性引誘劑與白僵菌聯合使用防治煙草甲蟲效果

鄒 曉， 羅 力， 張曉敏， 施 鳴， 楊 輝， 劉愛英＊

（1.貴州大學真菌資源研究所，貴陽 550025； 2.貴州大學昆蟲研究所，貴陽 550025；3.貴州中煙工業有限責任公司，貴陽 550004）

煙草甲蟲（Lasiodermaserricorne）是取食調制后煙葉的主要害蟲之一，它適應熱帶氣候，為害加工過程中各種形態的煙草。我國在20世紀90年代曾對全國貯煙害蟲的為害程度進行調查，每年因蟲害引起的質（重）量損失率大約為1.64%［1］。由于國內煙草系統提出生產綠色煙草的目標，因此生物防治開始受到關注。在煙草甲蟲的生物防治研究中，蘇云金芽胞桿菌（Bt）對煙草甲有一定的殺蟲活性，但效果并不理想［2］。生防真菌作為經過表皮入侵的殺蟲劑有其他殺蟲劑所不具備的優點，沒有化學殺蟲劑的殘留毒害，也不像Bt農藥必須經過昆蟲口腔進入腸道才能發揮作用［3］。煙草甲蟲的性引誘劑（主要成分為4，6－二甲基－7－羥基－3－壬酮）經常作為煙草倉庫蟲情監控的一種手段，目前已經可以通過化學方法大量合成［4］，從經濟上為應用奠定了基礎。在室外也有一些白僵菌與性引誘劑聯合防治的成功案例［5］，但在煙倉或倉庫條件下將真菌與主要害蟲性引誘劑聯合使用的報道不多見。本文用白僵菌結合煙甲性誘劑和甲蟲發生規律在防治煙草甲方面做一些探索。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株

球孢白僵菌（Beauveriabassiana）為貴州大學真菌資源研究所鑒定保存，保藏號：GZUIFR－GL5。白僵菌孢子培養基：麩皮80%，米糠10%，酒糟殼5%，玉米粉5%，等質量水，滅菌備用。培養好的白僵菌，陰涼處風干，過150目標準篩獲得孢子粉，孢子粉孢子含量約為4×1010個／g。

1.1.2 試驗用蟲

試驗對象為煙草甲蟲（Lasiodermaserricorne）。試驗地點設在中煙公司貴陽卷煙廠南明區煙葉醇化庫和貴陽卷煙廠技術中心倉庫。

1.1.3 煙箱和誘芯

試驗所用煙箱為200 kg裝煙葉的紙箱。煙草甲蟲誘芯片劑由武漢東昌倉儲技術有限公司出品，質量分數小于10%。

1.1.4 檢測用水盆

清水裝至水盆2／3處，水表面懸浮兩層紗布，使其吸水并浮于液面，煙草甲蟲能夠在其上爬行而不至于溺水，同時有利于觀察白僵菌產孢。

1.2 方法

1.2.1 貴陽地區煙草甲蟲發生規律調查

采用誘捕器調查成蟲蟲口情況，打開煙包對幼蟲蟲情進行觀察［6］。

1.2.2 煙箱內施菌

煙箱中的一側放置一些煙葉（2 kg左右），用單層醫用紗布包裹白僵菌孢子粉，以一小木棍輕輕敲打，使孢子逸散，在煙葉下部的煙箱側壁上貼2枚煙草甲蟲的性外信息素誘芯，再在煙箱內的另一側放入一盆具紗布的清水。

1.2.3 煙草甲蟲帶菌擴散能力的檢測

采用相同規格的煙箱，方法如1.2.2，不同之處在于不施加孢子粉。空白對照，在其他倉庫的煙箱中只放置清水盆，無誘芯和孢子粉。為避免人為活動帶菌，試驗人員分組并在不同的倉庫進行試驗。

1.2.4 白僵菌致死甲蟲的檢測

甲蟲尸體變白，在顯微鏡下觀察到典型的球孢白僵菌的產孢結構計為由白僵菌感染致死的甲蟲。蟲口死亡率為白僵菌感染致死的甲蟲占檢測總死蟲數量的百分比。

1.2.5 試驗設計

圖1中黑色部分為加有孢子粉的紙箱。每個倉庫孢子粉施用量都為5 g，1號庫施用孢子粉煙箱編號為E；2號庫施用的孢子粉煙箱為B、C各2.5 g；3號庫施用孢子粉的煙箱為 A、B、C、D（每箱用1.25 g）。對照庫煙箱位置只放在倉庫中的A、B兩處。

1.2.6 數據分析方法

試驗數據采用SPSS統計軟件中非參數卡方檢驗分析。

圖1 醇化庫內白僵菌粉與性誘劑使用位置示意圖

2 結果與分析

2.1 倉庫中各點白僵菌致死情況

表1中白僵菌對煙草甲蟲的致死率多在20%～30%，最高達61% 最低為0。在全部煙草甲蟲蟲尸中，可分為幾種死亡類型，自然死亡、白僵菌感染致死、白僵菌感染和其他因素混合致死、其他因素致死。在試驗中檢測的只是白僵菌感染致死的數值指標，對于其他可能的煙草甲致死指標未進行檢測，但也不能排除白僵菌在其中的作用。有文獻［6－7］記載白僵菌和化學農藥共同防治害蟲有協同增效作用，白僵菌與其他煙草甲致死因子的協同增效作用，即直接致死和其他因素死亡之間的灰度區應進一步研究。另外在對照庫同樣檢測到白僵菌致死的甲蟲，一方面說明煙草甲跨庫擴散能力很強，另一方面也可能是煙草甲自帶病原。在離試驗地點較遠的貴陽卷煙廠技術中心倉庫，用相同方法未檢測到白僵菌感染；同樣在醇化車間未施菌的密封煙箱內收集煙草甲蟲尸保濕培養也未檢測到白僵菌，排除了煙草甲自帶病原白僵菌的可能。

表1 白僵菌致死煙草甲占總死蟲數的百分比1） %

表2是對表1數據的統計分析結果，從中可以看出：采用不同的分析方式，出現了截然相反的結果。在分析全部取樣點時，各樣本點的煙草甲死亡率差異均極顯著，且每個倉庫都有一個最高值（見表1）。經過對倉庫實地調查發現，死亡率最高的樣本點都是在窗子附近，透光性較好。在以往的蟲情調查時，也發現過煙草甲盛發時在窗子上群集的現象。煙草甲的正趨光行為造成了在試驗分析中的差異顯著性，為了排除光線因素干擾而去除最高值進行分析。在表2中去除最高值后分析結果顯示為不同劑量和不同施藥方式對煙草甲蟲的致死效果差異不顯著。劑量差異不顯著的原因，或許是由于各施菌點白僵菌的密度太大超過了濃度引起差異的上限所致。

表2 表1中數據的非參數卡方檢驗分析1）

3 討論

在貴陽地區煙草甲蟲一年發生2～3代。越冬代成蟲在5月中下旬出現，第1代成蟲7月下旬出現，第2代成蟲8月下旬出現，8月上旬至10月底為發生高峰期，有世代重疊現象。在醇化倉庫人工加溫加濕的條件下，常年均可觀測到活動的煙草甲蟲，世代重疊現象嚴重。近些年煙草甲抗藥性逐年累積增加，導致化學用藥量越來越大，需要開發新的防治方法。在開展生物防治過程中，考慮到煙葉生產貯存的工藝特點不利于直接添加生物農藥，采取結合煙草甲發生規律、行為和生防制劑的方法可行性更好一些。

另外白僵菌與性引誘劑聯合使用防治害蟲已有報道［5］，是一個從實驗室研究走向田間應用的實例。采用這種辦法在倉庫這個相對封閉獨立的環境防治害蟲，相比于田間可控因素多，如果方法合適會取得比較好的結果。在應用白僵菌和性誘劑防治煙草甲的過程中，由于白僵菌侵染對濕度依賴大。而在煙草醇化過程中的防霉、防蟲工作要求濕度不能太高，這就需要菌株在低濕度下能夠侵染寄主昆蟲，因此應加強菌種的選育工作。在試驗中作者采取了一種折中的辦法即在局部小環境高濕處理，既增加白僵菌感染成功率又不必提高倉庫濕度。

根據對表2的分析，在防治中施用菌劑的方法可以簡化，一個倉庫有一個或兩個施藥點即可。利用甲蟲種群自身擴散習性就可以將菌劑散布到整個倉庫里甚至擴散到別的倉庫。在誘蟲過程中可結合甲蟲行為采取多種方法。如煙草甲喜歡取食含糖量高的優質煙葉、可以在誘捕環境中放置少量的優質煙葉延長甲蟲的停留時間從而提高侵染概率。另外對煙草甲的行為研究有待進一步深入，特別是感染白僵菌后其在趨性方面的變化對防治有重要意義。

［1］宋紀真，周漢平，奚家勤，等.煙草甲蟲為害損失調查［J］.煙草科技，2006（7）：56－59.

［2］齊緒峰，宋紀真，謝劍平，等.貯煙倉庫中蘇云金芽胞桿菌對煙草甲的殺滅活性［J］.煙草科技，2006（5）：57－59.

［3］鄒曉，張曉敏，楊輝，等.4種蟲生真菌對煙草甲蟲的侵染致死效果［J］.植物保護，2008，34（2）：40－43.

［4］古昆，李鮮，陳靜波，等.煙草甲蟲性信息素（7S）－（－）－4，6－二甲基－7－羥基－3－壬酮的立體選擇性合成 ［J］.應用化學，2001，18（8）：662－663.

［5］劉云鵬，夏成潤，王四寶，等.球孢白僵菌無紡布菌劑與引誘劑聯合防治松褐天牛初報［J］.安徽農業大學學報，2005，32（4）：415－418.

［6］鐘文堅，李小蘭，馬永瑾，等.煙草甲蟲發生規律及防治試驗［J］.廣西農業科學，2003（6）：48－50.

［7］陳斌，馮明光.兩種殺蟲真菌制劑與低用量吡蟲啉對溫室粉虱的協同防效 評價 ［J］.應用生 態 學 報，2003，14（11）：1934－1938.

［8］王濱，李農昌，樊美珍，等.白僵菌油劑與溴氰菊酯混合超低量噴霧防治馬尾松毛蟲［J］.中國森林病蟲，2003，22（3）：15－18.