氣相色譜法測定陳皮中有機磷農藥的殘留量

高新花 李延團 張鳳梅 鄭爽爽

(1.中國海洋大學 山東青島 266003; 2.山東省煙臺哈博生物技術有限公司 山東煙臺 264006)

在全球的草藥銷售額中,我國中藥出口份額僅占5%左右,這與我國中醫藥大國的地位極不相稱[1]。其中的首要因素應該是藥品質量,而農藥殘留和重金屬污染則是影響藥品質量的重要因素[2]。歐美等許多國家對傳統藥和草藥制定了非常嚴格的標準[3]。中藥農藥殘留問題是中藥出口的瓶頸,必須制定出相應的限量標準。陳皮作為一種常用藥材,國際國內市場的需求量很大。然而在橘(陳皮為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥成熟果皮)的種植過程中,為了防治病蟲害,有機磷農藥的使用較普遍,因此由有機磷農藥殘留引起的污染不容忽視,本實驗采用毛細管氣相色譜法對不同產地陳皮中的14種有機磷農藥進行了含量測定,操作簡便,重現性好,結果準確可靠。

1 實驗儀器與試劑

GC6890N型氣相色譜儀(美國安捷倫公司);FPD檢測器;HP-5毛細管色譜柱(30m×0.32mm×0.25μm);METTLERTOLEDO AL104電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);低噪音空氣泵SGK-2LB(北京精華苑技術研究所);SGH-300高純氫氣發生器(北京精華苑技術研究所);DS-1高速組織搗碎機(上海標本模型廠);WH-866渦旋混合器(江蘇太倉科教儀器廠)。

試劑:有機磷農藥標準混合溶液儲備液(pg.mL-1):敵敵畏(1.96),甲胺磷(1.02),甲拌磷(2.00),樂果(2.00),敵殺磷(4.00),二嗪磷(3.47),甲基立枯磷(2.00),甲基對硫磷(2.04),馬拉硫磷(6.00),對硫磷(2.00),水胺硫磷(2.00),殺撲磷(3.43),丙溴磷(3.20),三唑磷(4.00)(以上標準品均購自Dr.Ehrenstorfer GmbH);丙酮(重蒸分析純,煙臺三和化學試劑有限公司);乙腈(分析純,天津市博迪化工有限公司);氯化鈉(140℃烘烤4h);水為蒸餾水。陳皮藥材為主產地收集及安國市售商品藥材。

表1 14種有機磷農藥的線性回歸方程、相關系數及檢測限

圖1 14種有機磷農藥混合標準溶液色譜圖

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱選擇HP-5毛細管色譜柱(30m×0.32mm×0.25μm)。柱溫采用程序升溫,初溫50℃,保持1min,然后以20℃/min升至140℃,再以13℃/min升至250℃,保持10min;進樣口溫度220℃,檢測器溫度250℃;載氣為高純氮(純度>99.999%),流量:3.0mL/min;氫 氣(純 度 >99.999% )流 量 :75mL/min;空 氣 流 量 :100mL/min;不分流進樣。

2.2 供試品溶液的制備

準確稱取陳皮樣品于60℃干燥4h,準確稱重計算樣品含水量。將干燥過的樣品粉碎過20目篩,準確稱取5.000g粉末于100mL具塞錐形瓶中,準確加水20mL浸泡過夜。將浸泡過夜的樣品倒入勻漿機中,加入50mL乙腈,高速勻漿2min(12000r/min)后用濾紙過濾,收集濾液至裝有5g氯化鈉的100mL具塞量筒中,蓋上塞子,劇烈振蕩1min,靜置15min,使乙腈相和水相充分分層,準確吸取10.0mL乙腈溶液,轉入15mL的刻度離心管中,緩緩通入氮氣,蒸發近干,最后用丙酮溶解并準確定容至5.0mL,并在渦旋混合器上混勻,作為供試品溶液待測。

2.3 標準曲線的繪制

取一定量的有機磷混標溶液,用丙酮分別稀釋成2,4,6,8,10倍的混標溶液,按“2.1”中的分析條件進行測定,以含量(μg/mL)為橫坐標(X),峰面積為縱坐標(Y),繪制14種有機磷的標準曲線,并確定最低檢測限,見表1。相關系數為0.9989～0.9999,以3倍信噪比計算,最低檢測限為0.003～0.02mg.kg-1。結果表明,各農藥的質量濃度(X)與峰面積(Y)呈良好的線性關系。14種有機磷農藥的氣相色譜圖見圖1。

2.4 回收率試驗

在陳皮中添加14種有機磷農藥3個含量水平,3個含量水平儲備溶液稀釋2,5,10倍的混合標準溶液,每個含量水平重復3次,按照“2.2”提取、凈化方法和“2.1”的檢測條件,計算加樣回收率,平均回收率分別為敵敵畏(86.7%),甲胺磷(84.6%),甲拌磷(84.8%)樂果(84.2%),敵殺磷(84.4%),二嗪磷(89.4%),甲級對硫磷(97.4%),甲級立枯磷(85.0%),馬拉硫磷(93.5%),對硫磷(90.1%),水胺硫磷(84.8%),殺撲磷(92.5%),丙溴磷(91.3%),三唑磷(87.7%)。符合多種有機磷農藥殘留的分析要求。

2.5 樣品測定

依照上述實驗方法對主產地收集及安國市售陳皮藥材的10個批次的樣品進行分析,結果見表2。經過對10批陳皮藥材的檢測,有3個批次檢出有機磷殘留(表2),其余7個批次未檢出。14種有機磷農藥有10種未檢出,檢出的4種為馬拉硫磷、水胺硫磷、丙溴磷和三唑磷。

表2 3個批次陳皮中有機磷農藥殘留(mg.kg-1)

3 結語

從實驗結果可以看出使用HP-5毛細管柱在上述條件下對中草藥中14種有機磷農藥進行分析,使14種化合物達到很好的分離。方法最低檢測限為0.003～0.02mg.kg-1,加樣回收率84.2%～97.4%,本實驗方法操作簡單,靈敏度高,分離效果好,且能夠節約大量時間和有機溶劑,適合大批量樣品農藥殘留的檢測。

[1]薛健,楊世林,陳建明,等.我國中藥材農藥殘留污染現狀與對策[J].中國中藥雜志,2001,26(9):637.

[2]陳建存.輸美中成藥重金屬/化學品污染及違反FDA規定情況[J].中國中醫藥信息雜志,2000,7(8):90.

[3]何迎春,吳新正.我國中藥材農藥污染狀況研究[J].江西中醫學院學報,2003,15(3):41.