膏制備

按處方量取黨參、麥冬、白術(shù)、甘草等7味藥材，加8倍量水煎煮3次，第1次3 h，第2次2 h，第3次 1 h，濾過，合并濾液，靜置沉淀24 h，取上清液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度約1.35（80℃測定）的稠膏，平均分成4份，備用。

2.2 干燥方法

常壓干燥：取上述浸膏1份，置電熱恒溫烘箱中，控制溫度為60℃，加熱使干燥，取出，稱定干膏質(zhì)量，粉碎，過80目篩，作為供試品粉末。

減壓干燥：取上述浸膏1份，置真空干燥箱內(nèi)，控制溫度為60℃、壓強為1.0 kPa，加熱使干燥，取出，稱定干膏質(zhì)量，粉碎，過80目篩，作為供試品粉末。

微波干燥：取上述浸膏1份，置微波專用物料盒內(nèi)，再置微波真空干燥箱內(nèi)，控制溫度為低溫，待干燥后取出，稱定干膏質(zhì)量，粉碎，過80目篩，作為供試品粉末。

噴霧干燥：取上述浸膏1份，稀釋至相對密度約1.08（80℃測定）后噴霧干燥，干燥后取出，稱定干膏質(zhì)量，粉碎，過80目篩，作為供試品粉末。

2.3 甘草酸含量測定[2-4]

2.3.1 色譜條件

色譜柱：大連江申 Century SIL C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：2%冰醋酸 -乙腈（65∶35）；檢測波長：250 nm；柱溫：室溫；流速：1.0 mL/min；進樣量：20μL。

2.3.2 溶液制備

取甘草酸單銨鹽對照品約6 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液（120μg/mL）。精密量取對照品貯備液1 mL，至10 mL量瓶中，用流動相稀釋并定容至刻度，即得每1 mL含甘草酸單銨鹽12μg（折合甘草酸為11.754μg）的對照品溶液。精密稱定樣品粉末0.4 g，置50 mL量瓶中，加流動相 45 mL，超聲（功率250 W，頻率20 kHz）處理30 min，放冷，加流動相至刻度，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取不含甘草的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.3.3 方法學考察

系統(tǒng)適用性試驗：按照上述色譜條件，精密吸取2.3.2項下3種溶液各20μL，分別注入液相色譜儀進行測定。結(jié)果供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應(yīng)位置上有相同保留時間的色譜峰，而陰性對照品溶液在此保留時間無干擾（圖1），表明可在此系統(tǒng)條件下對甘草酸進行定量分析。

標準曲線繪制：精密吸取適量對照品貯備液，分別配制成48，24，12，6，3μg/mL 系列質(zhì)量濃度的對照品溶液，各精密吸取20μL，依法測定，以峰面積積分值為縱坐標、甘草酸質(zhì)量濃度（μg/mL）為橫坐標繪制標準曲線，得回歸方程Y=31143 X+299.5，r=0.9998（n=5）。結(jié)果表明甘草酸單銨鹽進樣量在0.06～96μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

穩(wěn)定性試驗：取同一供試品溶液適量，分別于 0，2，4，8，12，24 h時按色譜條件注入液相色譜儀，測定峰面積積分值。結(jié)果的 RSD=1.20%（n=6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

精密度試驗：精密吸取對照品溶液適量，按色譜條件注入液相色譜儀，連續(xù)進樣5次，測定峰面積積分值。結(jié)果的 RSD=1.41%（n=5），表明儀器精密度較好。

重現(xiàn)性試驗：取同一批（批號為080503）樣品6份，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定。結(jié)果甘草酸平均含量為1.72 mg/g，其 RSD=1.39%（n=6），表明方法重現(xiàn)性較好。

加樣回收試驗：取已知含量（1.72 mg/g）的樣品（批號為080503）6份，每份稱取約0.2 g，分別精密加入甘草酸單銨鹽對照品300，360，420μg各2份，按供試品溶液制備方法制備溶液，按色譜條件注入液相色譜儀，測定，計算回收率。結(jié)果見表1。

2.3.4 樣品含量測定

圖1 高效液相色譜圖

表1 甘草酸加樣回收試驗結(jié)果（n=6）

精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，分別測定常壓干燥、減壓干燥、微波干燥、噴霧干燥后的干膏粉中甘草酸的含量。結(jié)果見表2。

表2 不同干燥方法的麥參咳喘膠囊干浸膏粉情況

3 討論

甘草酸為甘草中主要有效成分，可作為麥參咳喘膠囊的質(zhì)量控制指標。以甘草酸單銨鹽為對照品，采用高效液相色譜法測定麥參咳喘膠囊中甘草酸的含量，方法學考察結(jié)果表明，該法穩(wěn)定可行，重現(xiàn)性良好，可作為麥參咳喘膠囊的定量分析方法。

通過測定和比較4種干燥方法所得樣品中的甘草酸含量可以看出，4種干燥方法所得麥參咳喘膠囊中甘草酸含量相差不大，但微波干燥法和噴霧干燥法所用時間遠遠少于另兩種方法，且測得的含量也較高。但噴霧干燥法對儀器的要求比較高，費用也較高，不適宜于小批量樣品的干燥。本試驗結(jié)果顯示，在低溫環(huán)境下將浸膏進行微波干燥，不但對麥參咳喘膠囊浸膏中甘草酸的成分幾乎無破壞，而且可以大大節(jié)省干燥時間，使用方便，因此可將微波干燥法作為麥參咳喘膠囊浸膏在實驗室的干燥方法。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學工業(yè)出版社，2005：65-66.

[2]王二兵，曲婷麗，趙正保.高效液相色譜法測定附子理中丸中甘草酸含量[J]. 科技導(dǎo)報，2008，26（2）：42-45.

[3]蔣 曄，郝 福，李艷榮，等.HPLC同時測定桂枝顆粒中桂皮酸、芍藥苷、甘草酸含量[J]. 中國中藥雜志，2008，33（2）：204-206.

[4]陸文俊.高效液相色譜法測定復(fù)方川貝止咳糖漿中甘草酸含量[J].中國藥業(yè)，2007，16（4）：40-41.