胃癌組織 Survivin和 Bcl-2的表達及意義

李長福,鄭著家

(大慶油田總醫院消化科,黑龍江 大慶 163001)

胃癌是我國常見的惡性腫瘤之一,在我國其發病率居各類腫瘤首位 ,占全部惡性腫瘤死亡人數 1/4。因此,尋找新的胃癌防治方法有重要的臨床意義。研究表明,胃癌的發生、發展與凋亡細胞數目減少有密切聯系。細胞凋亡失控會引起細胞過度增殖和凋亡減少,從而導致腫瘤發生、發展。生存素(Survivin)屬于凋亡抑制蛋白 (IAP)家族,通過抑制 Caspase-3表達,抑制腫瘤細胞凋亡而促進腫瘤的發生、發展。Bcl-2是凋亡調控基因,廣泛抑制各種刺激因素誘導的細胞凋亡,延長細胞活力而發揮生物學作用。Survivin與 Bcl-2在胃癌發生、發展中的關系尚不明確。因此,本研究通過檢測胃癌組織中 Survivin和 Bcl-2表達,探討 Survivin和 Bcl-2與胃癌發生、發展的關系及其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 標本及來源

收集黑龍江省大慶油田總醫院 2008— 01～ 2009— 06手術切除胃癌標本40例,取癌組織同時取癌旁正常胃黏膜組織。 其中男 26例 ,女 14例,年齡 40～ 75(平均 65.12)歲,其中未 /低分化癌22例,中 /高分化癌18例;胃癌的分期采用1997年 U ICC分期標準進行 TNM分期 ,Ⅰ ～Ⅱ期 28例,Ⅲ ～Ⅳ期12例;無淋巴結轉移 21例,有淋巴結轉移19例;未侵及漿膜者20例,侵及漿膜者20例。

1.2 試劑及方法

兔抗人 Survivin和 Bcl-2單克隆抗體購于 Sigma生物技術公司。SP試劑盒購于北京中杉金橋生物技術公司。按試劑盒說明書操作。

1.3 免疫組化染色結果判斷標準

常規制備石蠟切片及 HE染色,組織標本均經40g/L甲醛固定,石蠟包埋,4μm厚連續切片,行病理組織學檢查。采用 SP試劑盒免疫組化方法染色,用 PBS替代一抗作陰性對照,癌旁正常組織作為正常對照。Survivin和 Bcl-2陽性染色位于細胞漿內,呈棕黃色顆粒狀。按陽性細胞數占細胞總數的比例判定：高倍鏡下選取10個視野,計數陽性細胞數 ,陽性細胞數 ＜10%(-),≥10%(+)。

1.4 統計學分析

采用 SPSS11.0統計包,數據用i2檢驗及 Spearman等級相關分析。

2 結果

2.1 Survivin陽性表達

Survivin陽性產物位于細胞漿中 ,呈棕黃色顆粒狀。在胃癌組織中 Survivin蛋白陽性率60.00%,在癌旁正常胃黏膜組織中 Survivin蛋白陽性率22.50%,兩者比較有顯著性差異 (i2= 11.605,P ＜ 0.01),見表 1。

表1 Survivin在胃癌組織與癌旁正常組織中的表達(n=40)

胃癌組織中 Survivin蛋白表達陽性率在男性患者中高于女性,但兩者比較差異無統計學意義 (P＞ 0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達陽性率在高/中分化癌組織中低于未/低分化癌組織,兩者比較有顯著性差異 (i2= 4.713,P＜0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達陽性率在Ⅰ～Ⅱ期癌組織中低于Ⅲ～Ⅳ期癌組織,兩者比較有顯著性差異(i2= 4.682,P＜0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達陽性率在無淋巴結轉移癌組織中低于有淋巴結轉移癌組織,但兩者比較差異無統計學意義 (i2= 3.480,P＞ 0.05);胃癌組織中 Survivin蛋白表達陽性率在無漿膜侵潤癌組織中低于有漿膜侵潤癌組織,兩者比較有顯著性差異 (i2= 4.286,P＜0.05);Survivin與胃癌各臨床病理因素間的關系,見表2。

表2 Survivin與胃癌臨床病理因素間的關系

2.2 Bcl-2在胃癌組織中的表達

40例胃癌組織中有30例 Bcl-2呈陽性表達,其陽性率為75.00%;30例 Bcl-2陽性表達中 Survivin陽性表達占22例,陽性率為73.33%;Survivin的表達與 Bcl-2的表達呈正相關(r= 0.471,P ＜ 0.01),見表 3。

表3 胃癌組織中 Survivin的表達與 Bcl-2的表達關系

3 討論

本實驗結果顯示,在胃癌組織中 Survivin陽性表達率為60.00%,且隨胃癌分化程度、TNM分期增加及漿膜侵潤程度,其陽性表達率亦隨之增高。研究結果提示 Survivin在胃癌發生、發展過程中可能起重要作用。在 Bcl-2陽性表達胃癌組織中 Survivin陽性率為73.33%,提示 Bcl-2與 Survivin可能在胃癌發生、發展過程中起協同作用,這些結果也進一步證實胃癌的發生、發展是多種基因和多種因子共同作用的結果。Survivin是 IAP家族中一個新成員,屬凋亡抑制因子,通過直接或間接抑制凋亡效應蛋白酶 Caspase-3和 Caspase-7活化來阻斷細胞凋亡過程,促進細胞增殖[1,2]。因此,Survivin參與腫瘤的發生、發展過程。Survivin基因在正常組織中不表達或低表達,而在腫瘤組織中呈高表達,這一特點使其可能成為判斷腫瘤病人發生、發展及預后的一項重要指標[3,4]。本實驗結果表明,在胃癌組織中 Survivin陽性表達較癌旁正常組織顯著增高,且隨胃癌分化程度、TNM分期增加及漿膜侵潤,其陽性表達率亦隨之增高。故推測 Survivin陽性表達可能是胃癌發生、發展的標志之一。檢測胃癌組織中Survivin表達可能對判斷腫瘤的發生和臨床進展有一定作用。有關胃癌組織中 Survivin與 Bcl-2蛋白表達的關系尚不明確。本研究結果顯示,在 Bcl-2陽性和陰性的胃癌組織中,Survivin陽性表達率分別為73.33%和20.00%,Survivin表達與 Bcl-2表達呈正相關,這與研究報道一致[5]。提示兩者表達可能在胃癌發生、發展過程中具有協同作用。這為進一步探索胃癌治療方案提供有價值的線索。胃癌的發生、發展是多因素、多階段、多基因變異的病理過程。其發生機制尚未完全闡明,但和多種基因表達異常密切相關。Survivin與 Bcl-2兩種生物因子的檢測,可作為胃癌發生與發展的重要參考指標,有望成為胃癌基因診斷性標志物和胃癌治療的新靶點。

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