氣相色譜法測(cè)定醋酸氟輕松冰片乳膏中冰片含量

付萍萍，董秋香，張?jiān)潞?/p>

（河北省保定市藥品檢驗(yàn)所，河北 保定 071051）

醋酸氟輕松冰片乳膏（含醋酸氟輕松0.01%，冰片0.5%）為腎上腺皮質(zhì)激素類藥，有抗炎、抗過敏作用，國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)冰片的含量未作規(guī)定[1]。為進(jìn)一步控制本品質(zhì)量，保證療效，筆者建立了冰片的毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定法，報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

日本島津GC-2010型氣相色譜儀，Sartorius BP211D型分析天平。冰片對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為110743-200504）；醋酸氟輕松冰片乳膏（新鄉(xiāng)華青藥業(yè)有限公司，批號(hào)為070808；新鄉(xiāng)市琦寧藥業(yè)有限公司，批號(hào)為20071010，20070713；蕪湖三益制藥有限公司，批號(hào)分別為071201，071205）；水楊酸甲酯、乙醇（分析純）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Dikma DM-5石英毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）；柱溫：100℃保持 10 min，再以 20℃ /min升至 280℃，保持7 min；檢測(cè)器：FID，溫度320℃；進(jìn)樣口溫度：230℃，分流比：10 ∶1；載氣：氮?dú)猓€速率：25 cm/s；空氣流速：300 mL/min；氫氣流速：30 mL/min；尾吹氣：氮?dú)猓魉伲?0 mL/min；進(jìn)樣量：1 μL。

2.2 溶液制備

稱取水楊酸甲酯0.26018 g，置50 mL量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，得內(nèi)標(biāo)溶液。精密稱取冰片對(duì)照品0.12505 g，置25 mL量瓶中，加乙醇適量，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備溶液。精密量取對(duì)照品貯備溶液1 mL，置25 mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1 mL，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。精密稱取樣品內(nèi)容物約1 g，置25 mL量瓶中，加乙醇適量，振搖使溶解，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1 mL，加乙醇稀釋至刻度，濾過，濾液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。按處方比例，依照醋酸氟輕松冰片乳膏的制備工藝制得不含冰片的乳膏，同法操作即得陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：精密吸取2.2項(xiàng)下3種溶液，按2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣。結(jié)果表明，供試品中其他成分和異龍腦峰、龍腦峰與水楊酸甲酯峰均能完全分離，異龍腦峰與龍腦峰理論塔板數(shù)均不低于40000，相鄰峰之間的分離度均大于2.0。色譜見圖1。

圖1 氣相色譜圖

線性關(guān)系考察：分別精密量取對(duì)照品貯備溶液0.25，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00 mL，置 25 mL 量瓶中，各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1 mL，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，按2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。以冰片的進(jìn)樣量（X）對(duì)冰片的異龍腦和龍腦的總峰面積之和與內(nèi)標(biāo)水楊酸甲酯的峰面積比值（Y）進(jìn)行線性回歸，回歸方程為 Y=7.5494 X-0.06327，r=0.99996（n=6）。結(jié)果表明冰片進(jìn)樣量線性范圍是 0.05002 ～1.0004 μg。

精密度試驗(yàn)：取同一對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣。結(jié)果冰片的異龍腦和龍腦的總峰面積之和與內(nèi)標(biāo)水楊酸甲酯的峰面積比值的 RSD為0.5%（n=6），表明方法的精密度較好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于 0，1，2，4，8，12 h 時(shí)依法進(jìn)樣。結(jié)果冰片的異龍腦和龍腦的總峰面積之和與內(nèi)標(biāo)水楊酸甲酯的峰面積比值基本不變，RSD為0.7%（n=6），表明供試品溶液至少在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

重現(xiàn)性試驗(yàn)：精密稱取同一批供試品（批號(hào)為071205）內(nèi)容物約1 g，依法測(cè)定。結(jié)果平均含量為0.50%，RSD為1.0%（n=5），說明方法的重現(xiàn)性較好。

回收率試驗(yàn)：取已知含量的供試品（批號(hào)為071205）內(nèi)容物約1 g，置25 mL量瓶中，加乙醇適量，振搖使溶解，分成3組，每組分別精密加入對(duì)照品貯備溶液0.8，1.0，1.2 mL，各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1 mL，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，測(cè)定。結(jié)果見表1。

表1 冰片加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

檢測(cè)限確定：將2.2項(xiàng)下對(duì)照品貯備溶液用乙醇稀釋，分別制成每1 mL含冰片10，2，1μg的對(duì)照品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，按3倍信噪比計(jì)算檢測(cè)限。結(jié)果冰片的最低檢出量為1 ng。

2.4 樣品含量測(cè)定

取按2.2項(xiàng)下的對(duì)照品溶液與供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果5批供試品分別含冰片0.39%，0.39%，0.28%，0.50%，0.48%。

3 討論

曾選用極性較強(qiáng)的DM-1701色譜柱[2]，結(jié)果供試品中的其他成分不能與異龍腦成功分離，改用極性較弱的DM-5色譜柱后，各組分分離效果得以改善。曾于柱溫100℃恒溫條件下測(cè)定[3]，結(jié)果異龍腦、龍腦及水楊酸甲酯峰在10 min內(nèi)即可流出，但供試品中的其他成分峰未完全流出，影響下一次進(jìn)樣分析，故在異龍腦、龍腦及水楊酸甲酯峰流出后，采用程序升溫，這樣可使雜質(zhì)峰完全流出。該法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。

冰片為龍腦與異龍腦的混合物，現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[3]中冰片的含量測(cè)定方法為以龍腦為對(duì)照品，以含龍腦的量控制冰片的質(zhì)量。本試驗(yàn)以冰片為對(duì)照品，以測(cè)得龍腦與異龍腦的總量作為醋酸氟輕松冰片乳膏中含冰片的量。3個(gè)廠家5個(gè)批號(hào)的樣品測(cè)定，結(jié)果顯示，僅1個(gè)廠家按處方量添加了冰片，說明在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中增加冰片含量的測(cè)定勢(shì)在必行。

[1]WS-1001-（HD-0295）-2002，國家藥品標(biāo)準(zhǔn)·化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)（第三冊(cè)）[S].

[2]丁 野，張嘉樂，梁建寧.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定解毒燒傷膏中冰片的含量[J]. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2005，22（6）：496.

[3]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：98.