邁瑞 5300血細胞分析儀檢測肺氣腫等 100例患者血液對比分析

西安市中心醫院檢驗科 (西安 710003)張養民 白 妮

邁瑞 5300是世界上首款兼備 20 μ l微量用血和白細胞雙通道五分類功能的全自動血液細胞分析儀,采用半導體激光流式分析技術,測試速度 60個樣本 /h,全中文操作,可自定義報告單。現按照國際血液學標準化委員會(ICSH)制定的評價標準對其進行檢測和臨床應用分析,并將結果報告如下。

資料與方法

1 臨床資料 收集本院病房、門診和體檢中心的 EDT A-K2抗凝的全血細胞分析樣本 100例。其中感染科黃疸病人 20例;心內科高血脂癥病人 20例;消化科肝硬化病人 20例;呼吸科肺氣腫病人 20例;門診體檢中心健康人 20例;

2 儀器和試劑 邁瑞 5300血細胞分析儀及其配套試劑、標準品由深圳邁瑞公司提供。Sysmex SF3000血細胞分析儀及原裝試劑 EPK,FFD,FFS,SLS,FBA,RED,全血質控物和校準物分別由 Sysmex公司 (批號:53320822)和伯樂生命醫學產品 (上海 )有限公司(批號:76612)。

3 檢測方法

3.1 血細胞分析儀校準 實驗前分別用全血標準物和質控物對邁瑞 5300血細胞分析儀和 Sysmex SF3000血細胞分析儀進行校準和檢測,依據結果調整WBC,RBC,HGB,HCT,MCV,PLT等主要指標的實驗系數。

3.2 檢測方法 每天開機時做好室內環境質控,嚴格按照儀器操作程序進行測定。主要性能評價試驗:包括儀器的質量控制、穩定性、線性、不精密度、攜帶污染率、準確度、分類與手工分類的比較。

4 統計學處理 重復性檢測結果,本組資料對比以均數±標準差(x-±s)表示,采用 t檢驗、相關和回歸分析比較,應用 SPSS16.0軟件進行處理,以 P＜0.05為有顯著性差異,以 P＜0.01為有極顯著性差異。

結 果

1 儀器的質量控制 見表 1。用邁瑞 5300血細胞分析儀每天隨機做廠家提供的全血質控物,計算指標測定值的變異系數(CV)。儀器四項指標測定值的均小于 5%。

表1 血常規 4項指標全血質控物 CV值(%)

2 穩定性 見表 2。隨機取臨床全血標本 20份,標本于室溫分別放置 0、 0.5、1、2、4、8、 24和 48h后進行測定,各時段測定結果與 0h測定結果進行比較。48h內全血細胞計數(CBC)各項指標的 CV均小于 5%。

表2 48h內 CBC參數總變異率實驗結果(u=3,n=20)

3 線性分析 見表 3～ 4。高值標準品、白細胞(WBC)、紅細胞 (RBC)、血紅蛋白 (Hb)、血小板 (PLT)分別按照 1∶ 1,1∶ 2,1∶ 4,1∶ 8,1∶ 16,1∶ 32等滲生理鹽水稀釋后測定 3次取其均值為測定值,并與經計算所得各稀釋度相應的理論值比較。結果表明測定值(WBC,RBC,Hb,PLT)與理論值之間密切相關(γ＞ 0.999)。

表3 高值標準品不同稀釋倍數 3次測定結果均值表

表4 邁瑞 5300線性分析結果

4 不精密度

4.1 批內精密度取高、中、低值抗凝靜脈血各一份,按照儀器操作重復測定 12次,作為批內不精密度,計算 CV。大部分 CV為 0.42%～ 3.39%,但中性粒細胞、淋巴細胞的 CV＞5%。3項批內 CV分別為 28.12%,12.10%,4.56%。

4.2 批間精密度 用邁瑞公司提供的全血質控物連續測定 12d,作為批間不精密度,計算 CV[4]。 3項批間 CV分別為 28.44%,12.14%,4.01%。

5 攜帶感染率 見表 5。分別選取高、低值的WBC,RBC,PLT和 Hb,連續測定高值標本 3次(H1,H2,H3),低值標本 3次 (L1,L2,L3),計算公式為:攜帶污染率(%)= [(L1-L3)/(H1-H3)]× 100[2]。 結果攜帶污染率低 (0～ 0.2%)。

表5 邁瑞 5300攜帶感染率測試參數及結果

6 干擾試驗 邁瑞 5300測試含膽紅素(354.2 μ mol/L)和甘油 三酯 (10.5mmol/L)的標本 CBC,結果顯示其對結果基本無影響(P＞0.05)。

7 不準確度

7.1 與 ICSH推薦的參考方法比較 見表 6。用邁瑞 5300和參考方法對收集的 100例樣品進行測定,計算相關性。結果顯示,邁瑞 5300與參考方法測定的結果相關性好,γ值分別達到了 0.999,0.999,0.997。

表6 邁瑞 5300與 ICSH推薦的參考方法的比較(n=100)

7.2 與 Sysmex SF3000血細胞分析儀比較 用邁瑞 5300和 Sysmex SF3000血細胞分析儀[3]對收集的 100例樣品進行測定,計算相關性。結果顯示,兩者測試結果相關性良好,WBC,RBC,Hb,PLT,HCT,MCV,MCH,MCHC的相關系數γ值分別為 0.990,0.982,0.996,0.989,0.997,0.980,0.974,0.979。

8 WBC分類

8.1 重復性測試 隨機取一份樣品連續在邁瑞5300血細胞分析儀上測定 10次。結果見表 7。說明此儀器中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性細胞重復性好,嗜堿性細胞重復性一般。

表7 邁瑞 5300重復性分析結果

8.2 異常白細胞篩選與手工法分類比較 手工分類時以美國臨床實驗室標準化委員會(National committee for clinical laboratory standards,NCCLS)推薦的手工法[1]進行,由 3位有經驗的技術人員采用盲法分類,取平均值,與儀器進行相關性分析。結果顯示陽性結果預示值為 83.1%,陰性結果預示值為 79.1%,檢出靈敏度為 78.0%,檢出特異性為 83.9%,實驗總有效率為 82%。

討 論

通過對邁瑞 5300血細胞分析儀的臨床應用進行分析,發現其校準方便,質量控制良好,穩定性高;線性檢查理想;攜帶污染率非常低,說明該儀器具有完整的自動沖洗功能。各參數的不精密度良好(中性粒細胞和淋巴細胞除外)。其與 ICSH推薦的參考方法和Sysmex SF3000血細胞分析儀測定的結果相關性非常好;比較其與手工分類檢測異常白細胞篩選,檢出靈敏度為 78%,特異性為 83.9%,總有效率達 82%,情況良好。

決定血細胞分析儀質量的關鍵主要在于測量的準確性、重復性和校準功能的驗證。從結果可以看出,邁瑞 5300對淋巴細胞、中性粒細胞、單核細胞及嗜酸性粒細胞的重復性檢測結果良好,但是對嗜堿性粒細胞重復性較差。分析其原因可能在于血中嗜堿性粒細胞數量少,而分析技術或手段不夠完善,也可能與其在血中分布不均勻,儀器檢測的方法、原理有關。

BC-5300采用半導體激光和細胞化學染色[5],實現白細胞五分類和幼稚細胞、異形淋巴細胞報警功能,提供包括五分類在內的 27項檢測參數。他還是我國自主制造,完全擁有自主知識產權的血細胞分析儀。依托邁瑞獨特的二次加速流式細胞技術,20 μ l微量血液實現檢測,使之適合醫院門急診使用,滿足嬰幼兒及其他特殊人群血常規檢查需求,同時其快速的分析速度和高的靈敏度,使之又適合大中型醫院的批量檢測,有助于臨床疾病的診治。

[1]Villanova PA.National committee for clinical laboratory standards leukocyte differential counting NCCLS approved standard H20-A2[M].Publisher:Prentice Hall,1992:1500-1507.

[2]International council for standardization in hematology.Guidelines for evaluation of blood cell analysis including those used for differential leucocytes and reticulocyte counting and cellmarkerapplications. Prepared by clinical laboratory hematology[J]. Clin Lab Haem,1994,50(16):154-175.

[3]廖 益,王冬梅.Sysmex X T-2000高端血細胞分析儀性能概況綜合評價 [J].實用醫學雜志,2006,22(21):2528-2530.

[4]俞善丁.臨床基礎檢驗學 [M].北京:人民衛生出版社,1997:39-43.

[5]熊立凡,李樹仁.臨床檢驗基礎.第 3版.北京:人民衛生出版社,2001:7-55.