用 ELISA方法檢測乙型肝炎病毒血清標志物少見模式的分析

辛 華,隋少玉,牟洪香,高榮升,金 彪,張 英

(1.佳木斯大學附屬第一醫院檢驗科,黑龍江佳木斯 154003;2.佳木斯大學附屬第二醫院檢驗科,黑龍江 佳木斯 154002;3.佳木斯市醫保醫院,黑龍江佳木斯 154002)

乙型肝炎病毒(HBV)是一種嗜細胞病毒,是危害人民群眾健康的主要傳染病之一,它的血清學模式(俗稱“兩對半”模式)備受關注,是乙型肝炎臨床診斷和治療的重要依據。近年來,臨床上出現愈來愈多的 HBV血清標志物(HBVM)特殊模式,對該模式的研究有助于我們加深對 HBV感染發病機制的認識,提高對 HBV感染的診斷和防治水平。本文就HBVM特殊模式的產生原因,臨床意義分析如下。

1 材料與方法

1.1 對象

標本來自2009年1月至 12月在佳木斯大學附屬第一醫院住院及門診就診的隨機人員血清共13200例,檢測 HBV M五項。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器

使用北京普朗公司生產的 DNM-9602G型酶標儀及安圖生物公司生產的 Fluido洗板機。

1.2.2 試劑

乙肝檢測試劑購自科華實業生物技術有限公司,乙肝五項質控品購自衛生部臨檢中心。

1.3 方法

ELISA法,操作嚴格按試劑盒說明書要求進行。

2 結果

在 13200例樣本中共檢出710例 HBVM少見模式,結果如表1。

表1 710例 HBV M少見模式結果

3 討論

HBVM五項是由 HBV-DN A負鏈兩個開放讀碼框架S、C區基因復制表達所致。可以多角度、間接地反映 HBV復制感染情況。也可以用作抗病毒療效,乙型肝炎病情轉歸及預后評判。

在 HBsAg/HBsAb共存模式中 ,共檢出 5、6、7、8、9等陽性模式。應與 S區基因突變,不同 HBsAg亞型感染有關。出現該模式時,應結合臨床資料,肝臟功能指標,追蹤檢測HBVM,開展 HBV-DN A檢測,綜合分析 HBV感染狀況。模式 10的出現,可能與 C區基因 1896G→ A突變,病毒野生株與變異株共同存在有關。通常認為 HBeAg陽性是 HBV復制活躍的指標之一。HBeAb的出現,是 HBV復制減弱或停止,病情趨于好轉的標志,但近年來研究發現,急性重癥肝炎或慢性肝炎急性加重的 HBVM模式也見于 HBeAb陽性[1],因此對該少見模式應密切觀察肝功能各項指標,結合 HBV-DNA以制定治療措施。模式1臨床觀察表明,大多都是病毒基因整合至肝細胞 ,隨肝細胞復制,表達 HBsAg,并無完整的 Dane顆粒合成[2]。因此對于該模式的出現,不能簡單判定為 HBsAg攜帶者,應結合 HBV-DN A檢測,分析 HBV感染狀況[3]。模式 2和11的出現,可能與 HBsAg高濃度鉤狀效應和類風濕因子等自身抗體干擾有關。因此該模式的出現,將原血清稀釋5倍以上或通過兩步法復檢,以排除 HBsAg假陰性。模式4和12的出現可能有三種情況：(1)HBsAg呈低濃度水平,常規 ELISA方法無法檢測出來(2)HBV感染后的僅存感染標志物(3)HBsAg濃度高,因 HOOK效應所致的HBsAg假陰性。因此,對于該模式應該采取將原血清5倍以上稀釋或采取二步 ELISA方法并結合 HBV-DNA檢測,方可下結論。模式13、14、15系 HBV感染后已產生免疫力,并伴感染標志物的存在。

綜上所述,用一步法 ELISA檢測 HBVM時,出現的少見模式切不可妄下結論,應通過平行雙孔復檢或兩步 ELISA復檢并結合 HBV-DNA檢測,肝臟功能指標測定,并結合臨床資料,綜合分析 HBV復制、感染狀況。同時,還要做好動態隨訪觀察。

[1]林裕龍,彭永正,馮桂湘,等.乙型肝炎病毒前 C信號肽酶裂解位點變異對 HBeAg表達的影響 [J].中華檢驗醫學雜志,2004,27(1)：17-19

[2]李夢東.實用傳染病學 [M].第2版.北京：人民衛生出版社,1998,104-107

[3]楊道瓊,陳華根.單純 HBsAg陽性臨床分析[J].四川醫學,2004,25(12)：1326