骨樂寧膠囊早期促進骨折愈合作用的臨床研究*

任守平，金鴻賓

（1.天津中醫(yī)藥大學附屬北辰中醫(yī)院骨傷科，天津 300400；2.天津醫(yī)院，天津 300211）

中藥治療骨折歷史悠久，積累了豐富的經驗，尤其近年來隨著基礎學科的發(fā)展，使中藥促進骨折愈合的研究上升到一個新的層次[1-3]。目前用于臨床治療骨折的中藥多以活血化瘀立法施治，從中醫(yī)辨證施治的角度分析，存在著一定的片面性。筆者擬定了益氣養(yǎng)血為主、活血化瘀為輔的“骨樂寧膠囊”，初步應用于臨床取得了滿意的治療效果。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 選擇條件：外傷性、新鮮（24 h內）、經X線攝片確診屬單純四肢長干骨骨折的住院患者。排除條件：年齡在13～65歲以外者；多發(fā)性骨折或有合并傷者；病理性骨折，孕產婦，患有其他如消化、代謝性疾病或肝腎功能檢查有異常指征的患者。

選取符合上述條件患者48例，但因再次手術、轉科及未能隨診等原因有6例脫失，統(tǒng)計結果計42例。其中男31例，女11例；年齡14～65歲，平均（31.2±4.3）歲。骨樂寧膠囊組（A組）23例、骨折挫傷膠囊組（B組）19例。骨折部位分布為：脛腓骨骨折（28例，占66.7%）、肱骨髁上骨折（4例）、尺橈骨遠端骨折（4例）、股骨上段骨折（3例）、肱骨干骨折（3例）。

1.2 藥物組方 骨樂寧膠囊：當歸、黃芪、熟地黃、白芍、川芎、柴胡、赤芍等組成。由天津中醫(yī)藥大學附屬北辰中醫(yī)院制劑科制成膠囊劑型，每粒合生藥0.3 g。骨折挫傷膠囊：哈爾濱華雨制藥有限公司生產中成藥，批號ZZ-5434-黑衛(wèi)藥準字（1989）第300127號。主要成分有：紅花、大黃、當歸、乳香、沒藥、血竭、地鱉蟲、自然銅等。每粒含生藥0.29 g。

1.3 治療方法 首先對骨折行手法整復或C型臂機下閉合復位，以石膏、小夾板或外固定架固定。投幣法隨機分為兩組，自入院當日起A組口服骨樂寧膠囊（5粒/次，3次/d，口服）；B組服骨折挫傷膠囊（5粒/次，3次/d，口服）。有開放傷口或固定釘孔者，適當給予抗生素預防感染治療。

1.4 檢測項目 分別于入院次日（1 d）、7、14、2、28 d抽取晨起空腹外周靜脈血5 mL。3 mL用全自動生化分析儀測定血清鈣、磷濃度；另2 mL以100 r/min離心取上清血清于-20℃恒溫保存以待同批次檢測血管內皮細胞生長因子（VEGF）、骨源性堿性磷酸酶（BAP）；入院次日（骨折整復后，1 d）、7、14、28、42、56 d時X線照片。并嚴密觀察患者服藥后的反應和傷肢腫痛等癥狀體征的變化。

1.5 主要儀器設備 全自動生化分析儀（日本，東芝TBA－40FR），酶標儀及洗板機（中國臺灣，Biorad 2550），VEGF人用ELISA法試劑盒（購自武漢博士德生物公司），BAP試劑盒（北京中生生物公司），X光機（GE-VR，500 mA）。

1.6 統(tǒng)計學處理 各組數(shù)據(jù)用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析，采用均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用兩獨立t檢驗。

2 結果

2.1 一般情況的變化 服藥3 d后：A組自述疼痛改善19例（占本組的82.6%，下同），腫脹減輕11例（47.8%）；B組疼痛改善16例（84.2%），腫脹減輕8例（42.1%）。治療過程中A組患者服藥后均未見不良反應，而B組有1例出現(xiàn)鼻衄（5.3%）。

本組患者治療至56 d時，骨折部位均無特殊不適，X線片示斷端間有連續(xù)性骨痂生成，部分病倒骨折線模糊，已達到或接近臨床愈合標準，未見骨折延遲愈合或不愈合現(xiàn)象發(fā)生。

2.2 VEGF 水平變化 取第 1、7、14、21、28 天時采集的外周靜脈血清，復溫，嚴格按照人VEGF試劑盒說明操作，酶標儀450 nm處測取OD值，繪制標準曲線圖，計算出VEGF濃度，結果見圖1。

從圖中可以看出A組在第7天時即高于B組，峰值期間明顯高于對照組（P＜0.01），有極顯著差異，并有持續(xù)高于B組的傾向。另外，也反映出傷后2～3周是VEGF表達的高峰期，這與用逆轉錄-聚（RT-PCR）法檢測實驗性骨折不同時期骨痂中VEGF表達的研究結果是一致的[4-5]，說明外周血中VEGF水平與其在骨折局部的合成與釋放為同步性增減。

2.3 血清骨源性堿性磷酸酶 外周靜脈血清復溫，按照人BAP試劑盒說明操作與計算，結果見表1。入院后1、7 d時測定BAP均屬值正常，無明顯差異，但第21天后兩組間有差異性（P＜0.05），以28 d時最為顯著（P＜0.01）。

2.4 血清鈣、磷離子濃度乘積 治療后兩組患者血清鈣磷離子乘積有所降低（見圖2），但兩組間無顯著差異。

2.5 X線片骨痂生長情況 參照上海骨科研究所X線片評價方法對骨痂生長情況進行評分：無骨痂生成計0分；少量骨痂生長，骨折線清晰者為1分；斷端間連續(xù)性骨痂形成，骨折線折模糊者計2分，較多連續(xù)性骨痂生成，骨折線基本消失者計3分。兩組在前兩周因均無骨痂生成，治療至56 d時的評分經統(tǒng)計學處理見表2，從表中可以看出兩組骨痂生長情況在28 d后出現(xiàn)顯著差異，同時期A組骨痂質量明顯高于B組。

表1 血清BAP濃度檢測結果(±s)Tab.1 The test results of serum BAP(±s)U/L

表1 血清BAP濃度檢測結果(±s)Tab.1 The test results of serum BAP(±s)U/L

注：與 B 組比較，*P＜0.05，**P＜0.01 。

組別A組B組n 2319第1天64.40±5.2369.72±7.01第7天79.18±9.3574.12±4.12第14天76.89±11.4481.63±10.74組別A組B組n 2319第21天115.54±13.10*88.73±9.17第28天124.64±11.06**101.48±12.41第56天87.82±7.2691.80±12.47

表2 X線片骨痂生長評分(±s)Tab.2 The X-ray scores of the callus(±s)分

表2 X線片骨痂生長評分(±s)Tab.2 The X-ray scores of the callus(±s)分

注：與 B 組比較，*P＜0.05，**P＜0.01 。

組別A組B組n 2319第14天0.68±0.270.52±0.18第28天1.52±0.17*1.04±0.22第42天2.62±0.38**1.14±0.26第56天2.97±0.35*2.15±0.09

3 討論

3.1 骨樂寧膠囊的立法組方 肢體外受跌仆打擊，皮肉筋骨首當其沖。但氣血循行于周身，外而營養(yǎng)皮肉筋骨，內而灌溉五臟六腑，故皮肉筋骨受傷的同時，必然傷及氣血，外而為腫為痛，內而臟腑功能失調。氣滯血瘀所致的傷處腫痛實乃外傷之標，而氣血臟腑功能失和才是傷病之本。所以，治療需氣血標本兼顧，益氣養(yǎng)血為主，活血化瘀為輔。骨樂寧膠囊立方旨在益氣養(yǎng)血、活血止痛。方中用黃芪補氣，以資生化之源，當歸辛甘溫潤，既補血養(yǎng)血，又能與白芍共同柔肝益陰，活血止痛；熟地黃、白芍滋陰養(yǎng)血，和營養(yǎng)肝；佐以“血中氣藥”之川芎調理氣血，柴胡協(xié)川芎升清降濁，宣暢氣機，以助推陳致新之功，并能防熟地黃之滋膩；酌用赤芍、桃紅活血化瘀通絡止痛。諸藥合用補中有通，補而不膩，使氣血調達、生化有源，從而達到瘀去新生，促進骨折愈合的目的。本組患者服用骨樂寧膠囊后未見有不良反應，而對骨代謝生化指標有正向調節(jié)作用，治療至56 d時，骨折均已達到或接近臨床愈合標準，證明了其立法組方的合理性與有效性。

3.2 骨樂寧膠囊對骨代謝生化及VEGF的調節(jié)作用 骨折的修復與重建離不開血管的再生，血管的再生在很大程度上決定著骨折愈合的速度與效果。VEGF是機體內促進血管內皮生長最具特異性的生長因子，它能與血管內皮細胞膜上的特異性受體結合，產生促血管內皮細胞分裂、增殖及誘導血管生成的作用[5-6]。從上述檢測結果可以看出，骨樂寧膠囊治療組較單純活血化瘀組患者血清VEGF含量要高，表明骨樂寧膠囊對VEGF的合成與釋放有一定的促進作用。在VEGF的作用下骨折斷端間血管的早期形成，有利于營養(yǎng)物質的輸送和代謝廢物的清除，也為其他細胞因子作用的發(fā)揮提供了基礎，從而促進的骨折愈合。

一般認為BAP能分解有機磷酸化合物，產生無機磷酸根離子促使它與鈣離子結合，形成羥磷灰石而沉積于骨組織；或分解焦磷酸鹽，解除其對骨組織鈣化的抑制作用，使骨鹽沉積，鈣化得以進行。鈣、磷是骨骼礦物質的主要成分，血清中鈣磷離子主要由骨骼系統(tǒng)調節(jié)。本組病例在治療后外周血清鈣磷離子乘積有所下降，對于一個平素消化吸收功能正常又無其他代謝性疾病的骨折患者來說，有可能是由于骨痂的生長代謝利用，鈣磷離子沉積過快所致，提示臨床在骨折愈合早期應及時補充調整。所以，本組病例中血清鈣、磷離子乘積的下降和BAP的升高，說明在骨樂寧膠囊的作用下成骨細胞活性增強，骨痂中鹽沉積加快，骨痂質量改善的表現(xiàn)，這一點在X線片上也得到了很好的印證。治療28 d時，骨樂寧組骨痂評分高于活血化瘀組，提示骨折愈合時間縮短。

總之，研究結果反映出骨樂寧膠囊能提高骨折愈合早期成骨細胞的活性，促進VEGF及BAP的合成與釋放而有利于骨折損傷部位血管再生重建和骨礦沉積。同時，血管的再生為營養(yǎng)物質的輸送的代謝產物的清除提供了前提，有利于骨折早期血腫的吸收，加快軟骨內骨化進程，從而促進骨折的愈合。

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