豬瘟脾淋苗、豬O型口蹄疫和豬藍耳病滅活苗兩兩聯合應用的免疫效果觀察

文萍萍，陳代平，李金海，鄧永強

（四川省動物疫病預防控制中心，四川 成都 610041）

1 材料和方法

1.1 試驗動物 在較潔凈的豬場，選擇約180頭35～37日齡健康的斷奶仔豬，組間豬的大小基本一致。人工投料，豬自由采食，自由飲水。

1.2 試驗疫苗 豬O型口蹄疫滅活疫苗（Ⅱ），批號0703002；豬瘟活疫苗（脾淋苗），批號0709085；高致病性豬藍耳病滅活疫苗，批號0710091。按疫苗說明書的條件進行保存、運輸，使用時均在有效期內。

1.3 診斷試劑 口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒，由蘭州獸醫研究所生產，批號2007122401；豬瘟ELISA抗體檢測試劑盒，IDEXX公司產品，批號433220-P361；豬藍耳病抗體ELISA試劑盒，INGENASA公司產品，批號2331106。

1.4 試驗方案 將試驗豬分為9個試驗組，免疫注射時給所有豬佩戴牲畜耳標。具體方案詳見表1。

表1 試驗分組方案

1.5 免疫反應的臨床觀察 在接種疫苗后2h測量體溫一次，4h測量第二次體溫，同時觀察注射局部的反應和全身反應。

1.6 采血方案 于接種后0、4、14、21 d和28 d前腔靜脈采血，1～1.5mL/頭，血清析出后-20℃凍存，統一檢測。

1.7 檢測方法及結果判定 豬瘟ELISA抗體檢測試劑盒的檢測原理為阻斷ELISA；O型口蹄疫檢測試劑盒為液相阻斷ELISA抗體；豬藍耳病抗體ELISA試劑盒的檢測原理為間接ELISA。檢測時按試劑盒操作說明書進行。

1.8 數據分析 用SPSS13.0軟件進行分析。

2 結果與分析

2.1免疫反應的觀察 單獨免疫豬瘟疫苗后，豬體溫、食欲正常，未見免疫副反應產生。單獨免疫豬O型口蹄疫滅活疫苗（Ⅱ）或高致病性豬藍耳病滅活疫苗后，體溫升高0.5～1℃，精神狀態稍差，但很快恢復，無不食和精神不振的情況，注射部位無紅腫變化，總體免疫副反應較小。豬瘟與口蹄疫或高致病性豬藍耳病疫苗同時分部位免疫，豬的免疫副反應與單獨注射口蹄疫或高致病性豬藍耳病疫苗的情況基本一致。口蹄疫和高致病性豬藍耳病疫苗同時分部位免疫后，豬體溫升高1～2℃，精神狀態稍差，1d左右恢復，無不食和精神不振的情況，注射局部無紅腫變化，總體上免疫副反應較單獨免疫注射時明顯。

2.2 免疫抗體檢測結果

2.2.1 豬口蹄疫抗體檢測結果與分析 用液相阻斷ELISA 檢測 1、4、6、7、8 組豬在接種后 0、4、14、21 d 和28 d的口蹄疫抗體效價，結果見表2、表3。從表2可見，1組免疫后28 d，平均抗體效價可達71.77，4組與1組相比差異不大，而6組平均抗體效價大大低于1組。從表3可見，28 d時I組的免疫合格率可達66.67%，4組免疫合格率為50%，6組免疫合格率為0。7、8組母源抗體比1組高，相比1、4組產生的抗體效價要低一些。從1、4組看，豬瘟和口蹄疫同時分部位注射對口蹄疫的免疫效果有一定的影響，但差異不顯著（P＞0.05），總體來說是可以接受的；豬藍耳病和口蹄疫同時分部位免疫對口蹄疫的免疫效果影響很大（P＜0.01）。比較 7、8組和 1、4組可見，母源抗體對口蹄疫的免疫效果影響較大。

表2 口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA的檢測結果（幾何平均值） %

表3 口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測的免疫合格數

表4 豬瘟抗體檢測結果（幾何平均值） %

表5 豬瘟抗體檢測結果（陽性數）

2.2.2 豬瘟抗體檢測結果與分析 用ELISA檢測2、4、5、7、9 組的豬瘟抗體水平，結果見表 4、5。從 2、4 組看，豬瘟和口蹄疫同時分部位免疫對豬瘟的免疫效果影響不大（P＞0.05）。從2、5組看，豬藍耳病和豬瘟同時分部位免疫對豬瘟的免疫有一定的影響。從2、7、9組看，在豬瘟母源抗體較高時免疫，對豬瘟抗體的影響較大。

2.2.3 豬藍耳病抗體檢測結果與分析 用間接ELISA檢測豬藍耳病的抗體，0d的檢測結果表明該豬場部分仔豬的抗體效價達到1 000以上，說明該豬場已經感染了豬藍耳病，所以無法比較各組的差異。此外豬藍耳病的抗體與保護率之間無相關性，本試劑盒不能區分高致病性藍耳病疫苗的特異性抗體，凡是豬藍耳病的抗體均能檢出。故本報告未列出相應的檢測結果。

3 小結與討論

3.1 本次試驗表明，豬瘟脾淋弱毒疫苗和豬O型口蹄疫滅活疫苗（Ⅱ）同時分部位注射時，免疫副反應與單獨注射口蹄疫疫苗的情況一致，對口蹄疫和豬瘟免疫抗體的產生無影響，相互間干擾很小（P＞0.05），在生產實際中是可行的，這與張娟敏等人的報道是一致的，也是被我省這幾年的防疫工作所證實的。

3.2 本次試驗表明，高致病性豬藍耳病疫苗和豬O型口蹄疫滅活疫苗（Ⅱ）不能同時免疫，這可能與檢測方法、母源抗體水平高低等因素有關。豬瘟脾淋弱毒疫苗和高致病性豬藍耳病疫苗同時分部位免疫對豬瘟的免疫效果有一定的影響，王劍峰等也報道豬藍耳病疫苗對豬瘟的免疫效果有顯著影響。

3.3 該豬場所有母豬均免疫過兩次豬藍耳病疫苗，0 d時部分仔豬的抗體水平很高，可能存在隱性豬藍耳病。

3.4 此次試驗表明：仔豬只免疫1次口蹄疫疫苗（1 mL），免疫抗體合格率只能達到50%～66.67%，因此，生豬口蹄疫只免疫1次一般達不到保護效果，應加強免疫1次，這與農業部口蹄疫免疫方案規定的60日齡左右強化免疫1次是一致的。

3.5 通常認為豬瘟弱毒脾淋苗的免疫效果最好，本次試驗用豬瘟脾淋苗1頭份，抗體陽性率只能達到60%左右，因此實際生產中應在60日齡左右加強免疫1次，并且要根據當地實際情況制定合理的免疫程序。

本次試驗均采用ELISA方法對免疫效果進行評價，通常ELISA比IHA方法更客觀，更敏感，特異性更高，但該ELISA試劑盒沒有給出達到免疫保護的臨界值。

[1]張娟敏，張少東，蔣 皓，等.規模豬場主要疫病的免疫技術研究[J].浙江畜牧畜醫，2006，（2）：1-3.

[2]王劍峰，楊宗照，谷 藝.同時注射豬瘟和藍耳病疫苗對豬瘟抗體效價的影響試驗[J].浙江畜牧畜醫，2007，（1）：33.

[3]金大春，王躍川，季旭仁，等.豬口蹄疫免疫程序和抗體水平研究[J].畜禽業，2003，（8）：30-31.

[4]沈意興，王全溪，李國平，等.不同豬瘟疫苗對仔豬免疫效果對比試驗[J].福建畜牧獸醫，2007，（3）：8-10.

[5]黃立業，李瓊瑾.不同免疫時間豬瘟免疫抗體分析試驗[J].江西畜牧獸醫雜志，2007，（3）：10-11.