229株大腸埃希菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的臨床分布及耐藥性分析

陳海兒 (寧波市婦女兒童醫(yī)院 315012)

超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)主要由克雷伯菌屬和大腸埃希菌等腸桿菌科細菌產(chǎn)生，該酶由質(zhì)粒介導，從廣譜β-內(nèi)酰胺酶突變而來[1]。為了解大腸埃希菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的臨床分布及耐藥性，筆者對我院2006年1月至10月臨床分離的229株大腸埃希菌進行ESBLs的檢測和耐藥測定，現(xiàn)將檢測結(jié)果報道如下：

1 臨床資料

1.1 菌株來源 229株大腸埃希菌均從我院門診或住院患者的尿液、痰液、白帶、分泌物、血液等標本中分離獲得。

1.2 儀器和試劑 購于法國生物梅里埃公司的BacT/Alert 3D血培養(yǎng)儀、VITEK-60全自動微生物分析儀、GNI卡及GNS卡、哥倫比亞瓊脂、血培養(yǎng)瓶及M-H瓊脂。藥敏紙片(杭州天和微生物試劑有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 氧化酶試驗 嚴格按儀器說明書進行操作，然后再經(jīng)VITEK-60全自動微生物分析儀進行細菌鑒定。

1.3.2 藥敏試驗 用M-H培養(yǎng)基按K-B法進行，用參考菌株做質(zhì)量控制。

1.3.3 確證試驗 用頭孢他啶(30μg/片)、頭孢他啶/克拉維酸(30μg/10μg)；頭孢噻肟(30μg/片)、頭孢噻肟/克拉維酸(30μg/10μg)兩組確證試驗。其結(jié)果為兩組中任何一組藥物加克拉維酸與不加克拉維酸的抑菌圈相比，增大值≥5mm時即可判斷為產(chǎn)ESBLs菌株。

1.4 對照標準 中國醫(yī)學菌種保存中心提供的肺炎克雷伯菌ATCC700603為陽性對照，大腸埃希菌ATCC25922為陰性對照。

2 結(jié)果

2.1 在臨床標本中產(chǎn)ESBLs與非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌分布情況 見表1。

由表1可以看出，229株大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs菌構(gòu)成百分比略高于非產(chǎn)ESBLs；229株大腸埃希菌標本來源以尿液所占比例最多，其次為陰道分泌物/白帶、膿液/創(chuàng)面、痰及咽拭子。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌在各標本來源所占的比例，尿液、痰及咽拭子居前兩位；非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌在各標本來源所占的比例，陰道分泌物/白帶、膿液/創(chuàng)面居前兩位。表1 不同標本中大腸埃希菌ESBLs檢測情況 [株（%）]

2.2 大腸埃希菌在臨床各科室分布情況 見表2。

表2 不同科室大腸埃希菌ESBLs檢測情況 [株（%）]

由表2可以看出，229株大腸埃希菌以外科病區(qū)分布最多，其次為婦科門診、兒科病區(qū)及產(chǎn)科病區(qū)。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌在各科室分布以婦科病區(qū)最多，其次為兒科病區(qū)、新生兒病區(qū)；非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌在各科室分布以婦科門診最多，其次為外科病區(qū)、產(chǎn)科病區(qū)。

2.3 藥敏試驗結(jié)果 見表3。

由表3可以看出，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對氨芐西林的耐藥率最高為100.0%，其次為頭孢唑林、頭孢曲松及復方磺胺甲惡唑；對亞胺培南的敏感率最高為100.0%，其次為呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦。非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對多數(shù)抗生素敏感性均較高，對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢吡肟、氨曲南、呋喃妥因敏感率均達90.0%以上；對亞胺培南敏感率最高，達100.0%。總體上，產(chǎn)ESBLs菌株對青霉素類、氨基糖苷類、喹諾酮類、磺胺類的耐藥率均高于非產(chǎn)ESBLs菌株。

表3 121株產(chǎn)ESBLs與108株非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對15種抗菌藥物的耐藥比較 [株（%）]

3 討論

大腸埃希菌是臨床分離的革蘭陰性桿菌中最常見的菌種，可引起各種類型的感染，常引起人類泌尿系感染。此外，該菌還可引起菌血癥、膽囊炎、肺炎及新生兒腦膜炎等疾病。常見于腹腔內(nèi)膿腫、腸穿孔繼發(fā)腹膜炎、腸道手術后繼發(fā)感染或大面積灼傷創(chuàng)面感染[1]。本文結(jié)果顯示，大腸埃希菌的標本來源主要為尿液，其次為膿液/創(chuàng)面，與上述觀點一致。

本文結(jié)果中產(chǎn)ESBLs菌株的構(gòu)成比為52.8%，遠高于張秋桂[2]報道的22.2%和吳敏等[3]報道的17.5%。筆者考慮可能與本地區(qū)近年來第三代頭孢菌素在臨床上應用廣泛有關。由于ESBLs可通過接合、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導等形式使耐藥基因在細菌間擴散，從而造成嚴重的醫(yī)院交叉感染和院外耐藥菌的擴散[4]。本文研究顯示，大腸埃希菌在各個科室均有分布，尤以外科病區(qū)及婦科門診居多。因此，臨床應加強對產(chǎn)ESBLs菌株的檢測，合理使用抗菌藥物，并加強隔離預防，控制產(chǎn)ESBLs菌在醫(yī)院內(nèi)的擴散。

張秋桂[2]報道，哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、呋喃妥因可作為治療由大腸埃希菌引起感染的一線藥物。根據(jù)美國臨床實驗室標準委員會提示，產(chǎn)ESBLs的菌株應避免使用青霉素類、頭孢菌素類藥物。從本文藥敏結(jié)果看，與上述觀點大體一致。另外，藥敏結(jié)果還顯示，產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌均對亞胺培南完全敏感。筆者認為應將亞胺培南作為治療由大腸埃希菌引起感染的首選藥物。醫(yī)院必須加強院內(nèi)感染控制，醫(yī)生應依據(jù)藥敏結(jié)果選擇合適抗生素。

[1]張卓然.臨床微生物學和微生物檢驗[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2003:104-105.

[2]張秋桂.產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2007，17(4):457-458.

[3]吳敏，鄧建平，姚春紅，等.大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株的分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2007，17(4):455-456.

[4]章清，魏麗，魏光美，等.大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐藥性變遷[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2004，14(2):220-222.