突變型 P53在子宮腺肌病中的表達及意義

宋繼榮,宋 敏

(佳木斯大學附屬第一醫院婦產科,黑龍江 佳木斯 154003)

子宮腺肌病是指子宮內膜組織存在于子宮肌層中,并伴有不同程度的肌層平滑肌細胞增生和肥大[1]。該病雖然屬于婦科良性疾病,但具有惡性腫瘤的某些生物學行為,其確切的發病機理至今仍不十分清楚。近幾年來子宮腺肌病的發病機理多從惡性腫瘤發生的角度來探討已成為該疾病研究的突破點。P53基因的突變或失活均與多種腫瘤的發生發展有著密切的關系。本實驗應用免疫組化 SP法來檢測突變型P53在子宮腺肌病患者的在位內膜、異位內膜的表達及意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院 2009— 02～ 2009— 10經病理實驗室確定為子宮腺肌病的異位內膜的石蠟標本41例,并收集同期子宮腺肌病在位內膜37例作為研究組。另選經病理證實為非內異癥、非子宮內膜疾病(如子宮肌瘤)行子宮全切術或診斷性刮宮,病理證實為正常子宮內膜的石蠟標本30例作為研究組。所選標本均經重新切片后 HE染色和病理確診。研究組與對照組年齡、體重均無統計學意義。兩組月經規律,均無內科合并癥及免疫性疾病。術前6個月均未使用過激素類藥物和未放置宮內節育器。

1.2 方法

本實驗采用免疫組織化學 SP法將石蠟標本做4μm連續切片、染色。PBS替代一抗作為陰性對照,以已知陽性片作陽性對照。

1.3 判定標準

顯微鏡下根據細胞染色強度和染色細胞所占面積的得分之和進行評估：(1)染色強度評分：不著色為0分,黃色為1分,棕黃色為2分,黃褐色為 3分;(2)染色細胞占整張片面積評分：無陽性細胞染色為 0分,≤ 25%為1分,26%～ 50%為 2分,＞ 50%為3分。(3)兩種評分相加,0～ 1分為 (-),2分為弱陽性(+ ),3～ 4分為陽性(++ ),5～ 6分為強陽性(+++ )。

1.4 統計學處理

應用 SPSS13.0統計軟件對實驗數據進行 i2檢驗,檢驗水準 α=0.05。

表1 突變型 P53在正常子宮內膜、子宮腺肌病在位及異位內膜的表達

2 結果

見表 1。P53在正常子宮內膜中表達呈陰性;在子宮腺肌病患者異位內膜和在位內膜中表達均呈陽性,兩者比較差異有統計學意義 (i2=22.755,P＜0.05)。P53在子宮腺肌病在位內膜的表達與正常內膜的表達比較差異有統計學意義(i2= 11.853,P＜0.05)。P53在子宮腺肌病異位內膜的陽性表達平顯著高于正常子宮內膜兩者比較差異有統計學意義(i2= 50.508,P＜0.05)。

3 討論

P53蛋白被稱為人體內的一個關鍵的細胞凋亡調節因子。野生型 P53在細胞的周期中能夠阻滯細胞的凋亡、分化、靜息、DN A的損傷。突變型 P53與野生型 P53的生物學的功能恰恰相反,它不僅失去了對細胞生長的抑制作用,反而促進細胞的轉化和過度增殖,抑制細胞凋亡,使細胞的全部表型出現惡性化。正常的 P53蛋白生物伴隨期較短,僅20～30min,不易在組織細胞中堆積,在免疫組化法不能檢測其存在,突變型 P53蛋白生物伴隨期相對延長,達 24h左右,且穩定性增加,并可在組織細胞中堆積重而過度表達 ,易被 SP法檢測到[2]。我們可以認為,通過免疫組織化學法檢測出 P53蛋白陽性即提示突變型 P53的存在[3]。本實驗應用免疫組織化學染色法來對子宮腺肌病的在位內膜、異位內膜均、正常子宮內膜進行染色,檢測結果顯示,異位內膜陽性率較在位內膜陽性率高,這與 Gebel等[4]的研究報道相符,同時本研究還比較了在位內膜與正常子宮內膜陽性率,得出在位內膜陽性率高于正常子宮內膜。由此可見,由于異位內膜的凋亡性減弱,使其在子宮肌組織生存時間延長,并具有腫瘤樣過度增殖的特性,促使了子宮腺肌病的以發生、發展。本實驗采用免疫組織化學染色法,來觀察子宮腺肌病的異位子宮內膜及在位內膜突變型 P53蛋白的表達,結果顯示：子宮腺肌病組的陽性表達率明顯高于正常對照組,由此可以推測異位的子宮內膜在離開宮腔后仍然可以繼續生長、增值,像惡性腫瘤一樣,形成異位灶。同時實驗結果顯示子宮腺肌病突變型 P53蛋白的陽性率表達的升高與細胞凋亡水平的降低是同步的。因而得出結論：子宮腺肌病在位內膜和異位內膜中細胞凋亡受到了抑制很可能與突變型 P53蛋白的高表達有關。這與李紅霞等[5]的研究報道結果一致。

[1]徐叢劍.子宮內膜異位癥[M].北京：人民衛生出版社,2002,98

[2]Iggo R,Gatter K,Bartek J,et al.Increased expression of mutantformsofp530ncogeneinprimarylungcancer[J].Lancet,1990,335(8691)：675-679

[3]Yamaguehi A,Kurosaka Y,Fushida S,et al.Expression of p53 Protein in colorectal cancer and its relationship toshort- term prognosis[J].Cancer,1992,70(12)：2778-2884

[4]Gebel HM,Braun DP,Tambur A,et al.Spontaneous apoptosis of endometrial tissue is impaired in women with endometriosis[J].Fer-tile Steril,1998,69：1042-1047

[5]李紅霞,冷靜,姚玉宇,等.子宮內膜異位癥與細胞凋亡關系的研究[J].江蘇醫藥雜志,2000,26(1)：871-872