真空采血管死腔對凝血功能檢查的影響

陳 莉，韋 瑩，利 峰

(遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院檢驗科，貴州遵義563000)

在臨床工作中，我們發(fā)現(xiàn)很多凝血功能初次檢查結果嚴重異常的標本，經(jīng)肉眼觀察無明顯凝塊、同臨床溝通后獲悉檢驗結果與患者癥狀不符，但重新抽血復查后結果又恢復正常。經(jīng)初步分析，懷疑與抗凝管死腔形成有一定關聯(lián)，而死腔是指真空采血管內大量未被血液填滿的空間[1]。為深入探討這種變化機制，做好止、凝血檢查的分析前質量控制，為此，我們采用2種不同抗凝管對血小板（PLT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、凝血酶原時間（PT）、凝血酶時間測定（TT）、纖維蛋白原（Fg）進行測定，報道如下:

1 材料與方法

1.1 對象 本院體檢健康學生志愿者共50例，其中男性32例、女性18例，年齡19～23歲，平均年齡21歲。經(jīng)以上各組人員知情同意后，由2名醫(yī)護人員在每位志愿者左、右臂同時采集空腹靜脈血。A組：采用由美國BD公司生產(chǎn)的54 mmol/L EDTA-K2及109 mmol/L枸櫞酸鈉小容量厚壁雙倍硅化內壁真空采血管（無死腔），分別采取血液2.7 mL。B組：采用湖南省瀏陽市醫(yī)用儀具廠生產(chǎn)的54 mmol/L EDTAK2、109 mmol/L枸櫞酸鈉玻璃管 (容量4 mL，加入血液1.8 ml后，管內仍有2 ml空間的死腔)。

1.2 儀器及試劑 使用SIMENS ADVIA-2120全自動血液分析儀測定PLT、試劑及質控采用SIMENS公司原裝配套試劑；SYSMEX CA-7000全自動血凝分析儀測定APTT、PT、TT、Fg，試劑及質控由DADE BEHRING公司提供。KDC-2044低速冷凍離心機由科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司生產(chǎn)。

1.3 實驗方法 采血后立即將A、B兩組EDTA-K2抗凝血液混勻后在ADVIA-2120全自動血液分析儀作PLT測定。將A、B兩組枸櫞酸鈉抗凝血在不拔蓋條件下20℃ 3000 r/min離心 10 min分離血漿，在CA-7000全自動血凝分析儀上及時測定PT、APTT、Fg、TT；將檢測后的B組枸櫞酸鈉抗凝血漿在間隔第一次測定2 h、4 h后檢測PT、APTT。各組數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS 12.0統(tǒng)計軟件處理，采用t檢驗，P<0.05視為有顯著差異。

2 結果

2.1 2種凝血管 PLT、PT、APTT、Fg、TT結果比較 B組中41例PLT檢測結果低于A組，但兩組間比較無顯著差異（P>0.05）。兩組間APTT測定結果比較有顯著差異 (P<0.05)，且其中有5例測定出現(xiàn)6s以上的較大差異。兩組間PT、Fg、TT無顯著差異（P>0.05）。

表1 2 種凝血管 PLT、PT、APTT、Fg、TT 結果比較(s)

表1 2 種凝血管 PLT、PT、APTT、Fg、TT 結果比較(s)

注：*與A組比較P<0.05

組別 n PLT(×109/L)PT(s)APTT(s)TT(s)Fg(g/L)A 50 204.8±46.7 11.4±0.7 27.7±3.0 18.0±2.4 2.85±0.43 B 50 199.0±46.1 10.9±0.8 31.2±3.9*17.8±1.8 2.80±0.43

表2 不同時間測定結果影響(s)

表2 不同時間測定結果影響(s)

注：#與及時測定組比較P<0.05

時間 n PT(s)APTT(s)及時 48 10.9±0.7 27.7±3.0 2 h 48 11.1±0.5 27.9±2.7 4 h 48 11.6±0.5 30.2±2.6#

2.2 不同時間測定PT、APTT結果比較 B組枸櫞酸鈉抗凝血漿標本在20℃4h內作PT測定，結果均無明顯差異（P>0.05），但APTT在20℃放置4h測定結果與及時組比較有顯著差異(P<0.05)。

3 討論

從表1看出，A、B兩組間PLT測定結果比較無顯著差異（P>0.05），但B組中41例PLT檢測結果均低于A組，這是因為國產(chǎn)真空采血玻璃管未經(jīng)硅化處理、抽血后形成死腔激活血小板活性增加，使PLT部分凝聚所致。有學者證實，真空采血管死腔會產(chǎn)生PF4 活性增強[2]。

B組有死腔抗凝管導致健康人的APTT延長，兩組間比較有顯著差異 (P<0.05)，且其中有5例測定出現(xiàn)6 s以上的較大差異，這可能與未硅化的抗凝管消耗部分凝血因子有關。但叢玉隆等證實，經(jīng)肝素治療后的急性心肌梗死患者，約15%～22%患者采用有死腔真空管采集的APTT結果較無死腔管明顯縮短。這與疾病狀態(tài)下管內死腔增加血小板與管壁作用的機會，或死腔中氣體對血小板的激活作用釋放出PF4，導致中和肝素，使APTT假性縮短有一定關聯(lián)[3,4]。這種在健康人群和疾病狀態(tài)產(chǎn)生完全相反APTT檢測結果的原因值得進一步探究。臨床上常采用APTT測定結果判斷患者肝素的治療效果及調節(jié)劑量，而APTT測定死腔激活血小板是隨機偶然事件，這在一定程度上增加了治療風險。有死腔的真空采血管可能導致PLT數(shù)量減低和APTT等結果的不確定性。因此，我們建議有條件的實驗室盡量使用厚壁雙倍硅化內壁無死腔真空采血管。

本實驗結果提示，PT、APTT測定在20℃室溫時2 h內測定較為合適（均P>0.05），但隨著時間的延長，內源性凝血途徑的Ⅷ、Ⅸ因子及共同凝血途徑的Ⅴ因子水平下降，使APTT檢測結果增高。很多學者證實，標本因素、放置溫度、離心速度、抗凝劑、儀器及試劑等因素均會影響凝血功能測定[5]。

4 結論

由于分析前質量管理具有的影響因素并非檢驗人員完全可控、質量缺陷的隱蔽性、責任難確定性等三大特點，使它成為決定檢驗結果“真實準確性”的前提條件[6]，因此在日常凝血功能檢查中，在技術層面上選擇無死腔的抗凝管、重視臨床標本的采集對提高醫(yī)療質量有重要意義。

[1]Jamie SJE,Bernard DW,Swami VK.et.al.Monitoring heparin therapy:APTT results from partial-vs full-draw Tubes[J].American Journal of Clinical pathology,1998,110(2):184-187.

[2]叢玉隆,吳麗媛,殷宗健,等.凝血試驗真空管“死腔”所致APTT、PF4 偏差探討[J].臨床檢驗雜志,2002,20（5）：263-264.

[3]Joist J,Eyers T.Laboratory Monitoring of heparin Therapy[J].Thrombosis Forum,1995,1(2):2.

[4]Triplett DA,Brandt JT.Laboratory Monitoring of Heparin Therapy[J].HemolianceTimes,1997,2(2):1.

[5]高長風.PT、APTT試驗的影響因素[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2005.21(24):3363-3364.

[6]申子瑜.臨床實驗室管理學[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007.212-216.