高效液相色譜法測定飲料中檸檬黃、日落黃含量

鞏強

檸檬黃、日落黃在飲料中作為著色劑被廣泛使用，《食品添加劑使用衛生標準》規定了其最高限量，本實驗在GB/T 5009.35-2003基礎上，對其檢驗方法進行了優化。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀（島津，配紫外檢測器）；0.02mol/L乙酸銨：經0.45um濾膜過濾；甲醇：色譜純，經0.45um濾膜過濾；檸檬黃、日落黃標準使用液 1ug/mL、2ug/mL、3ug/mL、4ug/mL，進樣前經0.45um濾膜過濾；聚酰胺粉（200目）；乙醇-氨溶液：取2mL的氨水，加70%乙醇至100mL；200g/L檸檬酸溶液。

1.2 樣品制備

稱取10.0g飲料于燒杯中，然后用20%檸檬酸調pH至酸性，加入0.5g～1.0g聚酰胺粉吸附色素，全部轉至G3漏斗中，以pH值為4的酸性熱水洗滌多次（約200mL），洗去糖等物質。用甲醇-甲酸溶液洗滌1次～3次，每次20mL，至洗液無色。再用70℃熱水多次洗至流出液為中性。用乙醇-氨水分次解吸，收集解吸液，于水浴除氨并蒸發至2mL，用50%乙醇定容至5mL，備測定用。

1.3 測定

色譜條件：波長：254nm；HjchromC18反相柱；流動相：0.02mol/L乙酸銨：甲醇（85：15）；流速：1mL/min；進樣體積 10ul；外標法峰面積定量。

1.4 檸檬黃、日落黃的標物圖譜（4ug/mL）

2 結果分析與討論

結果表明：飲料中，方法添加檸檬黃、日落黃回收率分別為99.2%、99.4%。與國家標準檢驗方法（GB/T 5009.35-2003）結果比較，經配對t檢驗（p>0.05）無顯著性差異。

本法與GB/T 5009.35-2003規定的方法不同之處在于：本法不需要梯度洗脫程序。原因是：GB/T 5009.35-2003規定的方法有8種著色劑的同時檢驗，而在實際的檢驗過程中可以根據產品的色澤通過感官確定其著色劑檢驗項目。當前，市場所售的飲料中添加檸檬黃、日落黃的占多數，因而，在實際檢驗中可以運用本法進行檢驗。GB/T 5009.35-2003規定的方法需要用到配置梯度洗脫裝置的液相色譜，有些檢驗機構尚缺乏此硬件設備，本方法的提出可以較好地解決這一問題。

[1]GB/T 5009.35-2003，食品中合成著色劑的測定[S].